| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-29页 |
| 1.1 猪圆环病毒概况 | 第14-15页 |
| 1.1.1 致病性 | 第14页 |
| 1.1.2 病原学 | 第14-15页 |
| 1.2 猪圆环病毒疫苗的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 灭活疫苗 | 第16页 |
| 1.2.2 弱毒疫苗 | 第16-17页 |
| 1.2.3 基因工程疫苗 | 第17-20页 |
| 1.2.4 展望 | 第20页 |
| 1.3 伪狂犬病病毒概况 | 第20-22页 |
| 1.3.1 致病性 | 第20-21页 |
| 1.3.2 病原学 | 第21-22页 |
| 1.4 以PRV为载体的重组疫苗研究进展 | 第22-27页 |
| 1.4.1 重组的PCV2/PRV的研究 | 第25页 |
| 1.4.2 重组的PRRSV/PRV的研究 | 第25-26页 |
| 1.4.3 重组的CSFV/PRV的研究 | 第26页 |
| 1.4.4 重组的PPV/PRV的研究 | 第26页 |
| 1.4.5 重组的FDMV/PRV的研究 | 第26-27页 |
| 1.4.6 其它的重组的病毒 | 第27页 |
| 1.4.7 展望 | 第27页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 表达单个PCV2 Cap蛋白的重组PRV毒株的构建 | 第29-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-35页 |
| 2.1.1 毒株、质粒、菌株、细胞、主要试剂及其溶液的配制 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第30页 |
| 2.1.3 PRV病毒的准备 | 第30页 |
| 2.1.4 PRV病毒基因组的提取 | 第30-31页 |
| 2.1.5 重组转移载体的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| 2.1.6 重组转移载体质粒的提取 | 第32-33页 |
| 2.1.7 转染用细胞的准备 | 第33页 |
| 2.1.8 转移载体pMD18T-LR(TK)-EGFP和PRV基因组共转染细胞 | 第33页 |
| 2.1.9 TK基因缺失重组病毒的筛选、纯化与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.1.10 rPRV-TK-/EGFP+重组毒株基因组的提取 | 第34页 |
| 2.1.11 表达单个Cap蛋白重组病毒的筛选、纯化与鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2 结果 | 第35-37页 |
| 2.2.1 转移载体的构建 | 第35页 |
| 2.2.2 TK基因缺失重组病毒rPRV-TK-/EGFP+的获得与鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.3 表达单个Cap蛋白重组毒株的获得与鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 串联表达2个PCV2 Cap蛋白的重组PRV毒株的构建 | 第39-52页 |
| 3.1 材料和方法 | 第40-44页 |
| 3.1.1 试剂、质粒和抗体 | 第40页 |
| 3.1.2 试验动物 | 第40页 |
| 3.1.3 rPRV-TK-/Cap+病毒基因组的提取 | 第40页 |
| 3.1.4 转移载体pMD18T-LR(gE)的构建与鉴定 | 第40-41页 |
| 3.1.5 转移载体pMD18T-LR(gE)-EGFP的构建与鉴定 | 第41页 |
| 3.1.6 含有Cap不同表达盒的转移载体的构建和鉴定 | 第41-42页 |
| 3.1.7 重组转移载体质粒的提取 | 第42页 |
| 3.1.8 转染用细胞的准备 | 第42页 |
| 3.1.9 TK和gE基因缺失重组病毒的筛选、纯化与鉴定 | 第42页 |
| 3.1.10 rPRV-TK-/Cap+/gE-/EGFP+病毒基因组的提取 | 第42页 |
| 3.1.11 含有Cap不同表达盒的重组病毒的筛选、纯化与鉴定 | 第42-43页 |
| 3.1.12 含有Cap不同表达盒的重组病毒的PCR与IPMA鉴定 | 第43-44页 |
| 3.1.13 含有Cap不同表达盒的重组病毒的Western blot鉴定 | 第44页 |
| 3.1.14 含有Cap不同表达盒的重组病毒的一步生长曲线测定 | 第44页 |
| 3.1.15含有Cap不同表达盒的重组病毒在家兔上的安全性试验 | 第44页 |
| 3.2 结果 | 第44-49页 |
| 3.2.1 转移载体的成功构建 | 第44-45页 |
| 3.2.2 TK和gE基因缺失重组毒株的筛选与鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.3 含有Cap不同表达盒的重组毒株的筛选与鉴定 | 第46-48页 |
| 3.2.4 含有Cap不同表达盒的重组毒株的Western blot鉴定 | 第48页 |
| 3.2.5 含有Cap不同表达盒的重组毒株的生长特性鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2.6 含有Cap不同表达盒的重组毒株对家兔的安全性试验 | 第49页 |
| 3.3 讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 PRV UL42蛋白抗原表位的鉴定 | 第52-62页 |
| 4.1 材料和方法 | 第52-56页 |
| 4.1.1 质粒、试剂及抗体 | 第52-53页 |
| 4.1.2 抗原表位的鉴定 | 第53-55页 |
| 4.1.3 对抗原表位的分析 | 第55页 |
| 4.1.4 单抗序列的测定 | 第55页 |
| 4.1.5 UL42单克隆抗体的应用 | 第55-56页 |
| 4.2 结果 | 第56-60页 |
| 4.2.1 UL42单克隆抗体特性的鉴定 | 第56-59页 |
| 4.2.2 UL42单克隆抗体的应用 | 第59-60页 |
| 4.3 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
