| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1. 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 Rab蛋白家族 | 第9-10页 |
| 1.1.1 Rabs的结构与功能 | 第9页 |
| 1.1.2 Rab7简介 | 第9-10页 |
| 1.2 Toll样家族 | 第10-13页 |
| 1.2.1 Toll样家族背景介绍 | 第10-11页 |
| 1.2.2 TLR7研究进展 | 第11页 |
| 1.2.3 TLR7信号通路 | 第11-12页 |
| 1.2.4 TLR7与疾病 | 第12-13页 |
| 1.3 干扰素简介 | 第13-14页 |
| 1.3.1 Ⅰ型干扰素的产生与分类 | 第13页 |
| 1.3.2 干扰素的作用 | 第13-14页 |
| 1.3.3 干扰素的临床应用 | 第14页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第14页 |
| 2 Rab7对巨噬细胞中TLR7诱导的Ⅰ型干扰素的表达调控研究 | 第14-24页 |
| 2.1 试验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 试试验验材料与试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.2 试剂配置 | 第15页 |
| 2.1.3 引物 | 第15-16页 |
| 2.2 试验方法 | 第16-19页 |
| 2.2.1 小鼠巨噬细胞株RAW264.7的培养 | 第16页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第16页 |
| 2.2.3 细胞总RNA的提取 | 第16页 |
| 2.2.4 cDNA的制备 | 第16-17页 |
| 2.2.5 目的基因的扩增 | 第17页 |
| 2.2.6 R848刺激后Rab7 mRNA水平表达时效关系研究 | 第17-18页 |
| 2.2.7 蛋白提取 | 第18页 |
| 2.2.8 BCA检测检测蛋白浓度 | 第18页 |
| 2.2.9 SDS-PAGE | 第18页 |
| 2.2.10 Western blotting | 第18-19页 |
| 2.3 结果分析 | 第19-24页 |
| 2.3.1 R848刺激RAW264.7细胞后Rab7的mRNA水平表达时效关系研究 | 第19-20页 |
| 2.3.2 Rab7突变体稳定表达的细胞株的鉴定 | 第20页 |
| 2.3.3 Rab7对R848诱导的IL-6和TNF-α mRNA表达水平的影响 | 第20-22页 |
| 2.3.4 Rab7对R848诱导的IFN-α和IFN-β mRNA表达水平的影响 | 第22-24页 |
| 2.3.5 Rab7对R848诱导的IP-10 mRNA表达水平的影响 | 第24页 |
| 3 Rab7调控巨噬细胞中TLR7信号通路的研究 | 第24-27页 |
| 3.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 3.1.1 试验材料与试剂 | 第25页 |
| 3.1.2 试剂配制 | 第25-26页 |
| 3.1.3 引物序列 | 第26页 |
| 3.2 试验步骤 | 第26-27页 |
| 3.2.1 小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞的培养 | 第26页 |
| 3.2.2 细胞计数 | 第26页 |
| 3.2.3 细胞转染 | 第26-27页 |
| 3.2.4 Real-time PCR检测 | 第27页 |
| 3.2.5 蛋白提取 | 第27页 |
| 3.2.6 BCA检测蛋白浓度 | 第27页 |
| 3.2.7 SDS-PAGE | 第27页 |
| 3.2.8 Western blotting | 第27页 |
| 4 结果分析 | 第27-32页 |
| 4.1 基因沉默后Rab7的表达 | 第27-28页 |
| 4.2 Rab7沉默后对细胞因子的影响 | 第28-31页 |
| 4.2.1 Rab7基因沉默对R848刺激的IL-6和TNF-α mRNA表达水平的影响.. | 第28-29页 |
| 4.2.2 Rab7基因沉默对R848刺激的IFN-α和IFN-β mRNA表达水平的影响 | 第29-30页 |
| 4.2.3 Rab7基因对R848刺激的IP-10 mRNA表达水平的影响 | 第30-31页 |
| 4.3 Rab7基因沉默对TLR7信号通路的影响 | 第31-32页 |
| 5 讨论 | 第32-34页 |
| 6 结论 | 第34页 |
| 7 展望 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 作者简介 | 第40页 |
