| 论文创新点 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一部分 引言 | 第15-47页 |
| 第一章 综述 | 第15-47页 |
| 1.1 乙型肝炎病毒 | 第15-20页 |
| 1.1.1 乙型肝炎病毒的流行病学简介 | 第15-16页 |
| 1.1.2 乙型肝炎病毒的感染 | 第16-17页 |
| 1.1.3 乙型肝炎病毒的形态及结构 | 第17-18页 |
| 1.1.4 乙型肝炎病毒的生命周期 | 第18-20页 |
| 1.2 乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)功能简介 | 第20-22页 |
| 1.2.1 HBeAg的结构以及产生 | 第20-21页 |
| 1.2.2 HBeAg的功能 | 第21页 |
| 1.2.3 HBeAg的突变 | 第21-22页 |
| 1.3 白细胞介素8(IL-8) | 第22-26页 |
| 1.3.1 IL-8的发现与研究历史 | 第22页 |
| 1.3.2 IL-8的结构 | 第22-23页 |
| 1.3.3 IL-8的产生及分泌 | 第23-24页 |
| 1.3.4 IL-8的功能 | 第24-25页 |
| 1.3.5 IL-8与疾病 | 第25-26页 |
| 1.4 环加氧酶2(COX-2) | 第26-29页 |
| 1.4.1 COX-2与炎症反应 | 第27页 |
| 1.4.2 COX-2的表达调控 | 第27-29页 |
| 1.5 干扰素(interferon,IFN) | 第29-34页 |
| 1.5.1 干扰素基因和蛋白 | 第30页 |
| 1.5.2 Ⅰ型干扰素的受体 | 第30-31页 |
| 1.5.3 Ⅰ型干扰素的信号传导途径 | 第31-32页 |
| 1.5.4 干扰素产生的抗病毒蛋白 | 第32页 |
| 1.5.5 病毒对抗干扰素通路的策略 | 第32-34页 |
| 1.6 干扰素λ(IFNλ) | 第34-40页 |
| 1.6.1 干扰素λ家族的发现 | 第34-35页 |
| 1.6.2 干扰素λ家族的结构及遗传特性 | 第35-36页 |
| 1.6.3 干扰素λ的表达 | 第36-38页 |
| 1.6.4 干扰素λ介导的信号通路 | 第38-39页 |
| 1.6.5 干扰素λ的生物学功能 | 第39-40页 |
| 1.7 细胞因子信号传导抑制蛋白2(SOCS-2) | 第40-47页 |
| 1.7.1 SOCS家族简介 | 第40-42页 |
| 1.7.2 SOCS-2基因的表达调控 | 第42页 |
| 1.7.3 SOCS调节的细胞因子信号通路 | 第42-47页 |
| 第二部分 乙型肝炎病毒诱导炎症因子调控网络的机制研究 | 第47-84页 |
| 前言 | 第47-49页 |
| 第二章 乙型肝炎病毒诱导一种新的炎症因子调控网络 | 第49-70页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第49-52页 |
| 2.1.1 临床样本 | 第49页 |
| 2.1.2 质粒 | 第49页 |
| 2.1.3 干扰RNA | 第49-50页 |
| 2.1.4 生物化学试剂 | 第50页 |
| 2.1.5 抗体与检测引物 | 第50页 |
| 2.1.6 细菌菌种及细胞株 | 第50-51页 |
| 2.1.7 培养基 | 第51页 |
| 2.1.8 实验仪器 | 第51-52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-59页 |
| 2.2.1 质粒DNA的提取 | 第52-53页 |
| 2.2.2 哺乳动物细胞的相关实验操作 | 第53-55页 |
| 2.2.3 哺乳动物细胞的cDNA的制备 | 第55-56页 |
| 2.2.4 PCR反应 | 第56-57页 |
| 2.2.5 荧光素酶活性检测 | 第57页 |
| 2.2.6 蛋白质免疫印迹法(Western Blot) | 第57-58页 |
| 2.2.7 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第58-59页 |
| 2.3 实验结果 | 第59-68页 |
| 2.3.1 血清临床学IL-29、IL-8及COX-2表达水平检测 | 第59-60页 |
| 2.3.2 细胞学IL-29、IL-8、COX-2及PGE_2表达水平检测 | 第60-61页 |
| 2.3.3 IL-29在人DC细胞以及肝癌细胞系中激活IL-8的表达 | 第61-63页 |
| 2.3.4 HBV通过IL-29激活IL-8的表达 | 第63-64页 |
| 2.3.5 IL-8抑制HBV感染所诱导的IL-29 | 第64-66页 |
| 2.3.6 IL-8在人PBMC细胞和肝癌细胞中激活COX-2的表达 | 第66-67页 |
| 2.3.7 HBV通过IL-8激活COX-2的表达 | 第67-68页 |
| 2.3.8 COX-2抑制HBV感染所诱导的IL-8 | 第68页 |
| 2.4 讨论 | 第68-70页 |
| 第三章 IL-8对IL-29表达的调控机制的研究 | 第70-77页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第70-71页 |
| 3.1.1 质粒 | 第70页 |
| 3.1.2 抗体与检测引物 | 第70-71页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第71页 |
| 3.2 实验方法 | 第71-72页 |
| 3.2.1 HBeAg、HBsAg检测 | 第71页 |
| 3.2.2 乙型肝炎病毒core associated DNA荧光定量PCR检测方法 | 第71-72页 |
| 3.3 实验结果 | 第72-76页 |
| 3.3.1 IL-8抑制IL-29启动子上的ISRE活性以及IRF3/7基因的表达 | 第72-73页 |
| 3.3.2 IL-8抑制IL-29的受体IL-10R2的表达 | 第73-74页 |
| 3.3.3 IL-8具有拮抗IL-29抗乙肝病毒的能力 | 第74-76页 |
| 3.4 讨论 | 第76-77页 |
| 第四章 IL-8对COX-2表达的调控机制的研究 | 第77-84页 |
| 4.1 实验材料及仪器 | 第77-78页 |
| 4.1.1 质粒 | 第77页 |
| 4.1.2 干扰RNA | 第77-78页 |
| 4.1.3 生物化学试剂 | 第78页 |
| 4.1.4 抗体与检测引物 | 第78页 |
| 4.1.5 实验仪器 | 第78页 |
| 4.2 实验方法 | 第78页 |
| 4.3 实验结果 | 第78-82页 |
| 4.3.1 CREB和C/EBP识别位点在IL-8调控COX-2的过程中起到了重要的作用 | 第78-80页 |
| 4.3.2 IL-8通过ERK以及JNK信号通路激活COX-2的表达 | 第80-82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-84页 |
| 第三部分 乙型肝炎病毒e抗原调控干扰素通路的研究 | 第84-99页 |
| 前言 | 第84-86页 |
| 第五章 乙型肝炎病毒e抗原抑制IFNα/IFNλ,激活的JAK/STAT信号通路 | 第86-92页 |
| 5.1 实验材料及仪器 | 第86-87页 |
| 5.1.1 质粒 | 第86页 |
| 5.1.2 生物化学试剂 | 第86页 |
| 5.1.3 抗体与检测引物 | 第86页 |
| 5.1.4 细菌菌种及细胞株 | 第86-87页 |
| 5.1.5 实验仪器 | 第87页 |
| 5.2 实验方法 | 第87页 |
| 5.3 实验结果 | 第87-90页 |
| 5.3.1 HBeAg在HepG2细胞中抑制IFNα/IFNλ诱导的STAT1磷酸化和p-STAT1入核 | 第87-89页 |
| 5.3.2 HBeAg抑制IFNα/IFNλ诱导的抗病毒基因的表达以及IFNα/IFNλ抗HBV的能力 | 第89-90页 |
| 5.4 讨论 | 第90-92页 |
| 第六章 乙型肝炎病毒e抗原调控IFNα/IFNλ通路的机制研究 | 第92-99页 |
| 6.1 实验材料及仪器 | 第92-93页 |
| 6.1.1 质粒 | 第92页 |
| 6.1.2 干扰RNA | 第92页 |
| 6.1.3 抗体与检测引物 | 第92-93页 |
| 6.1.4 细菌菌种及细胞株 | 第93页 |
| 6.1.5 实验仪器 | 第93页 |
| 6.2 实验方法 | 第93页 |
| 6.3 实验结果 | 第93-98页 |
| 6.3.1 HBeAg在HepG2细胞中诱导SOCS-2的表达 | 第93-94页 |
| 6.3.2 HBeAg在HBV的病毒基因激活SOCS-2表达过程中起决定性作用 | 第94-95页 |
| 6.3.3 SOCS-2抑制IFNα/IFNλ激活的ISRE报告基因活性及STAT1磷酸化水平 | 第95-97页 |
| 6.3.4 SOCS-2的干扰RNA阻断HBeAg对IFNα/IFNλ激活的JAK/STAT信号通路的抑制作用 | 第97-98页 |
| 6.4 讨论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-113页 |
| 攻博期间发表和待发表的论文 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
