| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一部分 利用荧光素酶片段互补分析法研究GPCR介导的蛋白-蛋白相互作用 | 第10-55页 |
| 第1章 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 G蛋白偶联受体( G protein-coupled receptors, GPCRs) | 第10-15页 |
| 1.1.1 GPCRs的结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 GPCRs的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 GPCRs信号转导通路 | 第12-15页 |
| 1.1.4 GPCRs的功能 | 第15页 |
| 1.2 蛋白-蛋白相互作用的研究方法 | 第15-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.1 材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.3 耗材 | 第17页 |
| 2.1.4 仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.5 试剂 | 第18页 |
| 2.1.6 试剂配制 | 第18-21页 |
| 2.1.7 引物合成 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 质粒的转化 | 第22页 |
| 2.2.2 质粒的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 细胞RNA抽提 | 第23-24页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第24页 |
| 2.2.5 蛋白质印迹分析（Western blot） | 第24-25页 |
| 2.2.6 免疫共沉淀 | 第25页 |
| 2.2.7 免疫荧光染色 | 第25-26页 |
| 2.2.8 钙流实验 | 第26页 |
| 2.2.9 环腺苷酸cAMP实验 | 第26-27页 |
| 2.2.10 Emerald Luc荧光素酶实验 | 第27页 |
| 2.2.11 数据处理 | 第27-28页 |
| 第3章 实验结果 | 第28-53页 |
| 3.1 构建AGTR1/β2AR/GCGR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型 | 第28-39页 |
| 3.1.1 表达载体AGTR1/β2AR/GCGR-ELuc C和ELucN-β-arrestin1/2 的表达及其功能确定 | 第29-31页 |
| 3.1.2 AGTR1/β2AR/GCGR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型的建立 | 第31-33页 |
| 3.1.3 AGTR1/β2AR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型的优化 | 第33-39页 |
| 3.2 AGTR1/β2AR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型的应用 | 第39-43页 |
| 3.2.1 利用AGTR1与β-arrestin1/2 相互作用检测模型验证AGTR1激动剂的偏向性 | 第39-41页 |
| 3.2.2 利用β2AR与β-arrestin1/2 相互作用检测模型验证β2AR激动剂的偏向性 | 第41-43页 |
| 3.3 构建GPCRs与G蛋白相互作用检测模型 | 第43-53页 |
| 3.3.1 GPCR与G蛋白表达载体的构建及其功能确定 | 第44-49页 |
| 3.3.2 β2AR与G蛋白相互作用检测 | 第49-53页 |
| 第4章 讨论 | 第53-55页 |
| 第二部分 GPR85及GPR98小分子配体的高通量筛选 | 第55-65页 |
| 第1章 GPR85和GPR98概述 | 第55-57页 |
| 1.1 GPR85概述 | 第55-56页 |
| 1.2 GPR98概述 | 第56-57页 |
| 第2章 材料与方法 | 第57-59页 |
| 2.1 材料 | 第57-58页 |
| 2.1.1 质粒 | 第57页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第57页 |
| 2.1.3 耗材 | 第57页 |
| 2.1.4 仪器 | 第57页 |
| 2.1.5 试剂 | 第57-58页 |
| 2.2 实验方法 | 第58-59页 |
| 2.2.1 环腺苷酸cAMP实验 | 第58页 |
| 2.2.2 数据处理 | 第58-59页 |
| 第3章 实验结果 | 第59-64页 |
| 3.1 GPR85、GPR98小分子配体高通量初筛 | 第59-61页 |
| 3.1.1 GPR85和GPR98 cAMP实验高通量筛选模型的优化 | 第59-60页 |
| 3.1.2 GPR85和GPR98初筛结果 | 第60-61页 |
| 3.2 GPR85、GPR98小分子配体高通量复筛 | 第61-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录 综述 | 第71-83页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第83页 |
