摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩率与对照表 | 第7-13页 |
第1章 引言 | 第13-25页 |
1.1 食物过敏及其危害 | 第13-15页 |
1.1.1 食物过敏 | 第13页 |
1.1.2 食物过敏的危害 | 第13页 |
1.1.3 食物过敏的免疫学机制 | 第13-14页 |
1.1.4 食物过敏诊断及过敏原管理 | 第14-15页 |
1.2 牛乳过敏 | 第15-20页 |
1.2.1 牛乳过敏的流行病学调查 | 第15-16页 |
1.2.2 牛乳中主要过敏原 | 第16-17页 |
1.2.3 牛乳过敏原的诊断及管理 | 第17-18页 |
1.2.4 酪蛋白 | 第18-19页 |
1.2.5 α-乳白蛋白 | 第19页 |
1.2.6 β-乳球蛋白 | 第19-20页 |
1.3 牛乳β-乳球蛋白聚合体研究进展 | 第20-22页 |
1.3.1 β-乳球蛋白聚合的机制 | 第20页 |
1.3.2 β-乳球蛋白聚合的影响因素 | 第20-22页 |
1.3.3 过敏原聚合体的免疫特性变化 | 第22页 |
1.4 立体背景与研究内容 | 第22-25页 |
1.4.1 立体背景 | 第22-23页 |
1.4.2 研究内容 | 第23-25页 |
第2章 牛乳β-乳球蛋白的分离纯化及低聚体制备 | 第25-49页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 材料与设备 | 第25-26页 |
2.2.1 试剂与材料 | 第25-26页 |
2.2.2 主要仪器与设备 | 第26页 |
2.3 溶液配制 | 第26-28页 |
2.3.1 SDS-PAGE和Native-PAGE所用溶液的配制 | 第26-27页 |
2.3.2 诱导低聚体所需溶液的配制 | 第27-28页 |
2.4 实验方法 | 第28-31页 |
2.4.1 牛乳β-乳球蛋白的分离纯化 | 第28页 |
2.4.2 SDS-PAGE电泳检测分离纯化得到的β-乳球蛋白纯度及鉴定 | 第28-29页 |
2.4.3 牛乳β-乳球蛋白诱导聚合的实验方案设计 | 第29-30页 |
2.4.4 连续梯度的Native-PAGE电泳的配制 | 第30-31页 |
2.5 结果与分析 | 第31-46页 |
2.5.1 牛乳β-乳球蛋白纯化结果 | 第31-35页 |
2.5.2 牛乳β-乳球蛋白低聚条件的确定 | 第35-40页 |
2.5.3 最佳条件诱导得到的样品的电泳图谱及质谱鉴定 | 第40-46页 |
2.6 讨论 | 第46-48页 |
2.6.1 对本实验中的牛乳β-乳球蛋白中的基因型进行分析 | 第46页 |
2.6.2 不同温度和聚合时间对牛乳β-乳球蛋白聚合的影响 | 第46-47页 |
2.6.3 关于不同离子强度对牛乳β-乳球蛋白聚合的影响 | 第47-48页 |
2.6.4 关于不同pH对牛乳β-乳球蛋白聚合的影响 | 第48页 |
2.7 本章小结 | 第48-49页 |
第3章 牛乳β-乳球蛋白低聚体的理化特性 | 第49-59页 |
3.1 引言 | 第49页 |
3.2 实验材料与设备 | 第49-50页 |
3.2.1 试剂与材料 | 第49页 |
3.2.2 主要仪器与设备 | 第49-50页 |
3.3 溶液的配置 | 第50页 |
3.4 实验方法 | 第50-51页 |
3.4.1 牛乳β-乳球蛋白低聚体的粒度检测 | 第50页 |
3.4.2 牛乳β-乳球蛋白低聚体的外观形态观察 | 第50页 |
3.4.3 牛乳β-乳球蛋白低聚体自由巯基的定量 | 第50-51页 |
3.4.4 牛乳β-乳球蛋白低聚体的二级结构的检测 | 第51页 |
3.5 结果与分析 | 第51-56页 |
3.5.1 牛乳β-乳球蛋白低聚体的粒度检测结果 | 第51-52页 |
3.5.2 牛乳β-乳球蛋白低聚体的外观形态观察 | 第52-53页 |
3.5.3 牛乳β-乳球蛋白低聚体自由巯基检测结果 | 第53-54页 |
3.5.4 圆二光谱对二级结构的检测结果 | 第54-56页 |
3.6 讨论 | 第56-58页 |
3.6.1 关于粒度的讨论 | 第56页 |
3.6.2 对电镜的讨论 | 第56-57页 |
3.6.3 关于自由巯基的讨论 | 第57页 |
3.6.4 关于二级结构的讨论 | 第57-58页 |
3.7 本章结论 | 第58-59页 |
第4章 牛乳β-乳球蛋白低聚体酶解稳定性及免疫特性的体外评估 | 第59-74页 |
4.1 引言 | 第59页 |
4.2 实验材料与设备 | 第59-60页 |
4.2.1 试剂与材料 | 第59-60页 |
4.2.2 主要仪器与设备 | 第60页 |
4.3 溶液的配置 | 第60-62页 |
4.3.1 体外模拟消化溶液配置 | 第60-61页 |
4.3.2 Tricine-SDS-PAGE电泳溶液的配置 | 第61页 |
4.3.3 ELISA相关溶液的配置 | 第61-62页 |
4.3.4 Western blotting相关溶液的配置 | 第62页 |
4.4 实验设计 | 第62-66页 |
4.4.1 体外模拟消化 | 第62-64页 |
4.4.2 抗体结合能力的检测 | 第64-66页 |
4.4.3 免疫印迹(western blotting)实验 | 第66页 |
4.5 结果与分析 | 第66-71页 |
4.5.1 体外模拟消化结果 | 第67-68页 |
4.5.2 抗体结合能力实验结果 | 第68-71页 |
4.5.3 免疫印迹结果 | 第71页 |
4.6 讨论 | 第71-73页 |
4.6.1 关于体外模拟消化的讨论 | 第71-72页 |
4.6.2 关于IgG结合能力的讨论 | 第72页 |
4.6.3 关于IgE结合能力的讨论 | 第72-73页 |
4.6.4 关于免疫印迹的分析 | 第73页 |
4.7 本章小结 | 第73-74页 |
第5章 结论与展望 | 第74-76页 |
5.1 结论 | 第74页 |
5.2 展望 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
附图A | 第81-82页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第82页 |