| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一部分 应用 shRNA 沉默 Hsf1 可抑制 PLC/PRF5 肝癌细胞株的恶性生长 | 第14-32页 |
| ·前言 | 第14页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第14-21页 |
| ·细胞株 | 第14-15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要的溶剂配制 | 第15-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-26页 |
| ·DMEM 培养 PLC/PRF5 细胞 | 第21页 |
| ·构建表达 shRNA-Hsf1 逆转录病毒载体 | 第21页 |
| ·建立表达 shRNA/Hsf1 的 PLC/PRF5 细胞株 | 第21-22页 |
| ·收集并裂解细胞 | 第22页 |
| ·用 BCA 试剂盒测定细胞总蛋白浓度 | 第22-23页 |
| ·蛋白质凝胶电泳 | 第23-25页 |
| ·PLC/PRF5 肝癌细胞 MTT 实验（MTT assay） | 第25-26页 |
| ·平板克隆形成实验（Plate clone formation assay, PCFA） | 第26页 |
| ·流式细胞仪实验（Flow cytometry assay, FCA） | 第26页 |
| ·实验结果 | 第26-30页 |
| ·shRNA-Hsf1 可有效地抑制 PLC/PRF5 肝癌细胞中的 Hsf1 表达 | 第26-27页 |
| ·shRNA-Hsf1 抑制 PLC/PRF5 肝癌细胞生长和细胞集落形成 | 第27-29页 |
| ·shRNA-Hsf1 阻断 PLC/PRF5 细胞于细胞周期 G1 期 | 第29页 |
| ·shRNA-Hsf1 可诱导抑癌基因 P53 和 Rb 蛋白的表达 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第二部分 应用 2-DE 分析 Hsf1 对 PLC/PRF5 细胞株的生长调控 | 第32-46页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·材料及试剂 | 第33-41页 |
| ·细胞株 | 第33页 |
| ·2-DE 主要试剂及配制 | 第33-35页 |
| ·2-DE 蛋白样品的处理 | 第35-37页 |
| ·2-DE 第一向等电聚焦 | 第37-38页 |
| ·2-DE 第二向 SDS-PAGE 电泳 | 第38-40页 |
| ·2-DE-Western blot | 第40页 |
| ·2-DE-GST Pulldown | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·2-DE-Western blot shRNA-Hsf1 可有效地抑制 PLC/PRF5 肝癌细胞中的 Hsf1 的表达 | 第41-42页 |
| ·2-DE 银染结果 | 第42页 |
| ·2-DE 考染结果 | 第42-43页 |
| ·2-DE-GST-Pull down 结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 文献综述 Hsf1 介导的热休克反应在肝癌发生中的作用 | 第50-60页 |
| 1 | 第51页 |
| ·Hsfl 的结构 | 第51页 |
| ·Hsfl 的功能 | 第51页 |
| 2 | 第51-52页 |
| ·Hsf1 与肿瘤的关系 | 第51-52页 |
| ·Hsf1 形成肿瘤的机制 | 第52页 |
| 3 | 第52-54页 |
| ·肝癌的流行病学 | 第52-53页 |
| ·肝癌的发病机制 | 第53-54页 |
| ·病毒性肝炎引起的肝癌机制 | 第53页 |
| ·黄曲霉素引起的肝癌的机制 | 第53页 |
| ·基因突变引起的肝癌机制 | 第53-54页 |
| ·水源污染引起的肝癌机制 | 第54页 |
| ·化学物质引起的肝癌机制 | 第54页 |
| ·免疫因素引起的肝癌机制 | 第54页 |
| 4. Hsf1 与肝癌的关系 | 第54-55页 |
| 5. 问题及展望 | 第55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 在读期间获得奖励 | 第62-63页 |
