玉米弯孢霉叶斑病菌Clk1基因的克隆与功能分析
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略语索引 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 玉米叶斑病的发生与危害 | 第11-13页 |
| 1.1 玉米小斑病 | 第11-12页 |
| 1.2 玉米大斑病 | 第12页 |
| 1.3 玉米弯孢霉叶斑病 | 第12-13页 |
| 1.4 叶斑病菌生理分化监测 | 第13页 |
| 2 玉米叶斑病菌致病机理 | 第13-15页 |
| 2.1 侵染过程 | 第14页 |
| 2.2 致病因子 | 第14-15页 |
| 3 植物病原真菌信号转导与致病性 | 第15-17页 |
| 3.1 信号转导类型 | 第15-16页 |
| 3.2 致病相关信号转导途径 | 第16-17页 |
| 4 玉米叶斑病菌信号转导途径的研究进展 | 第17-19页 |
| 4.1 玉米小斑病菌 | 第17-18页 |
| 4.2 玉米大斑病菌 | 第18-19页 |
| 5 科学问题的提出. | 第19-25页 |
| 第二章 玉米弯孢霉叶斑病菌Clk1 基因的克隆 | 第25-38页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-29页 |
| 2.1 Clk1 基因同源片段的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2 Clk1 基因侧翼序列的克隆 | 第27-28页 |
| 2.3 Clk1 基因拷贝数的分析 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 3.1 Clk1 基因同源片段 | 第29-33页 |
| 3.2 Clk1 基因侧翼序列 | 第33-35页 |
| 3.3 Clk1 基因的拷贝数 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-38页 |
| 第三章 玉米弯孢霉叶斑病菌Clk1 基因的敲除 | 第38-53页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| 1.1 供试菌株和质粒 | 第38页 |
| 1.2 培养基 | 第38页 |
| 1.3 试剂 | 第38-39页 |
| 1.4 主要仪器 | 第39页 |
| 2 试验方法 | 第39-43页 |
| 2.1 敲除载体构建流程 | 第39-40页 |
| 2.2 同源敲除载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.3 同源重组 | 第41-42页 |
| 2.4 敲除子的筛选 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-50页 |
| 3.1 同源敲除载体 | 第43-45页 |
| 3.2 转化子 | 第45-46页 |
| 3.3 敲除子 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第四章 Clk1 基因敲除子生物学性状分析 | 第53-64页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 2 试验方法 | 第54-55页 |
| 2.1 菌落形态的观察 | 第54页 |
| 2.2 生长速度的测定 | 第54页 |
| 2.3 产孢性状的观测 | 第54页 |
| 2.4 色素性状的观测 | 第54-55页 |
| 2.5 蛋白质组2-DE 分析 | 第55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-60页 |
| 3.1 菌落形态 | 第55-56页 |
| 3.2 生长速度 | 第56-57页 |
| 3.3 产孢性状 | 第57-58页 |
| 3.4 色素性状 | 第58页 |
| 3.5 蛋白图谱 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第五章 Clk1 基因敲除子致病相关性状分析 | 第64-78页 |
| 1 材料 | 第64-65页 |
| 1.1 供试菌株 | 第64页 |
| 1.2 鉴别寄主 | 第64页 |
| 1.3 培养基 | 第64-65页 |
| 1.4 试剂 | 第65页 |
| 2 试验方法 | 第65-68页 |
| 2.1 离体叶片致病性检测 | 第65-66页 |
| 2.2 细胞壁降解酶活性测定 | 第66-67页 |
| 2.3 毒素提取与活性检测 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-74页 |
| 3.1 对离体叶片致病性 | 第68-71页 |
| 3.2 细胞壁降解酶的活性 | 第71-72页 |
| 3.3 毒素的产量与致病性 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
| 第六章 总结与展望 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-86页 |
