| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 引言 | 第11-20页 |
| 1. 前言 | 第11页 |
| 2. 脂滴的形态结构与功能 | 第11-14页 |
| 3. 脂滴与人类健康 | 第14-16页 |
| 4. Plin2 | 第16-18页 |
| 5. 本课题研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 材料与方法 | 第20-29页 |
| 1. 实验材料 | 第20页 |
| 2. 溶液及配方 | 第20-21页 |
| 3. 小鼠C2C12细胞脂滴提取 | 第21-24页 |
| 3.1 细胞培养 | 第21-22页 |
| 3.2 油酸的配置以及使用 | 第22页 |
| 3.3 脂滴纯化 | 第22页 |
| 3.4 C2C12细胞脂滴Nile Red染色和粒度仪检测 | 第22页 |
| 3.5 C2C12细胞脂滴蛋白纯度鉴定 | 第22-24页 |
| 3.5.1 C2C12细胞脂滴蛋白样品SDS-PAGE | 第23页 |
| 3.5.2 SDS-PAGE Silver Staining | 第23页 |
| 3.5.3 Colloidal Blue | 第23页 |
| 3.5.4 Western Blot | 第23-24页 |
| 4. 小鼠C2C12细胞脂滴蛋白质谱样品制备 | 第24-25页 |
| 5. 定量PCR(quantitative PCR,qPCR) | 第25-26页 |
| 5.1 C2C12细胞mRNA提取 | 第25页 |
| 5.2 反转录 | 第25页 |
| 5.3 qPCR | 第25-26页 |
| 6. C2C12细胞蛋白密度测定 | 第26页 |
| 7. 细胞脂质薄层分析 | 第26页 |
| 8. C2C12细胞脂滴蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白与脂滴共定位Confocal样品制备 | 第26-27页 |
| 9. 脂滴的体外实验 | 第27页 |
| 10. Plin2敲除细胞的筛选和鉴定 | 第27-29页 |
| 10.1 Plin2细胞敲除质粒的构建 | 第27-28页 |
| 10.2 Plin2细胞的筛选 | 第28页 |
| 10.3 免疫印迹鉴定Plin2敲除细胞 | 第28-29页 |
| 结果与分析 | 第29-40页 |
| 1. OA刺激C2C12细胞Plin2的表达 | 第29-30页 |
| 2. 在小鼠骨骼肌细胞中,Plin2是最主要的脂滴蛋白 | 第30-32页 |
| 3. Plin2敲除细胞的鉴定 | 第32页 |
| 4. Plin2敲除的骨骼肌细胞脂滴数目减少,但脂滴变得更大 | 第32-35页 |
| 5. Plin2敲除的骨骼肌细胞合成和水解TAG的能力均降低 | 第35-36页 |
| 6. Plin2敲除的骨骼肌细胞中,脂滴合成PC和TAG的能力增强 | 第36-37页 |
| 7. Plin2敲除细胞脂滴蛋白质组学分析 | 第37-40页 |
| 讨论 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 附录 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
| 综述 | 第49-64页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 英文缩列表 | 第64-65页 |
