| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 中英文对照及英文縮写词表 | 第6-10页 |
| 1. 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 C-型凝集素受体家族 | 第10页 |
| 1.2 MGL的发现、表达和结构 | 第10-12页 |
| 1.3 MGL的相关配体与特异性识别 | 第12页 |
| 1.4 MGL的功能 | 第12-14页 |
| 1.4.1 MGL介导DC内吞 | 第12-13页 |
| 1.4.2 MGL介导免疫耐受 | 第13页 |
| 1.4.3 MGL阻止肿瘤细胞转移 | 第13-14页 |
| 1.5 MGL介导的信号通路 | 第14页 |
| 1.6 MGL在医学方面的应用 | 第14页 |
| 1.7 立题依据和研究思路 | 第14-15页 |
| 2. 材料与方法 | 第15-27页 |
| 2.1 主要实验材料和试剂 | 第15-18页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.2 抗体及试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-27页 |
| 2.3.1 PCR | 第19-20页 |
| 2.3.2 PCR产物回收 | 第20-21页 |
| 2.3.3 双酶切、连接及转化 | 第21页 |
| 2.3.4 挑菌和摇菌 | 第21-22页 |
| 2.3.5 质粒大提 | 第22页 |
| 2.3.6 Lipofectamine~(TM)2000瞬时转染 | 第22页 |
| 2.3.7 Amaxa细胞转染 | 第22-23页 |
| 2.3.8 免疫荧光 | 第23-24页 |
| 2.3.9 流式细胞术 | 第24页 |
| 2.3.10 Western blot | 第24-25页 |
| 2.3.11 慢病毒包装、浓缩和侵染 | 第25-27页 |
| 3. 实验结果 | 第27-46页 |
| 3.1 MGL全长及其截短体真核表达载体的构建 | 第27-38页 |
| 3.1.1 pcDNA3.1~+-MGL和pWPXLd-MGL系列真核表达载体的构建 | 第27-32页 |
| 3.1.2 pcDNA3.1~+-MGL-Flag和pWPXLd-MGL-Flag系列真核表达载体的构建 | 第32-38页 |
| 3.2 瞬转和稳转体系的建立 | 第38-41页 |
| 3.2.1 瞬转体系的建立 | 第38-40页 |
| 3.2.2 稳转体系的建立 | 第40-41页 |
| 3.3 MGL在细胞中的定位 | 第41-43页 |
| 3.3.1 MGL在Jurkat-MGL-Flag细胞中的定位 | 第41-42页 |
| 3.3.2 MGL在CHO-MGL和CHO-MGL-FLAG中的定位 | 第42页 |
| 3.3.3 MGL在iDC中的定位 | 第42-43页 |
| 3.4 地塞米松诱导IDC的MGL表达上调 | 第43-46页 |
| 3.4.1 Dex长时间处理使iDC的MGL表达上调 | 第43-44页 |
| 3.4.2 Dex短时间处理使iDC内的MGL表达上调 | 第44-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-47页 |
| 4.1 构建四套真核表达载体的意义 | 第46页 |
| 4.2 胞外区FLAG标签的添加不影响外源性MGL的上膜表达 | 第46页 |
| 4.3 MGL在细胞中的定位 | 第46-47页 |
| 5. 总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
