摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 研究的目的与意义 | 第11页 |
1.2 国内外研究进展 | 第11-19页 |
1.2.1 大白菜春化作用的特点 | 第11-12页 |
1.2.2 高等植物成花的分子调控途径 | 第12-17页 |
1.2.3 Bra028171的来源 | 第17-19页 |
1.3 本实验技术路线 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-31页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 细菌植株和质粒载体 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第20页 |
2.1.4 主要试验仪器和器材 | 第20页 |
2.1.5 试验所需软件 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-31页 |
2.2.1 Bra028171基因的克隆 | 第21-23页 |
2.2.2 Bra028171实时荧光定量PCR分析 | 第23-25页 |
2.2.3 Bra028171基因的亚细胞定位 | 第25-27页 |
2.2.4 Bra028171基因表达载体的构建 | 第27-28页 |
2.2.5 重组质粒的农杆菌转化 | 第28-29页 |
2.2.6 农杆菌花序侵染法转化 | 第29-30页 |
2.2.7 抗性植株的分子及形态学鉴定 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-41页 |
3.1 Bra028171基因的克隆 | 第31页 |
3.1.1 大白菜DNA的提取 | 第31页 |
3.1.2 目的片段的获得与测序 | 第31页 |
3.2 Bra028171生物信息学分析 | 第31-33页 |
3.2.1 Bra028171序列分析 | 第31-32页 |
3.2.2 Bra028171顺式作用元件分析 | 第32-33页 |
3.3 Bra028171表达模式的分析 | 第33-35页 |
3.3.1 大白菜总RNA的提取 | 第33页 |
3.3.2 Bra028171在不同部位的表达分析 | 第33-34页 |
3.3.3 不同春化时间下Bra028171的表达量 | 第34-35页 |
3.4 Bra028171亚细胞定位分析 | 第35页 |
3.5 Bra028171植物表达载体的构建和农杆菌转化 | 第35-38页 |
3.5.1 Bra028171超表达载体的构建 | 第35-36页 |
3.5.2 Bra028171RNAi载体的构建 | 第36-38页 |
3.5.3 植物表达载体的农杆菌转化 | 第38页 |
3.6 Bra028171植物表达载体对拟南芥的遗传转化 | 第38-41页 |
3.6.1 T1代转基因拟南芥的筛选 | 第38-39页 |
3.6.2 转基因植株的分子检测 | 第39-40页 |
3.6.3 转基因拟南芥T2代的获得及表型分析与鉴定 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
4.1 Bra028171的序列分析 | 第41页 |
4.2 Bra028171表达模式分析 | 第41页 |
4.3 Bra028171亚细胞定位分析 | 第41-42页 |
4.4 Bra028171植物表达载体的构建和拟南芥的遗传转化 | 第42页 |
4.5 本研究的创新与不足 | 第42-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
附录 | 第54-57页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |