| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-22页 |
| 1.1 鸭短喙侏儒综合征概述 | 第14-15页 |
| 1.2 鹅细小病毒概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 GPV基因组结构特征 | 第15-16页 |
| 1.2.2 GPV基因编码蛋白功能 | 第16-17页 |
| 1.2.3 GPV形态特征及理化特性 | 第17页 |
| 1.3 GPV宿主范围及培养特性 | 第17-18页 |
| 1.4 GPV实验室诊断 | 第18-19页 |
| 1.4.1 临床症状及剖检变化 | 第18页 |
| 1.4.2 分子生物学方法 | 第18页 |
| 1.4.3 血清学方法 | 第18-19页 |
| 1.5 GPV免疫学研究 | 第19页 |
| 1.6 鸭圆环病毒 | 第19-20页 |
| 1.6.1 鸭圆环病毒生物学特性 | 第19-20页 |
| 1.6.2 致病机理 | 第20页 |
| 1.6.3 DuCV检测方法 | 第20页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-37页 |
| 2.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 毒(菌)株及鸭胚 | 第22页 |
| 2.1.2 实验样本来源 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.5 常规试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 检测传统GPV与NGPV的双重半套式PCR方法的建立 | 第24-28页 |
| 2.2.2 新型鹅细小病毒核酸探针的制备及应用 | 第28-29页 |
| 2.2.3 新型鹅细小病毒的分离及基因组分析 | 第29-34页 |
| 2.2.4 NGPV与DuCV混合感染的调查 | 第34-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-59页 |
| 3.1 双重半套式PCR方法的建立及应用 | 第37-41页 |
| 3.1.1 双重半套式PCR方法的最佳反应条件 | 第37页 |
| 3.1.2 双重半套式PCR方法的特异性试验结果 | 第37-38页 |
| 3.1.3 双重半套式PCR方法的灵敏性试验结果 | 第38页 |
| 3.1.4 双重半套式PCR方法的应用 | 第38-41页 |
| 3.2 NGPV核酸探针的制备及临床应用 | 第41-44页 |
| 3.2.1 探针PCR制备结果 | 第41页 |
| 3.2.2 pGPV探针灵敏性试验结果 | 第41页 |
| 3.2.3 pGPV探针特异性试验结果 | 第41-42页 |
| 3.2.4 地高辛标记的pGPV探针对临床病料的检测 | 第42页 |
| 3.2.5 核酸探针对不同地区樱桃谷鸭检测结果 | 第42-43页 |
| 3.2.6 核酸探针对病鸭不同组织脏器的检测结果 | 第43-44页 |
| 3.3 NGPV的分离及病毒基因组分析 | 第44-53页 |
| 3.3.1 NGPV的分离及基因组扩增 | 第44页 |
| 3.3.2 NGPV反向重复区域分析 | 第44-46页 |
| 3.3.3 NGPV功能蛋白中同步变异位点 | 第46页 |
| 3.3.4 NGPV衣壳蛋白中同步变异位点 | 第46页 |
| 3.3.5 NGPV全基因组及Rep蛋白和Cap蛋白进化树构建 | 第46-49页 |
| 3.3.6 NGPVRep蛋白和Cap蛋白二级结构分析 | 第49-50页 |
| 3.3.7 NGPV功能蛋白分析及三维结构构建 | 第50-53页 |
| 3.3.8 7株NGPV毒株的重组性分析 | 第53页 |
| 3.4 NGPV与DuCV混合感染的研究 | 第53-59页 |
| 3.4.1 不同鸭场NGPV与DuCV混感的统计 | 第53-54页 |
| 3.4.2 鸭胚中NGPV与DuCV混感的检测 | 第54-55页 |
| 3.4.3 DuCV-1和DuCV-2在病料的检出率统计 | 第55-56页 |
| 3.4.4 NGPV和DuCV在NGPV阳性鸭不同脏器的检测 | 第56-57页 |
| 3.4.5 DuCV全基因组的扩增 | 第57-58页 |
| 3.4.6 DuCV基因组分析及进化树的构建 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.1 双重半套式PCR方法与核酸探针方法的建立及应用 | 第59页 |
| 4.2 NGPV全基因组分析 | 第59-61页 |
| 4.3 NGPV与DuCV混合感染研究 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表学术论文情况 | 第75页 |
