摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词 | 第7-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 植物叶衰老的概述 | 第11-17页 |
1.1.1 程序性细胞死亡 | 第13页 |
1.1.2 叶衰老的生理生化过程 | 第13-14页 |
1.1.3 叶衰老的调节 | 第14-17页 |
1.1.4 植物叶片衰老的展望 | 第17页 |
1.2 叶绿素荧光成像与叶衰老 | 第17-19页 |
1.2.1 叶绿素荧光成像的简要介绍 | 第17-18页 |
1.2.2 叶绿素荧光的来源 | 第18-19页 |
1.2.3 叶绿素荧光成像与叶衰老的联系 | 第19页 |
1.3 图位克隆 | 第19-21页 |
2 立题依据 | 第21-23页 |
3 材料与方法 | 第23-37页 |
3.1 常用仪器 | 第23-24页 |
3.2 常用实验软件及生物学网站 | 第24页 |
3.3 实验材料和菌株 | 第24页 |
3.3.1 实验材料 | 第24页 |
3.3.2 实验所用的菌株与载体 | 第24页 |
3.4 实验药品和试剂 | 第24-25页 |
3.5 培养基及溶液的配制 | 第25-26页 |
3.5.1 培养基的配制 | 第25页 |
3.5.2 溶液的配制 | 第25-26页 |
3.5.3 常用抗生素的配制 | 第26页 |
3.6 实验方法 | 第26-37页 |
3.6.1 拟南芥的栽培 | 第26页 |
3.6.2 拟南芥的杂交 | 第26页 |
3.6.3 叶绿素含量的测定 | 第26-27页 |
3.6.4 叶绿素荧光成像仪的相关参数 | 第27页 |
3.6.5 拟南芥DNA的提取 | 第27-28页 |
3.6.6 琼脂糖凝胶的配制 | 第28页 |
3.6.7 拟南芥RNA的提取 | 第28-29页 |
3.6.8 拟南芥RNA反转录c DNA | 第29页 |
3.6.9 半定量RT-PCR实验 | 第29-30页 |
3.6.10 拟南芥基因的图位克隆 | 第30-32页 |
3.6.11 载体构建 | 第32-33页 |
3.6.12 大肠杆菌感受态的制备 | 第33页 |
3.6.13 大肠杆菌感受态的转化 | 第33-34页 |
3.6.14 重组菌落与质粒的鉴定 | 第34页 |
3.6.15 农杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
3.6.16 农杆菌感受态的转化 | 第35页 |
3.6.17 拟南芥浸染 | 第35-36页 |
3.6.18 转基因植株的筛选 | 第36-37页 |
4 结果与分析 | 第37-53页 |
4.1 突变体的获得 | 第37页 |
4.2 突变体cfa表型的确定 | 第37-40页 |
4.2.1 突变体cfa在叶绿素荧光仪下的成像 | 第37-39页 |
4.2.2 突变体cfa的性状表型分析 | 第39-40页 |
4.3 突变体cfa不育原因的探究 | 第40-44页 |
4.3.1 突变体cfa花粉萌发率的测定 | 第40-41页 |
4.3.2 突变体cfa雄蕊结构的观察 | 第41-42页 |
4.3.3 突变体cfa花粉粒结构的观察 | 第42-43页 |
4.3.4 突变体cfa雌蕊结构的观察 | 第43-44页 |
4.4 突变体cfa的遗传分析 | 第44页 |
4.5 突变体cfa的图位克隆 | 第44-51页 |
4.5.1 突变体cfa图位克隆群体的构建 | 第44-45页 |
4.5.2 图位克隆引物的检测 | 第45页 |
4.5.3 突变体cfa的粗定位结果 | 第45-46页 |
4.5.4 突变体cfa的精细定位结果 | 第46-48页 |
4.5.5 cfa测序结果 | 第48-49页 |
4.5.6 AT1G21700基因T-DNA插入突变体的纯合体鉴定 | 第49-50页 |
4.5.7 CFA相关载体的构建 | 第50-51页 |
4.6 CFA对叶衰老的影响 | 第51-53页 |
4.6.1 衰老相关基因表达量的检测 | 第51-53页 |
5 讨论 | 第53-57页 |
6 结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-66页 |