| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1.1 奶牛乳腺炎感染及其致病机理的研究 | 第15-18页 |
| 1.1.1 奶牛乳腺炎的病因 | 第15-16页 |
| 1.1.2 奶牛乳腺炎的分类 | 第16页 |
| 1.1.3 奶牛乳腺炎的致病机理 | 第16-17页 |
| 1.1.4 奶牛乳腺炎的危害 | 第17-18页 |
| 1.1.5 奶牛乳腺炎小鼠模型 | 第18页 |
| 1.2 奶牛乳腺炎预防与治疗的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.1 抗生素防治 | 第18-19页 |
| 1.2.2 非抗生素防治 | 第19-21页 |
| 1.3 金黄色葡萄球菌 | 第21-27页 |
| 1.3.1 金黄色葡萄球菌的致病性 | 第21-22页 |
| 1.3.2 金黄色葡萄球菌粘附因子 | 第22-25页 |
| 1.3.3 金黄色葡萄球菌生物膜 | 第25-26页 |
| 1.3.4 金黄色葡萄球菌转座子（插入序列）的研究 | 第26-27页 |
| 1.4 益生菌——乳酸菌的概述 | 第27-30页 |
| 1.4.1 牛奶中乳酸菌的多样性 | 第27-28页 |
| 1.4.2 乳酸菌的筛选 | 第28页 |
| 1.4.3 乳酸菌的作用机制 | 第28-29页 |
| 1.4.4 乳酸菌表面蛋白 | 第29-30页 |
| 1.5 乳酸菌在防治乳腺炎中的应用 | 第30-31页 |
| 1.6 本研究的目的意义和研究内容 | 第31-33页 |
| 1.6.1 研究目的意义 | 第31-32页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第32-33页 |
| 第二章 牛奶源乳酸菌的分离、鉴定及体外抑菌特性研究 | 第33-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 菌株和细胞 | 第33页 |
| 2.1.2 培养基和试剂的配制 | 第33页 |
| 2.1.3 引物和序列 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.2.1 奶样采集 | 第34页 |
| 2.2.2 乳酸菌的分离和纯化 | 第34页 |
| 2.2.3 乳酸菌分离株的保存 | 第34页 |
| 2.2.4 体外抑菌试验 | 第34页 |
| 2.2.5 菌株粘附、侵染能力的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.6 菌株抗粘附、侵染能力的测定 | 第35-36页 |
| 2.2.7 生物膜形成能力的测定 | 第36页 |
| 2.2.8 乳酸菌的分子生物学鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-41页 |
| 2.3.1 菌株分离 | 第37页 |
| 2.3.2 抑菌试验 | 第37-38页 |
| 2.3.3 菌株的分子生物学鉴定 | 第38页 |
| 2.3.4 菌株粘附、侵染能力的测定 | 第38页 |
| 2.3.5 乳酸菌抑制金黄色葡萄球菌粘附、侵染能力的测定 | 第38-40页 |
| 2.3.6 乳酸菌抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成能力的测定 | 第40页 |
| 2.3.7 乳酸菌牛奶中生长试验 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 牛奶源乳酸菌对乳腺炎的预防作用 | 第43-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 菌株和实验动物 | 第43-44页 |
| 3.1.2 培养基的配制 | 第44页 |
| 3.1.3 引物与序列 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-45页 |
| 3.2.1 动物试验设计 | 第44页 |
| 3.2.2 细菌的准备 | 第44页 |
| 3.2.3 乳腺内注射 | 第44-45页 |
| 3.2.4 乳腺组织采集与处理 | 第45页 |
| 3.2.5 金黄色葡萄球菌计数 | 第45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-48页 |
| 3.3.1 乳酸菌对乳腺组织中金黄色葡萄球菌数量的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 乳酸菌对乳腺组织中细胞因子水平的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 乳酸菌对乳腺组织中紧密连接蛋白的表达量的影响 | 第47页 |
| 3.3.4 乳酸菌对奶牛乳腺上皮细胞中固有免疫基因表达量的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 3.5 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 乳酸菌表面纤连蛋白结合蛋白FBPA对乳腺炎预防作用的影响 | 第50-62页 |
| 4.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 菌株、质粒、细胞系和实验动物 | 第50-51页 |
| 4.1.2 培养基的配制 | 第51页 |
| 4.1.3 引物和序列 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 fbpA基因的扩增 | 第51-52页 |
| 4.2.2 同源重组载体的构建 | 第52页 |
| 4.2.3 乳酸菌电转化 | 第52页 |
| 4.2.4 突变菌株的检测 | 第52-53页 |
| 4.2.5 FbpA及FbpA融合蛋白的表达与纯化 | 第53页 |
| 4.2.6 细菌对纤连蛋白粘附能力的测定 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-58页 |
| 4.3.1 fbpA基因的检测与分析 | 第53-54页 |
| 4.3.2 fbpA突变菌株的获得 | 第54-55页 |
| 4.3.3 FbpA表面展示菌株的获得 | 第55-56页 |
| 4.3.4 FbpA对乳酸菌粘附、侵染乳腺上皮细胞的影响 | 第56页 |
| 4.3.5 FbpA对乳酸菌抑制金黄色葡萄球菌粘附、侵染乳腺上皮细胞的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.6 FbpA对乳酸菌抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成能力的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.7 FbpA对金黄色葡萄球菌乳腺内定植的影响 | 第58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-61页 |
| 4.5 小结 | 第61-62页 |
| 第五章 金黄色葡萄球菌转座子ISSAU2的研究 | 第62-72页 |
| 5.1 实验材料 | 第63页 |
| 5.1.1 菌株、质粒 | 第63页 |
| 5.1.2 培养基的配制 | 第63页 |
| 5.1.3 引物和序列 | 第63页 |
| 5.2 实验方法 | 第63-64页 |
| 5.2.1 ISSau2基因的扩增 | 第63-64页 |
| 5.2.2 ISSau2转座酶的表达与纯化 | 第64页 |
| 5.2.3 凝胶电泳阻滞实验EMSA | 第64页 |
| 5.2.4 染色体步移 | 第64页 |
| 5.3 结果与分析 | 第64-70页 |
| 5.3.1 ISSau2属于IS3家族中的IS150亚家族 | 第64-65页 |
| 5.3.2 ISSau2在细菌中的分布情况 | 第65-68页 |
| 5.3.3 ISSau2序列多样性分析 | 第68-69页 |
| 5.3.4 ISSau2在金黄色葡萄球菌基因组中的插入位置 | 第69页 |
| 5.3.5 ISSau2转座酶与两端反向互补序列的结合 | 第69-70页 |
| 5.4 讨论 | 第70-71页 |
| 5.5 小结 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第72-74页 |
| 6.1 研究结论 | 第72页 |
| 6.2 创新点 | 第72页 |
| 6.3 下一步的研究思路 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-88页 |
| 附录 | 第88-101页 |
| 缩略词 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
