| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 斑马鱼 | 第10页 |
| 1.2 斑马鱼转基因概述 | 第10-14页 |
| 1.2.1 转基因技术 | 第10-11页 |
| 1.2.2 Tol2转座子系统 | 第11-12页 |
| 1.2.3 Gateway克隆技术 | 第12-14页 |
| 1.3 斑马鱼心血管发育及调控机理 | 第14-16页 |
| 1.3.1 斑马鱼心血管发育过程 | 第14页 |
| 1.3.2 斑马鱼心血管发育的分子调控机制 | 第14-15页 |
| 1.3.3 HDGC3与心脏发育 | 第15-16页 |
| 1.4 本课题的研究意义、内容和目的 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-36页 |
| 2.1 材料 | 第18-24页 |
| 2.1.1 菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 质粒 | 第18页 |
| 2.1.3 斑马鱼品系 | 第18页 |
| 2.1.4 主要试剂、酶和试剂盒 | 第18-21页 |
| 2.1.5 主要耗材及仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.6 主要是试剂的配制 | 第22-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 分子克隆 | 第24-31页 |
| 2.2.2 转基因斑马鱼的构建 | 第31-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-53页 |
| 3.1 pTol2(cmlc2：HDGC3-EGFP)表达载体的构建及其表达分析.. | 第36-40页 |
| 3.1.1 pTol2(cmlc2：HDGC3-EGFP)表达载体的构建 | 第36页 |
| 3.1.2 pTol2(cmlc2：HDGC3-EGFP)表达载体的表达分析 | 第36-40页 |
| 3.2 pTol2(HDGC3：EGFP)表达载体的构建及其表达分析 | 第40-45页 |
| 3.2.1 pTol2(HDGC3：EGFP)表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.2.2 pTol2(HDGC3：EGFP)表达载体的表达分析 | 第41-45页 |
| 3.3 pTol2(Titin：HDGC3-EGFP)表达载体的构建及其表达分析 | 第45-49页 |
| 3.3.1 pTol2(Titin：HDGC3-EGFP)表达载体的构建 | 第45页 |
| 3.3.2 pTol2(Titin：HDGC3-EGFP)表达载体的表达分析 | 第45-49页 |
| 3.4 HSP-FLP重组质粒的构建及其表达分析 | 第49-53页 |
| 3.4.1 pMD18-T-FLP克隆载体鉴定 | 第49-50页 |
| 3.4.2 HSP-FLP-EGFP表达载体的鉴定 | 第50页 |
| 3.4.3 pTol2-HSP-FLP-ires-EGFP表达载体的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4.4 pTol2-HSP-FLP-EGFP重组表达载体显微注射验证 | 第51页 |
| 3.4.5 HSP-FLP重组蛋白表达载体的表达分析 | 第51-52页 |
| 3.4.6 HSP-FLP重组蛋白表达载体转基因斑马鱼的鉴定 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| 4.1 绿色荧光蛋白 | 第53页 |
| 4.2 利用Tol2构建的转基因斑马鱼 | 第53-54页 |
| 4.3 启动子诱捕方法在模式生物中的潜在应用 | 第54-55页 |
| 4.4 关于Gateway重组系统 | 第55页 |
| 4.5 构建转基因斑马鱼的意义 | 第55-57页 |
| 5 结语 | 第57-58页 |
| 6 其他工作 | 第58-61页 |
| 6.1 重组质粒pET-28a-Dnajb6b的构建与鉴定 | 第58页 |
| 6.2 Dnajb6b融合蛋白诱导表达及纯化 | 第58-60页 |
| 6.3 Dnajb6b基因蛋白的多克隆抗体的制备与特异性检测 | 第60页 |
| 6.4 Dnajb6b基因蛋白在斑马鱼不同发育时期的表达 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录一 | 第66-67页 |
| 附录二 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
