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牛乳β-乳球蛋白低聚体的结构表征及致敏性的体外评估

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩率与对照表第7-13页
第1章 引言第13-25页
    1.1 食物过敏及其危害第13-15页
        1.1.1 食物过敏第13页
        1.1.2 食物过敏的危害第13页
        1.1.3 食物过敏的免疫学机制第13-14页
        1.1.4 食物过敏诊断及过敏原管理第14-15页
    1.2 牛乳过敏第15-20页
        1.2.1 牛乳过敏的流行病学调查第15-16页
        1.2.2 牛乳中主要过敏原第16-17页
        1.2.3 牛乳过敏原的诊断及管理第17-18页
        1.2.4 酪蛋白第18-19页
        1.2.5 α-乳白蛋白第19页
        1.2.6 β-乳球蛋白第19-20页
    1.3 牛乳β-乳球蛋白聚合体研究进展第20-22页
        1.3.1 β-乳球蛋白聚合的机制第20页
        1.3.2 β-乳球蛋白聚合的影响因素第20-22页
        1.3.3 过敏原聚合体的免疫特性变化第22页
    1.4 立体背景与研究内容第22-25页
        1.4.1 立体背景第22-23页
        1.4.2 研究内容第23-25页
第2章 牛乳β-乳球蛋白的分离纯化及低聚体制备第25-49页
    2.1 引言第25页
    2.2 材料与设备第25-26页
        2.2.1 试剂与材料第25-26页
        2.2.2 主要仪器与设备第26页
    2.3 溶液配制第26-28页
        2.3.1 SDS-PAGE和Native-PAGE所用溶液的配制第26-27页
        2.3.2 诱导低聚体所需溶液的配制第27-28页
    2.4 实验方法第28-31页
        2.4.1 牛乳β-乳球蛋白的分离纯化第28页
        2.4.2 SDS-PAGE电泳检测分离纯化得到的β-乳球蛋白纯度及鉴定第28-29页
        2.4.3 牛乳β-乳球蛋白诱导聚合的实验方案设计第29-30页
        2.4.4 连续梯度的Native-PAGE电泳的配制第30-31页
    2.5 结果与分析第31-46页
        2.5.1 牛乳β-乳球蛋白纯化结果第31-35页
        2.5.2 牛乳β-乳球蛋白低聚条件的确定第35-40页
        2.5.3 最佳条件诱导得到的样品的电泳图谱及质谱鉴定第40-46页
    2.6 讨论第46-48页
        2.6.1 对本实验中的牛乳β-乳球蛋白中的基因型进行分析第46页
        2.6.2 不同温度和聚合时间对牛乳β-乳球蛋白聚合的影响第46-47页
        2.6.3 关于不同离子强度对牛乳β-乳球蛋白聚合的影响第47-48页
        2.6.4 关于不同pH对牛乳β-乳球蛋白聚合的影响第48页
    2.7 本章小结第48-49页
第3章 牛乳β-乳球蛋白低聚体的理化特性第49-59页
    3.1 引言第49页
    3.2 实验材料与设备第49-50页
        3.2.1 试剂与材料第49页
        3.2.2 主要仪器与设备第49-50页
    3.3 溶液的配置第50页
    3.4 实验方法第50-51页
        3.4.1 牛乳β-乳球蛋白低聚体的粒度检测第50页
        3.4.2 牛乳β-乳球蛋白低聚体的外观形态观察第50页
        3.4.3 牛乳β-乳球蛋白低聚体自由巯基的定量第50-51页
        3.4.4 牛乳β-乳球蛋白低聚体的二级结构的检测第51页
    3.5 结果与分析第51-56页
        3.5.1 牛乳β-乳球蛋白低聚体的粒度检测结果第51-52页
        3.5.2 牛乳β-乳球蛋白低聚体的外观形态观察第52-53页
        3.5.3 牛乳β-乳球蛋白低聚体自由巯基检测结果第53-54页
        3.5.4 圆二光谱对二级结构的检测结果第54-56页
    3.6 讨论第56-58页
        3.6.1 关于粒度的讨论第56页
        3.6.2 对电镜的讨论第56-57页
        3.6.3 关于自由巯基的讨论第57页
        3.6.4 关于二级结构的讨论第57-58页
    3.7 本章结论第58-59页
第4章 牛乳β-乳球蛋白低聚体酶解稳定性及免疫特性的体外评估第59-74页
    4.1 引言第59页
    4.2 实验材料与设备第59-60页
        4.2.1 试剂与材料第59-60页
        4.2.2 主要仪器与设备第60页
    4.3 溶液的配置第60-62页
        4.3.1 体外模拟消化溶液配置第60-61页
        4.3.2 Tricine-SDS-PAGE电泳溶液的配置第61页
        4.3.3 ELISA相关溶液的配置第61-62页
        4.3.4 Western blotting相关溶液的配置第62页
    4.4 实验设计第62-66页
        4.4.1 体外模拟消化第62-64页
        4.4.2 抗体结合能力的检测第64-66页
        4.4.3 免疫印迹(western blotting)实验第66页
    4.5 结果与分析第66-71页
        4.5.1 体外模拟消化结果第67-68页
        4.5.2 抗体结合能力实验结果第68-71页
        4.5.3 免疫印迹结果第71页
    4.6 讨论第71-73页
        4.6.1 关于体外模拟消化的讨论第71-72页
        4.6.2 关于IgG结合能力的讨论第72页
        4.6.3 关于IgE结合能力的讨论第72-73页
        4.6.4 关于免疫印迹的分析第73页
    4.7 本章小结第73-74页
第5章 结论与展望第74-76页
    5.1 结论第74页
    5.2 展望第74-76页
致谢第76-77页
参考文献第77-81页
附图A第81-82页
攻读硕士期间的研究成果第82页

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