| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-40页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 猪流行性腹泻病毒 | 第15-22页 |
| 1.2.1 猪流行腹泻概述 | 第15页 |
| 1.2.2 PED再流行 | 第15-16页 |
| 1.2.3 PEDV病原学特性 | 第16-17页 |
| 1.2.4 PEDV基因功能研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.5 PED的防控及治疗 | 第21-22页 |
| 1.3 猪伪狂犬病毒 | 第22-29页 |
| 1.3.1 PRV概述 | 第22-23页 |
| 1.3.2 伪狂犬病新疫情 | 第23页 |
| 1.3.3 PRV病原学特征 | 第23-26页 |
| 1.3.4 PRV复制周期 | 第26-28页 |
| 1.3.5 PRV治疗 | 第28-29页 |
| 1.4 抗病毒制剂 | 第29-30页 |
| 1.5 纳米材料抗病毒进展 | 第30-33页 |
| 1.5.1 金属纳米材料 | 第30-31页 |
| 1.5.2 金属纳米材料抗菌机制 | 第31-32页 |
| 1.5.3 碳纳米材料 | 第32-33页 |
| 1.6 氧化石墨烯研究进展 | 第33-36页 |
| 1.6.1 氧化石墨烯抗菌效应 | 第34-35页 |
| 1.6.2 氧化石墨烯材料抗菌机理 | 第35-36页 |
| 1.6.3 氧化石墨烯在病毒方面的研究 | 第36页 |
| 1.7 其它二维纳米材料 | 第36-38页 |
| 1.8 纳米材料毒性作用 | 第38-39页 |
| 1.9 立题依据 | 第39-40页 |
| 第二章 PEDV ORF3基因功能研究 | 第40-65页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第40页 |
| 2.2 材料与方法 | 第40-54页 |
| 2.2.1 细胞与毒株 | 第40页 |
| 2.2.2 培养基及相关试剂的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第41-44页 |
| 2.2.4 目的蛋白表达及纯化 | 第44-45页 |
| 2.2.5 小鼠多抗血清制备 | 第45页 |
| 2.2.6 稳定表达PEDV ORF3的Vero细胞系构建 | 第45-47页 |
| 2.2.7 表达ORF3的Vero细胞系验证 | 第47-49页 |
| 2.2.8 流式细胞术分析细胞周期 | 第49-50页 |
| 2.2.9 MTT分析细胞增殖 | 第50页 |
| 2.2.10 亚细胞定位分析 | 第50-52页 |
| 2.2.11 透射电子显微镜观察细胞囊泡的形成 | 第52页 |
| 2.2.12 病毒感染 | 第52页 |
| 2.2.13 病毒RNA提取及绝对荧光定量PCR | 第52-53页 |
| 2.2.14 Western blot分析 | 第53-54页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第54页 |
| 2.3 结果与分析 | 第54-63页 |
| 2.3.1 PEDV ORF3多克隆抗体制备 | 第54-56页 |
| 2.3.2 稳定表达PEDV ORF3的Vero细胞系构建及鉴定 | 第56-57页 |
| 2.3.3 Vero-ORF3稳定性 | 第57-58页 |
| 2.3.4 Vero-ORF3与Vero细胞生长性质 | 第58-59页 |
| 2.3.5 ORF3对细胞周期的影响 | 第59-60页 |
| 2.3.6 ORF3对细胞囊泡的影响 | 第60-61页 |
| 2.3.7 PEDV ORF3蛋白亚细胞定位 | 第61页 |
| 2.3.8 ORF3对PEDV不同毒株增殖的影响 | 第61-62页 |
| 2.3.9 ORF3对PEDV蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-64页 |
| 2.5 小结 | 第64-65页 |
| 第三章 氧化石墨烯抗病毒研究 | 第65-88页 |
| 3.1 研究目的与意义 | 第65页 |
| 3.2 实验材料 | 第65-66页 |
| 3.2.1 细胞与毒株 | 第65-66页 |
| 3.2.2 培养基及相关试剂的制备 | 第66页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第66页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第66页 |
| 3.3 实验方法 | 第66-70页 |
| 3.3.1 材料合成 | 第66-67页 |
| 3.3.2 MTT法测定纳米材料细胞毒性 | 第67页 |
| 3.3.3 噬斑形成试验 | 第67-68页 |
| 3.3.4 间接免疫荧光试验 | 第68页 |
| 3.3.5 Western blot分析 | 第68页 |
| 3.3.6 病毒DNA的提取 | 第68-69页 |
| 3.3.7 绝对荧光定量PCR | 第69页 |
| 3.3.8 病毒透射电镜 | 第69-70页 |
| 3.4 结果与分析 | 第70-85页 |
| 3.4.1 GO及相关纳米材料表征 | 第70-71页 |
| 3.4.2 GO细胞毒性 | 第71-72页 |
| 3.4.3 GO对PEDV病毒（RNA病毒）影响 | 第72-73页 |
| 3.4.4 GO对PRV病毒（DNA病毒）影响 | 第73-74页 |
| 3.4.5 氧化石墨烯抗病毒效应具有时间剂量依赖效应 | 第74-75页 |
| 3.4.6 氧化石墨烯抑制病毒感染阶段研究 | 第75-77页 |
| 3.4.7 含氧基团对GO抑制病毒的影响 | 第77-80页 |
| 3.4.8 片层结构对GO抑制病毒的影响 | 第80-81页 |
| 3.4.9 电荷对GO抑制病毒的影响 | 第81-83页 |
| 3.4.10 GO片径大小对其抗病毒作用的影响 | 第83-84页 |
| 3.4.11 病毒形态被GO结构破坏 | 第84-85页 |
| 3.5 讨论 | 第85-87页 |
| 3.5.1 单层结构作用 | 第86页 |
| 3.5.2 电荷作用 | 第86-87页 |
| 3.6 小结 | 第87-88页 |
| 第四章 其它片状纳米材料对病毒影响 | 第88-105页 |
| 4.1 前言 | 第88页 |
| 4.2 实验材料 | 第88页 |
| 4.2.1 细胞与毒株 | 第88页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第88页 |
| 4.3 实验方法 | 第88-90页 |
| 4.3.1 MTT法测定纳米材料细胞毒性 | 第88页 |
| 4.3.2 噬斑形成试验 | 第88页 |
| 4.3.3 间接免疫荧光试验 | 第88-89页 |
| 4.3.4 小鼠感染与治疗试验 | 第89页 |
| 4.3.5 组织病例切片制作 | 第89页 |
| 4.3.6 脑组织中病毒DNA提取 | 第89页 |
| 4.3.7 血液学分析 | 第89-90页 |
| 4.4 结果与分析 | 第90-103页 |
| 4.4.1 MoS_2及WS_2表征 | 第90页 |
| 4.4.2 MoS_2及WS_2的细胞毒性 | 第90-91页 |
| 4.4.3 MoS_2及WS_2对PRV增殖的影响 | 第91-92页 |
| 4.4.4 MoS_2及WS_2对PEDV增殖的影响 | 第92-93页 |
| 4.4.5 MoS_2及WS_2抑制病毒的剂量依赖效应 | 第93-94页 |
| 4.4.6 不同片状纳米材料抑制病毒增殖的比较 | 第94-95页 |
| 4.4.7 MoS_2及GO可抑制PRV在小鼠体内感染 | 第95-98页 |
| 4.4.8 MoS_2及GO对小鼠毒性评价 | 第98-103页 |
| 4.5 讨论 | 第103-104页 |
| 4.6 小结 | 第104-105页 |
| 第五章 全文总结及展望 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-126页 |
| 附录 | 第126-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
