| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 甘露聚糖概述 | 第13-14页 |
| 1.2 β-甘露聚糖酶简介 | 第14-15页 |
| 1.3 β-甘露聚糖酶的来源及性质比较 | 第15-18页 |
| 1.3.1 β-甘露聚糖酶的来源 | 第15页 |
| 1.3.2 β-甘露聚糖酶的性质比较 | 第15-18页 |
| 1.4 β-甘露聚糖酶的结构 | 第18-20页 |
| 1.5 β-甘露聚糖酶的作用机制及水解产物 | 第20-21页 |
| 1.6 β-甘露聚糖酶的应用 | 第21-23页 |
| 1.6.1 石油与天然气开采 | 第21-22页 |
| 1.6.2 造纸行业 | 第22页 |
| 1.6.3 洗涤行业 | 第22页 |
| 1.6.4 饲料添加 | 第22页 |
| 1.6.5 食品行业 | 第22-23页 |
| 1.6.6 制药行业 | 第23页 |
| 1.7 β-甘露聚糖酶的国内外研究状况 | 第23-25页 |
| 1.7.1 β-甘露聚糖酶的菌种选育方法 | 第23-24页 |
| 1.7.2 β-甘露聚糖酶的分离纯化 | 第24页 |
| 1.7.3 β-甘露聚糖酶的生物学研究状况 | 第24-25页 |
| 1.8 研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 1.9 研究主要内容及技术路线 | 第26-28页 |
| 1.9.1 研究内容 | 第26-27页 |
| 1.9.2 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 产β-甘露聚糖酶菌株的筛选与鉴定 | 第28-45页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.2.1 土样来源 | 第28页 |
| 2.2.2 培养基 | 第28页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第28-30页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2.5 PCR引物 | 第30-31页 |
| 2.2.6 常用试剂配制 | 第31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.3.1 样品富集 | 第31页 |
| 2.3.2 菌株初筛 | 第31-32页 |
| 2.3.3 菌株复筛 | 第32页 |
| 2.3.4 粗酶液的制备 | 第32页 |
| 2.3.5 β-甘露聚糖酶活力测定 | 第32-33页 |
| 2.3.6 菌种保藏 | 第33页 |
| 2.3.7 菌种鉴定 | 第33-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 2.4.1 甘露糖标准曲线绘制 | 第38页 |
| 2.4.2 菌株筛选 | 第38-39页 |
| 2.4.3 菌种鉴定 | 第39-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第三章 β-甘露聚糖酶基因克隆与表达 | 第45-70页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 实验材料 | 第45-49页 |
| 3.2.1 菌种与质粒 | 第45页 |
| 3.2.2 培养基 | 第45-46页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第46-47页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第47页 |
| 3.2.5 PCR引物 | 第47-48页 |
| 3.2.6 常用试剂配制 | 第48-49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-57页 |
| 3.3.1 细菌基因组DNA的提取 | 第49页 |
| 3.3.2 manB19基因的克隆 | 第49-52页 |
| 3.3.3 质粒提取 | 第52页 |
| 3.3.4 表达载体的构建 | 第52-55页 |
| 3.3.5 manB19基因在E.coli BL21（DE3）中的诱导表达 | 第55-56页 |
| 3.3.6 SDS-PAGE电泳检测分析 | 第56-57页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第57-69页 |
| 3.4.1 β-甘露聚糖酶基因的获得 | 第57-58页 |
| 3.4.2 β-甘露聚糖酶序列分析 | 第58-61页 |
| 3.4.3 β-甘露聚糖酶结构预测 | 第61-66页 |
| 3.4.4 重组表达载体的验证 | 第66-67页 |
| 3.4.5 阳性转化子分泌表达 | 第67-68页 |
| 3.4.6 重组β-甘露聚糖酶的诱导表达 | 第68-69页 |
| 3.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 第四章 产酶条件的优化及酶学性质研究 | 第70-86页 |
| 4.1 引言 | 第70页 |
| 4.2 实验材料 | 第70-73页 |
| 4.2.1 菌种和质粒 | 第70页 |
| 4.2.2 培养基 | 第70页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第70-72页 |
| 4.2.4 实验仪器 | 第72页 |
| 4.2.5 常用试剂配制 | 第72-73页 |
| 4.3 实验方法 | 第73-77页 |
| 4.3.1 基因工程菌诱导产酶条件的优化 | 第73-74页 |
| 4.3.2 重组β-甘露聚酶活力测定 | 第74页 |
| 4.3.3 Bradford法测定蛋白浓度 | 第74-75页 |
| 4.3.4 重组β-甘露聚酶的亲和纯化 | 第75页 |
| 4.3.5 重组β-甘露聚酶学性质研究 | 第75-76页 |
| 4.3.6 重组β-甘露聚酶学动力学研究 | 第76-77页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第77-84页 |
| 4.4.1 基因工程菌诱导产酶条件的优化 | 第77-79页 |
| 4.4.2 重组β-甘露聚糖酶的亲和纯化 | 第79-80页 |
| 4.4.3 重组β-甘露聚酶学性质研究 | 第80-83页 |
| 4.4.4 重组β-甘露聚酶学动力学研究 | 第83-84页 |
| 4.5 本章小结 | 第84-86页 |
| 第五章 结论与展望 | 第86-88页 |
| 5.1 文章结论 | 第86-87页 |
| 5.2 创新点 | 第87页 |
| 5.3 展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 附件 | 第100页 |