| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号与缩略语说明 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 对乙酰氨基酚简介 | 第12-14页 |
| 1.1.1 对乙酰氨基酚基本性质 | 第12-13页 |
| 1.1.2 对乙酰氨基酚污染现状及毒理 | 第13-14页 |
| 1.2 对乙酰氨基酚污染修复方法 | 第14-18页 |
| 1.2.1 有机污染物修复方法概述 | 第14页 |
| 1.2.2 物化法处理对乙酰氨基酚研究 | 第14-15页 |
| 1.2.3 微生物修复法处理对乙酰氨基酚研究 | 第15-18页 |
| 1.3 酰胺键简介及其断裂 | 第18-22页 |
| 1.3.1 酰胺键定义 | 第18-19页 |
| 1.3.2 含酰胺键化合物概述 | 第19-20页 |
| 1.3.3 酰胺键的断裂 | 第20-22页 |
| 1.4 课题意义及内容 | 第22-24页 |
| 1.4.1 课题提出的背景及意义 | 第22-23页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 对乙酰氨基酚降解菌的筛选及鉴定 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料、试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.1 培养基及缓冲液 | 第24页 |
| 2.1.2 主要材料试剂和仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 对乙酰氨基酚降解菌的分离、纯化 | 第25页 |
| 2.2.2 降解菌株的形态特征及生理生化鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.3 降解菌株16S rDNA序列的测定 | 第26-27页 |
| 2.2.4 16S rDNA基因序列测定和降解菌株系统发育地位的确定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 菌体生长量及对乙酰氨基酚残留量的测定 | 第28页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第28-33页 |
| 2.3.1 对乙酰氨基酚降解菌的富集、驯化与筛选 | 第28-29页 |
| 2.3.2 菌株的菌落形态及生理生化特征 | 第29-30页 |
| 2.3.3 降解菌系统分类地位鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 降解菌株的最适生长条件 | 第31-33页 |
| 2.4 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 菌株降解特性及代谢途径研究 | 第34-42页 |
| 3.1 实验材料、试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.1 培养基、材料试剂及主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.2 菌种培养及降解液的配置 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 菌株HZA2对对乙酰氨基酚的降解 | 第35页 |
| 3.2.2 对乙酰氨基酚代谢产物的确定 | 第35-36页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第36-41页 |
| 3.3.1 温度对菌株HZA2降解对乙酰氨基酚的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.2 pH值对菌株HZA2降解对乙酰氨基酚的影响 | 第37页 |
| 3.3.3 不同营养条件对菌株HZA2降解对乙酰氨基酚的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.4 初始浓度对菌株HZA2降解对乙酰氨基酚的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.5 菌株HZA2降解对乙酰氨基酚途径研究 | 第39-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 对乙酰氨基酚酰胺酶基因的克隆和功能鉴定 | 第42-56页 |
| 4.1 实验材料、试剂 | 第42页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第42页 |
| 4.1.2 培养基和试剂 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-47页 |
| 4.2.1 菌株的培养条件 | 第42-43页 |
| 4.2.2 基因组DNA文库建立准备 | 第43页 |
| 4.2.3 酶切体系建立 | 第43-44页 |
| 4.2.4 酶切片段凝胶电泳回收及酶连 | 第44页 |
| 4.2.5 基因文库的构建及阳性克隆的筛选 | 第44页 |
| 4.2.6 阳性克隆测序、序列分析 | 第44-45页 |
| 4.2.7 ace123基因的扩增 | 第45页 |
| 4.2.8 基因ace123在大肠杆菌中诱导表达以及酶的纯化 | 第45-47页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第47-55页 |
| 4.3.1 菌株HZA2总DNA的Sau3AI酶切及回收 | 第47-48页 |
| 4.3.2 阳性转化子的获得 | 第48-49页 |
| 4.3.3 阳性克隆测序及序列分析 | 第49页 |
| 4.3.4 ace123基因的扩增 | 第49-51页 |
| 4.3.5 ACE123蛋白的异源表达和纯化 | 第51页 |
| 4.3.6 酶ACE123的功能鉴定 | 第51-55页 |
| 4.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 总结与展望 | 第56-59页 |
| 5.1 研究内容及结论 | 第56-57页 |
| 5.2 创新之处 | 第57页 |
| 5.3 展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录1 主要试剂和缓冲液 | 第66-68页 |
| 附录2 菌株HZA2的16S RDNA序列 | 第68-69页 |
| 附录3 基因ACE123的核苷酸序列 | 第69-70页 |
| 附录4 酶ACE123的氨基酸序列 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间参加的科研项目和成果 | 第72页 |
