摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
目录 | 第5-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-21页 |
(一) 植物花粉的发育 | 第8-12页 |
1. 花粉母细胞的形成及减数分裂 | 第8-12页 |
1.1 姐妹染色体的粘连 | 第9-10页 |
1.2 同源染色体的配对、联会及重组 | 第10页 |
1.3 染色体的分离及细胞分裂 | 第10-12页 |
2. 减数分裂后的发育 | 第12页 |
(二) 花粉壁的发育及其功能 | 第12-18页 |
1. 花粉壁的结构与功能 | 第13-14页 |
2. 初生外壁的形成及其功能 | 第14-15页 |
3. 孢粉素的形成机制 | 第15-17页 |
3.1 绒毡层 | 第15-16页 |
3.2 孢粉素形成过程 | 第16-17页 |
4. 孢粉素的运输 | 第17-18页 |
(三) ABC转运蛋白 | 第18-21页 |
1. ABC转运蛋白结构特征及分类 | 第18页 |
2. ABCG亚家族转运蛋白 | 第18-19页 |
3. 植物中的ABCG蛋白 | 第19-21页 |
第二章 论文选题依据及目标 | 第21-22页 |
(一) 选题依据 | 第21页 |
(二) 研究目标 | 第21-22页 |
第三章 材料与方法 | 第22-33页 |
(一) 实验材料 | 第22-23页 |
1. 植物材料 | 第22页 |
2. 菌株及载体 | 第22页 |
3. 分子生物学试剂和化学试剂 | 第22-23页 |
(二) 实验方法 | 第23-33页 |
1. 材料种植 | 第23页 |
2. 表型鉴定 | 第23页 |
3. 遗传分析 | 第23页 |
4. 分子标记发展与WBC11基因的图位克隆 | 第23-24页 |
5. 小量基因组DNA的提取 | 第24页 |
6. RNA提取及表达分析 | 第24-26页 |
6.1 取样 | 第24页 |
6.2 TRIzol法提取总植物RNA | 第24-25页 |
6.3 RNA中基因组DNA的去除 | 第25页 |
6.4 逆转录反应 | 第25页 |
6.5 表达分析 | 第25-26页 |
7. 树脂切片 | 第26-27页 |
8. SDS碱裂解法制备质粒DNA | 第27-28页 |
8.1 碱裂解液成分 | 第27页 |
8.2 质粒制备步骤 | 第27-28页 |
9. Inoue方法制备感受态细胞 | 第28-30页 |
9.1 实验器材准备及溶液配制 | 第28-29页 |
9.2 感受态细胞制作步骤及质粒的转化 | 第29-30页 |
10. 重组质粒的转化 | 第30页 |
11. 亚细胞定位 | 第30-31页 |
11.1 GFP-WBC11载体的构建 | 第30页 |
11.2 水稻原生质体的制备及转化 | 第30-31页 |
12. wbc11突变体材料的鉴定 | 第31-33页 |
第四章 结果与分析 | 第33-48页 |
(一) 实验结果 | 第33-45页 |
1. wbcII诱变突变体的获得 | 第33-34页 |
2. OswbcII的遗传分析和图位克隆 | 第34-38页 |
3. WBCII基因的表达模式 | 第38-39页 |
4. wbcII突变体无法形成正常花粉 | 第39-42页 |
5. 花粉发育相关基因的表达分析 | 第42页 |
6. WBCII的亚细胞定位 | 第42-44页 |
7. WBCII及相关蛋白的同源性分析 | 第44-45页 |
(二) 讨论 | 第45-48页 |
1. wbcII突变体内花粉减数分裂后的发育出现异常 | 第45页 |
2. WBCII可能参与孢粉素前体从绒毡层到花粉表面的运输 | 第45-46页 |
3. OsWBCII以同源或异源二聚体的形式在水稻内发挥功能 | 第46页 |
4. 孢粉素前体的运输途径可能涉及多种复合物的参与 | 第46-47页 |
5. 水稻中可能存在其它ABCG11同源蛋白 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
附录A | 第56-58页 |
缩略词表 | 第56-58页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |