| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 日本七鳃鳗 | 第9-10页 |
| 1.1.1 生活史 | 第9页 |
| 1.1.2 组织结构 | 第9页 |
| 1.1.3 七鳃鳗的功能基因组学 | 第9-10页 |
| 1.1.4 免疫相关基因 | 第10页 |
| 1.2 CD63 | 第10-15页 |
| 1.2.1 CD63的基因结构及分子特征 | 第10-11页 |
| 1.2.2 CD63的分布及其变化 | 第11-12页 |
| 1.2.3 功能 | 第12-15页 |
| 1.2.4 展望 | 第15页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 1.3.1 目的 | 第15页 |
| 1.3.2 意义 | 第15-16页 |
| 第2章 CD63的分子克隆、生物信息学分析及表达纯化 | 第16-54页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-34页 |
| 2.2.1 七鳃鳗CD63基因的分子克隆 | 第17-20页 |
| 2.2.2 七鳃鳗CD63生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.2.3 日本七鳃鳗LjCD63在组织中的表达量分析 | 第21-22页 |
| 2.2.4 LjCD63原核表达 | 第22-31页 |
| 2.2.5 Western blot检测 | 第31-33页 |
| 2.2.6 LjCD63免疫组织化学检测 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-50页 |
| 2.3.1 LjCD63基因克隆 | 第34-35页 |
| 2.3.2 LjCD63生物信息学分析 | 第35-42页 |
| 2.3.3 LjCD63在各组织中的相对表达量 | 第42-43页 |
| 2.3.4 LjCD63原核表达载体构建 | 第43-47页 |
| 2.3.5 rLjCD63表达和纯化 | 第47页 |
| 2.3.6 Western blot结果 | 第47-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-54页 |
| 第3章 pEGFP-N1-LjCD63真核表达系统的构建 | 第54-63页 |
| 3.1 材料 | 第54页 |
| 3.1.1 菌株与载体 | 第54页 |
| 3.1.2 细胞与试剂 | 第54页 |
| 3.2 方法 | 第54-58页 |
| 3.2.1 真核质粒的准备 | 第54-56页 |
| 3.2.2 细胞的培养 | 第56-57页 |
| 3.2.3 转染 | 第57-58页 |
| 3.2.4 溶酶体标记 | 第58页 |
| 3.3 结果 | 第58-61页 |
| 3.3.1 真核质粒的准备 | 第58-59页 |
| 3.3.2 转染结果 | 第59-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 结论 | 第63-64页 |
| 本文创新点 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 附录 Ⅰ CD63同源物种的氨基酸序列 | 第70-74页 |
| 附录 Ⅱ 质粒提取流程 | 第74-75页 |
| 附录 Ⅲ DNA凝胶回收流程 | 第75-76页 |
| 附录 Ⅳ 原核表达质粒图谱 | 第76-77页 |
| 附录 Ⅴ 真核转染质粒图谱 | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
