摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词中英文对照 | 第12-14页 |
第一章 绪论 | 第14-20页 |
1 水疱性口炎病毒 | 第14-16页 |
1.1 水疱性口炎病毒概述 | 第14页 |
1.2 VSV的诊断 | 第14-15页 |
1.3 水疱性口炎病毒作为疫苗载体的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 VSV基质蛋白M的相关研究 | 第16页 |
2 单核细胞 | 第16-17页 |
3 树突状细胞 | 第17-18页 |
4 树突状细胞与抗肿瘤免疫 | 第18-20页 |
第二章 实验方案设计 | 第20-23页 |
1 实验目的和意义 | 第20页 |
2 实验内容 | 第20-22页 |
2.1 猪单核细胞诱导的树突状细胞(MoDC)的培养和鉴定 | 第20-21页 |
2.2 VSV感染Monocyte和MoDC实验 | 第21页 |
2.3 VSV感染MoDC的细胞因子表达的变化 | 第21页 |
2.4 制备抗猪IFN-β的单克隆抗体 | 第21-22页 |
3 实验流程图 | 第22-23页 |
第三章 Monocyte及MoDC的制备及鉴定 | 第23-29页 |
1 材料、试剂及仪器 | 第23页 |
1.1 动物 | 第23页 |
1.2 主要材料和仪器 | 第23页 |
1.3 主要试剂的配置 | 第23页 |
2 实验方法 | 第23-25页 |
2.1 Monocyte制取 | 第23-24页 |
2.2 MoDC的诱导 | 第24-25页 |
2.3 MoDC的鉴定 | 第25页 |
3 结果 | 第25-27页 |
3.1 Monocyte及MoDC的制备 | 第25-26页 |
3.2 MoDC的鉴定 | 第26-27页 |
4 讨论 | 第27-29页 |
第四章 水疱性口炎病毒与Monocyte的互作 | 第29-36页 |
1 材料、试剂及仪器 | 第29-30页 |
1.1 细胞和病毒 | 第29页 |
1.2 主要材料和仪器 | 第29页 |
1.3 主要试剂的配置 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-31页 |
2.1 细胞复苏与培养 | 第30页 |
2.2 病毒扩增和定量 | 第30-31页 |
2.3 病毒在IBRS2、Monocyte中的生长曲线 | 第31页 |
2.4 Monocyte与MoDC的感染率检测 | 第31页 |
2.5 激光共聚焦显微镜荧光检测 | 第31页 |
3 实验结果 | 第31-35页 |
3.1 病毒滴度结果 | 第31-32页 |
3.2 病毒生长曲线 | 第32-33页 |
3.3 共聚焦显微镜鉴定病毒感染 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
第五章 水疱性口炎病毒与MoDC的互作 | 第36-44页 |
1 材料、试剂及仪器 | 第36页 |
1.1 细胞和病毒 | 第36页 |
1.2 主要材料和仪器 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-37页 |
2.1 激光共聚焦显微镜荧光检测 | 第36页 |
2.2 MoDC的感染率时相 | 第36-37页 |
2.3 病毒在MoDC中的生长曲线 | 第37页 |
2.4 病毒感染VSV病毒后的细胞因子变化 | 第37页 |
3 实验结果 | 第37-42页 |
3.1 MoDC的感染状况 | 第37-38页 |
3.2 MoDC的感染率时相结果 | 第38-40页 |
3.3 病毒多步生长曲线 | 第40页 |
3.4 细胞因子变化 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
5 展望 | 第43-44页 |
第六章 猪IFN-β的单克隆抗体的制备 | 第44-60页 |
1 实验材料和试剂 | 第44-48页 |
1.1 实验动物和细胞株 | 第44页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第44-45页 |
1.3 溶液的配置 | 第45-48页 |
2 实验方法 | 第48-55页 |
2.1 IFN-β蛋白表达与纯化 | 第48-49页 |
2.2 IFN-β蛋白的鉴定 | 第49页 |
2.3 动物免疫 | 第49-52页 |
2.3.1 初次免疫抗原配制 | 第49-50页 |
2.3.2 二免、三免抗原配制 | 第50页 |
2.3.3 加强免疫抗原配制 | 第50页 |
2.3.4 抗原免疫 | 第50-52页 |
2.4 细胞融合 | 第52-53页 |
2.4.1 饲养层细胞的准备 | 第52页 |
2.4.2 小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0 的培养准备 | 第52页 |
2.4.3 细胞融合 | 第52-53页 |
2.5 杂交瘤细胞的培养与筛选 | 第53-54页 |
2.6 单克隆抗体腹水抗体制备 | 第54页 |
2.7 抗体效价检测 | 第54-55页 |
3 实验结果 | 第55-59页 |
3.1 IFN-β蛋白表达纯化结果 | 第55-56页 |
3.2 免疫小鼠血清抗体效价检测 | 第56-57页 |
3.3 细胞融合及有限稀释的结果 | 第57页 |
3.4 腹水效价测定 | 第57-58页 |
3.5 表达纯化抗原检测抗体特异性 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66页 |