摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 β-甘露聚糖酶的定义 | 第11-12页 |
1.2 β-甘露聚糖酶的分类 | 第12页 |
1.3 β-甘露聚糖酶的来源及酶学性质 | 第12-15页 |
1.3.1 植物来源的β-甘露聚糖酶 | 第12-13页 |
1.3.2 动物来源的β-甘露聚糖酶 | 第13页 |
1.3.3 微生物来源的β-甘露聚糖酶 | 第13-15页 |
1.4 β-甘露聚糖酶产生菌的筛选与鉴定 | 第15-16页 |
1.4.1 β-甘露聚糖酶产生菌的筛选 | 第15页 |
1.4.2 β-甘露聚糖酶产生菌的鉴定 | 第15-16页 |
1.5 β-甘露聚糖酶的分离纯化与活性测定 | 第16-17页 |
1.5.1 β-甘露聚糖酶的分离纯化 | 第16页 |
1.5.2 β-甘露聚糖酶活力的测定 | 第16-17页 |
1.6 β-甘露聚糖酶的诱导表达 | 第17页 |
1.7 β-甘露聚糖酶的应用 | 第17-18页 |
1.8 本研究的目的意义与主要研究内容 | 第18-20页 |
1.8.1 目的意义 | 第18页 |
1.8.2 主要研究内容 | 第18-20页 |
第二章 产β-甘露聚糖酶菌株的筛选与鉴定 | 第20-36页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第20-23页 |
2.1.1 供试土样 | 第20页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.3 主要试剂与溶液 | 第21-22页 |
2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 土样预处理及富集培养 | 第23页 |
2.2.2 菌株的分离纯化及初筛 | 第23-24页 |
2.2.3 菌株的复筛 | 第24页 |
2.2.4 粗酶液的制备 | 第24页 |
2.2.5 粗酶液酶活力的测定 | 第24-25页 |
2.2.6 菌种的保藏 | 第25页 |
2.2.7 甘露聚糖酶产生菌株的形态学及生理生化鉴定 | 第25页 |
2.2.8 菌株16S rDNA的分子生物学鉴定 | 第25-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-34页 |
2.3.1 甘露糖标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
2.3.2 产酶菌株的富集与初筛 | 第29-30页 |
2.3.3 产酶菌株的复筛 | 第30-31页 |
2.3.4 菌株的形态学鉴定 | 第31页 |
2.3.5 菌株的生理生化鉴定 | 第31-32页 |
2.3.6 菌株的分子生物学鉴定 | 第32-34页 |
2.4 讨论 | 第34-36页 |
第三章 产β-甘露聚糖酶菌株的产酶条件优化 | 第36-51页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第36-37页 |
3.1.1 菌种 | 第36页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第36页 |
3.1.3 主要试剂与培养基 | 第36-37页 |
3.2 实验方法 | 第37-40页 |
3.2.1 菌株产β-甘露聚糖酶培养条件的单因素实验优化 | 第37-39页 |
3.2.2 菌株产β-甘露聚糖酶培养条件的正交试验 | 第39-40页 |
3.2.3 菌株产β-甘露聚糖酶的产酶曲线绘制 | 第40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-49页 |
3.3.1 碳源种类对菌株产酶的影响 | 第40-41页 |
3.3.2 碳源浓度对菌株产酶的影响 | 第41页 |
3.3.3 氮源种类对菌株产酶的影响 | 第41-42页 |
3.3.4 氮源浓度对菌株产酶的影响 | 第42-43页 |
3.3.5 金属离子种类对菌株产酶的影响 | 第43-44页 |
3.3.6 金属离子浓度对菌株产酶的影响 | 第44-45页 |
3.3.7 培养基初始pH对菌株产酶的影响 | 第45-46页 |
3.3.8 培养温度对菌株产酶的影响 | 第46页 |
3.3.9 装液量对菌株产酶的影响 | 第46-47页 |
3.3.10 摇床转速对菌株产酶的影响 | 第47页 |
3.3.11 正交试验 | 第47-49页 |
3.3.12 菌株产酶曲线的测定 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
第四章 β-甘露聚糖酶的初步纯化及其酶学性质研究 | 第51-65页 |
4.1 材料与仪器 | 第51-52页 |
4.1.1 菌种 | 第51页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第51-52页 |
4.1.3 主要试剂与溶液 | 第52页 |
4.2 实验方法 | 第52-56页 |
4.2.1 蛋白质含量的测定 | 第52-53页 |
4.2.2 β-甘露聚糖酶活力的测定 | 第53页 |
4.2.3 β-甘露聚糖酶粗酶液的纯化 | 第53-55页 |
4.2.4 β-甘露聚糖酶的酶学性质研究 | 第55-56页 |
4.3 结果与分析 | 第56-63页 |
4.3.1 蛋白质含量标准曲线的绘制 | 第56-57页 |
4.3.2 β-甘露聚糖酶的硫酸铵盐析曲线的测定 | 第57页 |
4.3.3 β-甘露聚糖酶的丙酮沉淀曲线的测定 | 第57-58页 |
4.3.4 β-甘露聚糖酶的葡聚糖凝胶G-75层析 | 第58-59页 |
4.3.5 β-甘露聚糖酶的纯化结果 | 第59页 |
4.3.6 β-甘露聚糖酶的SDS-PAGE检测 | 第59-60页 |
4.3.7 温度对β-甘露聚糖酶活力的影响 | 第60-61页 |
4.3.8 pH对β-甘露聚糖酶活力的影响 | 第61-62页 |
4.3.9 常见金属离子对β-甘露聚糖酶活力的影响 | 第62页 |
4.3.10 酶反应动力学常数的测定 | 第62-63页 |
4.4 讨论 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
附录 | 第75-79页 |
附录1 | 第75-78页 |
附录2 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |