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氯化镧诱发星形胶质细胞乳酸合成、转运和兴奋性异常以及对神经元的损伤作用研究

摘要第4-8页
Abstract第8-12页
英文缩略语第13-19页
第一部分 氯化镧对星形胶质细胞乳酸生成以及星形胶质细胞-神经元乳酸转运的影响第19-58页
    1 前言第19-21页
    2 材料与方法第21-32页
        2.1 主要试剂和仪器第21-24页
            2.1.1 主要试剂第21-23页
            2.1.2 主要仪器第23-24页
            2.1.3 其他器材第24页
        2.2 细胞处理与培养方法第24-27页
            2.2.1 实验准备第24-25页
            2.2.2 实验动物与取材第25页
            2.2.3 细胞的原代培养第25-26页
            2.2.4 神经元与星形胶质细胞免疫荧光鉴定第26页
            2.2.5 细胞的处理第26-27页
        2.3 测定指标及方法第27-32页
            2.3.1 细胞活力检测第27-28页
            2.3.2 糖原含量测定第28页
            2.3.3 乳酸含量检测第28-29页
            2.3.4 mRNA转录水平测定第29-30页
            2.3.5 蛋白表达水平测定第30-31页
            2.3.6 LDH活性检测第31页
            2.3.7 糖原磷酸化酶活性检测第31-32页
        2.4 统计学分析第32页
    3 结果第32-54页
        3.1 神经元与星形胶质细胞免疫荧光鉴定第32-33页
        3.2 镧对星形胶质细胞存活率的影响第33-34页
        3.3 镧及FSK/ROL对星形胶质细胞形态学改变的影响第34-35页
        3.4 镧及FSK/ROL对星形胶质细胞乳酸水平的影响第35-36页
        3.5 镧对星形胶质细胞GLUT1表达水平影响第36-38页
        3.6 镧对星形胶质细胞GS表达水平影响第38-40页
        3.7 镧对星形胶质细胞磷酸化GP表达水平影响第40-42页
        3.8 镧对星形胶质细胞糖原水平影响第42-43页
        3.9 镧对星形胶质细胞LDHA表达水平影响第43-44页
        3.10 镧对星形胶质细胞LDHB表达水平影响第44-45页
        3.11 镧对星形胶质细胞总乳酸脱氢酶活性影响第45-46页
        3.12 镧与FSK/ROL对星形胶质细胞GP活性的影响第46-47页
        3.13 镧与FSK/ROL对星形胶质细胞GS/p-GS蛋白表达比的影响第47-48页
        3.14 镧对星形胶质细胞MCT1表达水平影响第48-50页
        3.15 镧对星形胶质细胞MCT4表达水平影响第50-52页
        3.16 镧对共培养神经元MCT2表达水平影响第52-54页
    4 讨论第54-56页
    5 结论第56-58页
第二部分 氯化镧对于星形胶质细胞兴奋性的影响第58-84页
    1 前言第58-60页
    2 材料与方法第60-67页
        2.1 主要试剂与仪器第60-63页
            2.1.1 主要试剂第60-62页
            2.1.2 主要仪器第62-63页
        2.2 细胞处理与培养方法第63页
            2.2.1 星形胶质细胞的培养与鉴定第63页
            2.2.2 细胞处理第63页
        2.3 测定指标及方法第63-66页
            2.3.1 星形胶质细胞IP3浓度检测第63-64页
            2.3.2 mRNA转录水平测定第64-65页
            2.3.3 蛋白表达水平测定第65页
            2.3.4 [Ca~(2+)]_i水平检测第65页
            2.3.5 Glu与D-serine水平测定第65-66页
        2.4 数据分析第66-67页
    3 结果第67-81页
        3.1 镧对星形胶质细胞PLC的表达水平影响第67-69页
        3.2 镧对星形胶质细胞mGluR5的表达水平影响第69-71页
        3.3 镧对星形胶质细胞胞内IP3水平影响第71-72页
        3.4 镧对星形胶质细胞内的钙离子水平影响第72-73页
        3.5 镧对星形胶质细胞Cx43的表达水平影响第73-75页
        3.6 镧对星形胶质细胞Cx30的表达水平影响第75-77页
        3.7 镧对星形胶质细胞胞内Glu水平影响第77-78页
        3.8 镧对星形胶质细胞上清中Glu水平影响第78-79页
        3.9 镧对星形胶质细胞胞内D-serine水平影响第79-80页
        3.10 镧对星形胶质细胞上清中D-serine水平影响第80-81页
    4 讨论第81-82页
    5 结论第82-84页
第三部分 氯化镧诱导星形胶质细胞过度兴奋对神经元的影响第84-106页
    1 前言第84-85页
    2 材料与方法第85-90页
        2.1 主要试剂和仪器第85-87页
            2.1.1 主要试剂第85-86页
            2.1.2 主要仪器第86-87页
        2.2 细胞的处理与培养方法第87页
            2.2.1 神经元的培养与鉴定第87页
            2.2.2 神经元的处理第87页
        2.3 测定指标及方法第87-89页
            2.3.1 蛋白表达水平测定第87-88页
            2.3.2 mRNA转录水平测定第88页
            2.3.3 细胞膜损伤检测第88页
            2.3.4 细胞凋亡率检测第88-89页
        2.4 数据分析第89-90页
    3 结果第90-104页
        3.1 CM(La~(3+))对神经元NMDAR亚单位表达水平的影响第90-93页
            3.1.1 CM(La~(3+))对NR1表达水平的影响第90-91页
            3.1.2 CM(La~(3+))对NR2A表达水平的影响第91-92页
            3.1.3 CM(La~(3+))对NR2B表达水平的影响第92-93页
        3.2 CM(La~(3+))对神经元[Ca~(2+)]_i含量的影响第93-94页
        3.3 CM(La~(3+))作用下的神经元凋亡率第94-95页
        3.4 CM(La~(3+))与CM(La-free)对于神经元NMDAR亚单位表达水平的影响第95-98页
            3.4.1 CM(La~(3+))与CM(La-free)对NR1的mRNA与蛋白表达水平影响第95-96页
            3.4.2 CM(La~(3+))与CM(La-free)对NR2A的mRNA与蛋白表达水平影响第96-97页
            3.4.3 CM(La~(3+))与CM(La-free)对NR2B的mRNA与蛋白表达水平影响第97-98页
        3.5 CM(La~(3+))与CM(La-free)对于神经元[Ca~(2+)]_i含量的影响第98-99页
        3.6 CM(La~(3+))与CM(La-free)作用神经元的凋亡率影响第99-100页
        3.7 MK-801、DCKA与DAAO对CM(La-free)作用神经元[Ca~(2+)]_i含量的影响第100-101页
        3.8 MK-801、DCKA与DAAO对CM(La-free)作用神经元存活率影响第101-102页
        3.9 MK-801、DCKA与DAAO对CM(La-free)作用神经元的细胞膜损伤水平影响第102-103页
        3.10 MK-801、DCKA与DAAO对CM(La-free)作用神经元的凋亡率影响第103-104页
    4 讨论第104-105页
    结论第105-106页
本研究创新性的自我评价第106-107页
参考文献第107-119页
综述第119-139页
    参考文献第127-139页
攻读学位期间取得的研究成果第139-141页
致谢第141-142页
个人简历第142页

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