| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| 1.1 关节疾病的简介及治疗 | 第9-10页 |
| 1.2 关节软骨 | 第10页 |
| 1.3 软骨原位再生修复的种子细胞 | 第10-12页 |
| 1.3.1 软骨细胞 | 第10-11页 |
| 1.3.2 骨髓间充质干细胞 | 第11-12页 |
| 1.4 Lubricin蛋白的结构及生物功能 | 第12-15页 |
| 1.4.1 Lubricin蛋白的来源 | 第12页 |
| 1.4.2 Lubricin蛋白的结构 | 第12-13页 |
| 1.4.3 Lubricin蛋白的生物学功能 | 第13-15页 |
| 1.4.4 Lubricin蛋白的诱导合成 | 第15页 |
| 1.5 诱导BMSCs合成lubricin蛋白的主要因子 | 第15-18页 |
| 1.5.1 转化生长因子 | 第16页 |
| 1.5.2 骨形成蛋白 | 第16-17页 |
| 1.5.3 药物小分子 | 第17-18页 |
| 1.6 课题的提出 | 第18-19页 |
| 1.7 主要的研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 软骨细胞和BMSCs的分离、培养及鉴定 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 软骨细胞和BMSCs的原代培养 | 第23页 |
| 2.2.2 软骨细胞和BMSCs的纯化、扩大培养 | 第23-24页 |
| 2.2.3 软骨细胞和BMSCs的保存、复苏 | 第24页 |
| 2.2.4 显微镜下细胞形态的观察 | 第24页 |
| 2.2.5 软骨细胞的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.6 BMSCs表面标志物的鉴定 | 第25页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第25-27页 |
| 2.3.1 软骨细胞的原代及传代培养的形态分析 | 第25页 |
| 2.3.2 软骨细胞的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.3 BMSCs的原代及传代培养的形态分析 | 第26页 |
| 2.3.4 BMSCs表面标志物的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.4 本章小结 | 第27-29页 |
| 第三章 Kartogenin和生长因子协同诱导lubricin蛋白的合成 | 第29-53页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第30-34页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第31-34页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-41页 |
| 3.2.1 实验设计 | 第34-35页 |
| 3.2.2 软骨细胞和BMSCs的细胞活性检测 | 第35-36页 |
| 3.2.3 细胞计数 | 第36页 |
| 3.2.4 BMSCs的增殖实验 | 第36页 |
| 3.2.5 BMSCs的Alcian blue染色 | 第36页 |
| 3.2.6 总GAGs含量的测定 | 第36-37页 |
| 3.2.7 BMSCs内lubricin蛋白的酶联免疫吸附试验 | 第37页 |
| 3.2.8 培养液中lubricin蛋白的酶联免疫吸附试验 | 第37页 |
| 3.2.9 Lubricin蛋白的免疫荧光染色 | 第37-38页 |
| 3.2.10 prg4相关基因的表达检测 | 第38-41页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第41页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第41-51页 |
| 3.3.1 软骨细胞和BMSCs的细胞活性检测 | 第41-43页 |
| 3.3.2 不同组合因子诱导下细胞增殖实验 | 第43页 |
| 3.3.3 不同组合因子诱导下BMSCs的Alcian blue染色 | 第43-44页 |
| 3.3.4 不同组合因子诱导下总GAGs含量的测定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 不同组合因子诱导下胞内和胞外中lubricin蛋白相对表达量 | 第45-46页 |
| 3.3.6 不同组合因子诱导下BMSCs内lubricin蛋白的免疫荧光染色 | 第46-47页 |
| 3.3.7 不同组合因子诱导下prg4相关基因的表达检测 | 第47-51页 |
| 3.4 本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 体外2D培养体系中葡萄糖酸钙对lubricin蛋白积累的影响 | 第53-62页 |
| 4.1 实验材料和仪器 | 第54-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第54页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第54-55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55页 |
| 4.2.1 实验设计 | 第55页 |
| 4.2.2 葡萄糖酸钙作用下BMSCs的增殖实验 | 第55页 |
| 4.2.3 葡萄糖酸钙作用下总GAGs相对表达量的测定 | 第55页 |
| 4.2.4 葡萄糖酸钙作用下胞内和胞外lubricin蛋白相对表达量 | 第55页 |
| 4.2.5 葡萄糖酸钙作用下prg4和agg的基因表达 | 第55页 |
| 4.2.6 统计学分析 | 第55页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第55-61页 |
| 4.3.1 葡萄糖酸钙作用下BMSCs的增殖实验 | 第55-56页 |
| 4.3.2 葡萄糖酸钙作用下总GAGs相对表达量的测定 | 第56-57页 |
| 4.3.3 葡萄糖酸钙作用下胞内和胞外lubricin蛋白相对含量 | 第57-58页 |
| 4.3.4 葡萄糖酸钙作用下prg4和agg的基因表达 | 第58-61页 |
| 4.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 结论与创新 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72-73页 |
| 在学期间的研究成果及发表的学术论文 | 第73页 |
