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GPCR信号通路研究模型的建立与应用及孤儿受体的药物筛选

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一部分 利用荧光素酶片段互补分析法研究GPCR介导的蛋白-蛋白相互作用第10-55页
    第1章 引言第10-17页
        1.1 G蛋白偶联受体( G protein-coupled receptors, GPCRs)第10-15页
            1.1.1 GPCRs的结构第10-11页
            1.1.2 GPCRs的分类第11-12页
            1.1.3 GPCRs信号转导通路第12-15页
            1.1.4 GPCRs的功能第15页
        1.2 蛋白-蛋白相互作用的研究方法第15-17页
    第2章 材料与方法第17-28页
        2.1 材料第17-22页
            2.1.1 质粒第17页
            2.1.2 细胞株第17页
            2.1.3 耗材第17页
            2.1.4 仪器第17-18页
            2.1.5 试剂第18页
            2.1.6 试剂配制第18-21页
            2.1.7 引物合成第21-22页
        2.2 实验方法第22-28页
            2.2.1 质粒的转化第22页
            2.2.2 质粒的提取第22-23页
            2.2.3 细胞RNA抽提第23-24页
            2.2.4 细胞转染第24页
            2.2.5 蛋白质印迹分析(Western blot)第24-25页
            2.2.6 免疫共沉淀第25页
            2.2.7 免疫荧光染色第25-26页
            2.2.8 钙流实验第26页
            2.2.9 环腺苷酸cAMP实验第26-27页
            2.2.10 Emerald Luc荧光素酶实验第27页
            2.2.11 数据处理第27-28页
    第3章 实验结果第28-53页
        3.1 构建AGTR1/β2AR/GCGR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型第28-39页
            3.1.1 表达载体AGTR1/β2AR/GCGR-ELuc C和ELucN-β-arrestin1/2 的表达及其功能确定第29-31页
            3.1.2 AGTR1/β2AR/GCGR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型的建立第31-33页
            3.1.3 AGTR1/β2AR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型的优化第33-39页
        3.2 AGTR1/β2AR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型的应用第39-43页
            3.2.1 利用AGTR1与β-arrestin1/2 相互作用检测模型验证AGTR1激动剂的偏向性第39-41页
            3.2.2 利用β2AR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型验证β2AR激动剂的偏向性第41-43页
        3.3 构建GPCRs与G蛋白相互作用检测模型第43-53页
            3.3.1 GPCR与G蛋白表达载体的构建及其功能确定第44-49页
            3.3.2 β2AR与G蛋白相互作用检测第49-53页
    第4章 讨论第53-55页
第二部分 GPR85及GPR98小分子配体的高通量筛选第55-65页
    第1章 GPR85和GPR98概述第55-57页
        1.1 GPR85概述第55-56页
        1.2 GPR98概述第56-57页
    第2章 材料与方法第57-59页
        2.1 材料第57-58页
            2.1.1 质粒第57页
            2.1.2 细胞株第57页
            2.1.3 耗材第57页
            2.1.4 仪器第57页
            2.1.5 试剂第57-58页
        2.2 实验方法第58-59页
            2.2.1 环腺苷酸cAMP实验第58页
            2.2.2 数据处理第58-59页
    第3章 实验结果第59-64页
        3.1 GPR85、GPR98小分子配体高通量初筛第59-61页
            3.1.1 GPR85和GPR98 cAMP实验高通量筛选模型的优化第59-60页
            3.1.2 GPR85和GPR98初筛结果第60-61页
        3.2 GPR85、GPR98小分子配体高通量复筛第61-64页
    第4章 讨论第64-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-71页
附录 综述第71-83页
    参考文献第78-83页
攻读学位期间的研究成果第83页

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