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拟南芥中TPP4基因应答ABA胁迫的初步分析

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
缩写词第7-11页
1 前言第11-21页
    1.1 海藻糖的概述第11-13页
        1.1.1 海藻糖的理化性质第11-12页
        1.1.2 海藻糖的生物学功能第12-13页
    1.2 海藻糖的合成和降解途径第13-14页
        1.2.1 海藻糖的生物合成途径第13页
        1.2.2 海藻糖的生物降解途径第13-14页
    1.3 海藻糖合成途径TPS–TPP的研究现状第14-16页
        1.3.1 海藻糖磷酸合酶第14-15页
        1.3.2 海藻糖磷酸酯酶第15页
        1.3.3 海藻糖代谢途径的中间产物T6P第15-16页
    1.4 Sn RKs家族第16-19页
        1.4.1 Sn RK1s的概述第17-18页
        1.4.2 Sn RK2s的概述第18页
        1.4.3 Sn RK3s的概述第18-19页
    1.5 ABA介导气孔运动的信号通路第19-21页
2 立题依据第21-23页
3 材料与方法第23-37页
    3.1 常用仪器第23页
    3.2 实验材料、菌株和载体第23-24页
        3.2.1 植物实验材料第23-24页
        3.2.2 菌株和载体第24页
    3.3 实验药品和试剂第24-25页
    3.4 培养基及溶液的配制第25-26页
        3.4.1 培养基的配制第25页
        3.4.2 溶液的配制第25-26页
        3.4.3 常用抗生素的配置第26页
    3.5 实验方法第26-37页
        3.5.1 拟南芥的栽培第26-27页
        3.5.2 拟南芥的杂交第27页
        3.5.3 拟南芥DNA的提取第27页
        3.5.4 琼脂糖凝胶的配制及回收第27-28页
        3.5.5 Trizol法提取拟南芥RNA第28页
        3.5.6 反转录制备拟南芥c DNA第28页
        3.5.7 T-DNA插入缺失纯合突变体的鉴定第28-29页
        3.5.8 拟南芥气孔开度的观察第29页
        3.5.9 测定植株失水率实验第29-30页
        3.5.10 拟南芥根伸长的观察第30页
        3.5.11 GUS染色的方法第30页
        3.5.12 远红外热图分析实验第30-31页
        3.5.13 PCR引物序列第31-32页
        3.5.14 载体构建第32-33页
        3.5.15 大肠杆菌感受态的制备第33-34页
        3.5.16 大肠杆菌感受态的转化第34页
        3.5.17 重组菌落与质粒的鉴定第34页
        3.5.18 农杆菌感受态的制备第34-35页
        3.5.19 农杆菌感受态的转化第35页
        3.5.20 拟南芥浸染第35页
        3.5.21 转基因植株的筛选第35-37页
4 结果与分析第37-53页
    4.1 实验所用T-DNA插入突变体的鉴定和筛选第37-40页
        4.1.1 TPP4基因T-DNA插入突变体的筛选和鉴定第37-38页
        4.1.2 TPP6基因与AKIN10基因T-DNA插入突变体的鉴定第38-39页
        4.1.3 双突变体的PCR鉴定第39-40页
    4.2 TPP4组织定位分析第40-42页
    4.3 突变体tpp4的表型分析第42-45页
        4.3.1 幼苗期突变体tpp4-1 根的伸长对ABA具有一定的不敏感第42-43页
        4.3.2 TPP4等基因突变体失水率和远红外成像分析第43-45页
    4.4 不同的处理对WT与突变体tpp4气孔开度的影响第45-47页
    4.5 相关突变体的表型分析第47-49页
        4.5.1 TPP4相关突变体的表型分析第47-49页
        4.5.2 ABA信号通路中相关突变体的表型分析第49页
    4.6 T6P与ABA对相关基因表达的影响第49-51页
    4.7 双突变体中相关基因表达的分析第51-53页
5 讨论第53-57页
    5.1 TPP4基因组织定位分析第53页
    5.2 TPP4缺失突变体的表型分析第53-54页
    5.3 突变体tpp4、tpp6的表型分析第54页
    5.4 T6P对ABA信号通路作用的分析第54-55页
    5.5 T6P与Sn RK1/Sn RK2.6 之间的联系第55-57页
6 结论第57-59页
参考文献第59-67页
致谢第67页

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