摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩写词 | 第7-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 海藻糖的概述 | 第11-13页 |
1.1.1 海藻糖的理化性质 | 第11-12页 |
1.1.2 海藻糖的生物学功能 | 第12-13页 |
1.2 海藻糖的合成和降解途径 | 第13-14页 |
1.2.1 海藻糖的生物合成途径 | 第13页 |
1.2.2 海藻糖的生物降解途径 | 第13-14页 |
1.3 海藻糖合成途径TPS–TPP的研究现状 | 第14-16页 |
1.3.1 海藻糖磷酸合酶 | 第14-15页 |
1.3.2 海藻糖磷酸酯酶 | 第15页 |
1.3.3 海藻糖代谢途径的中间产物T6P | 第15-16页 |
1.4 Sn RKs家族 | 第16-19页 |
1.4.1 Sn RK1s的概述 | 第17-18页 |
1.4.2 Sn RK2s的概述 | 第18页 |
1.4.3 Sn RK3s的概述 | 第18-19页 |
1.5 ABA介导气孔运动的信号通路 | 第19-21页 |
2 立题依据 | 第21-23页 |
3 材料与方法 | 第23-37页 |
3.1 常用仪器 | 第23页 |
3.2 实验材料、菌株和载体 | 第23-24页 |
3.2.1 植物实验材料 | 第23-24页 |
3.2.2 菌株和载体 | 第24页 |
3.3 实验药品和试剂 | 第24-25页 |
3.4 培养基及溶液的配制 | 第25-26页 |
3.4.1 培养基的配制 | 第25页 |
3.4.2 溶液的配制 | 第25-26页 |
3.4.3 常用抗生素的配置 | 第26页 |
3.5 实验方法 | 第26-37页 |
3.5.1 拟南芥的栽培 | 第26-27页 |
3.5.2 拟南芥的杂交 | 第27页 |
3.5.3 拟南芥DNA的提取 | 第27页 |
3.5.4 琼脂糖凝胶的配制及回收 | 第27-28页 |
3.5.5 Trizol法提取拟南芥RNA | 第28页 |
3.5.6 反转录制备拟南芥c DNA | 第28页 |
3.5.7 T-DNA插入缺失纯合突变体的鉴定 | 第28-29页 |
3.5.8 拟南芥气孔开度的观察 | 第29页 |
3.5.9 测定植株失水率实验 | 第29-30页 |
3.5.10 拟南芥根伸长的观察 | 第30页 |
3.5.11 GUS染色的方法 | 第30页 |
3.5.12 远红外热图分析实验 | 第30-31页 |
3.5.13 PCR引物序列 | 第31-32页 |
3.5.14 载体构建 | 第32-33页 |
3.5.15 大肠杆菌感受态的制备 | 第33-34页 |
3.5.16 大肠杆菌感受态的转化 | 第34页 |
3.5.17 重组菌落与质粒的鉴定 | 第34页 |
3.5.18 农杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
3.5.19 农杆菌感受态的转化 | 第35页 |
3.5.20 拟南芥浸染 | 第35页 |
3.5.21 转基因植株的筛选 | 第35-37页 |
4 结果与分析 | 第37-53页 |
4.1 实验所用T-DNA插入突变体的鉴定和筛选 | 第37-40页 |
4.1.1 TPP4基因T-DNA插入突变体的筛选和鉴定 | 第37-38页 |
4.1.2 TPP6基因与AKIN10基因T-DNA插入突变体的鉴定 | 第38-39页 |
4.1.3 双突变体的PCR鉴定 | 第39-40页 |
4.2 TPP4组织定位分析 | 第40-42页 |
4.3 突变体tpp4的表型分析 | 第42-45页 |
4.3.1 幼苗期突变体tpp4-1 根的伸长对ABA具有一定的不敏感 | 第42-43页 |
4.3.2 TPP4等基因突变体失水率和远红外成像分析 | 第43-45页 |
4.4 不同的处理对WT与突变体tpp4气孔开度的影响 | 第45-47页 |
4.5 相关突变体的表型分析 | 第47-49页 |
4.5.1 TPP4相关突变体的表型分析 | 第47-49页 |
4.5.2 ABA信号通路中相关突变体的表型分析 | 第49页 |
4.6 T6P与ABA对相关基因表达的影响 | 第49-51页 |
4.7 双突变体中相关基因表达的分析 | 第51-53页 |
5 讨论 | 第53-57页 |
5.1 TPP4基因组织定位分析 | 第53页 |
5.2 TPP4缺失突变体的表型分析 | 第53-54页 |
5.3 突变体tpp4、tpp6的表型分析 | 第54页 |
5.4 T6P对ABA信号通路作用的分析 | 第54-55页 |
5.5 T6P与Sn RK1/Sn RK2.6 之间的联系 | 第55-57页 |
6 结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67页 |