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水疱性口炎病毒与Monocyte和MoDC的互作研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词中英文对照第12-14页
第一章 绪论第14-20页
    1 水疱性口炎病毒第14-16页
        1.1 水疱性口炎病毒概述第14页
        1.2 VSV的诊断第14-15页
        1.3 水疱性口炎病毒作为疫苗载体的研究进展第15-16页
        1.4 VSV基质蛋白M的相关研究第16页
    2 单核细胞第16-17页
    3 树突状细胞第17-18页
    4 树突状细胞与抗肿瘤免疫第18-20页
第二章 实验方案设计第20-23页
    1 实验目的和意义第20页
    2 实验内容第20-22页
        2.1 猪单核细胞诱导的树突状细胞(MoDC)的培养和鉴定第20-21页
        2.2 VSV感染Monocyte和MoDC实验第21页
        2.3 VSV感染MoDC的细胞因子表达的变化第21页
        2.4 制备抗猪IFN-β的单克隆抗体第21-22页
    3 实验流程图第22-23页
第三章 Monocyte及MoDC的制备及鉴定第23-29页
    1 材料、试剂及仪器第23页
        1.1 动物第23页
        1.2 主要材料和仪器第23页
        1.3 主要试剂的配置第23页
    2 实验方法第23-25页
        2.1 Monocyte制取第23-24页
        2.2 MoDC的诱导第24-25页
        2.3 MoDC的鉴定第25页
    3 结果第25-27页
        3.1 Monocyte及MoDC的制备第25-26页
        3.2 MoDC的鉴定第26-27页
    4 讨论第27-29页
第四章 水疱性口炎病毒与Monocyte的互作第29-36页
    1 材料、试剂及仪器第29-30页
        1.1 细胞和病毒第29页
        1.2 主要材料和仪器第29页
        1.3 主要试剂的配置第29-30页
    2 实验方法第30-31页
        2.1 细胞复苏与培养第30页
        2.2 病毒扩增和定量第30-31页
        2.3 病毒在IBRS2、Monocyte中的生长曲线第31页
        2.4 Monocyte与MoDC的感染率检测第31页
        2.5 激光共聚焦显微镜荧光检测第31页
    3 实验结果第31-35页
        3.1 病毒滴度结果第31-32页
        3.2 病毒生长曲线第32-33页
        3.3 共聚焦显微镜鉴定病毒感染第33-35页
    4 讨论第35-36页
第五章 水疱性口炎病毒与MoDC的互作第36-44页
    1 材料、试剂及仪器第36页
        1.1 细胞和病毒第36页
        1.2 主要材料和仪器第36页
    2 实验方法第36-37页
        2.1 激光共聚焦显微镜荧光检测第36页
        2.2 MoDC的感染率时相第36-37页
        2.3 病毒在MoDC中的生长曲线第37页
        2.4 病毒感染VSV病毒后的细胞因子变化第37页
    3 实验结果第37-42页
        3.1 MoDC的感染状况第37-38页
        3.2 MoDC的感染率时相结果第38-40页
        3.3 病毒多步生长曲线第40页
        3.4 细胞因子变化第40-42页
    4 讨论第42-43页
    5 展望第43-44页
第六章 猪IFN-β的单克隆抗体的制备第44-60页
    1 实验材料和试剂第44-48页
        1.1 实验动物和细胞株第44页
        1.2 主要试剂和仪器第44-45页
        1.3 溶液的配置第45-48页
    2 实验方法第48-55页
        2.1 IFN-β蛋白表达与纯化第48-49页
        2.2 IFN-β蛋白的鉴定第49页
        2.3 动物免疫第49-52页
            2.3.1 初次免疫抗原配制第49-50页
            2.3.2 二免、三免抗原配制第50页
            2.3.3 加强免疫抗原配制第50页
            2.3.4 抗原免疫第50-52页
        2.4 细胞融合第52-53页
            2.4.1 饲养层细胞的准备第52页
            2.4.2 小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0 的培养准备第52页
            2.4.3 细胞融合第52-53页
        2.5 杂交瘤细胞的培养与筛选第53-54页
        2.6 单克隆抗体腹水抗体制备第54页
        2.7 抗体效价检测第54-55页
    3 实验结果第55-59页
        3.1 IFN-β蛋白表达纯化结果第55-56页
        3.2 免疫小鼠血清抗体效价检测第56-57页
        3.3 细胞融合及有限稀释的结果第57页
        3.4 腹水效价测定第57-58页
        3.5 表达纯化抗原检测抗体特异性第58-59页
    4 讨论第59-60页
结论第60-61页
参考文献第61-66页
致谢第66页

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