| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略词表 | 第16-18页 |
| 一、前言 | 第18-21页 |
| 二、文献综述 | 第21-33页 |
| 1 干细胞与动物生产的潜在关系 | 第21-22页 |
| ·干细胞"干性" | 第21页 |
| ·干细胞与动物生长发育 | 第21-22页 |
| 2 干细胞定向分化及调节机制 | 第22-27页 |
| ·干细胞成肌分化及其调节机制 | 第22-24页 |
| ·干细胞成脂分化及其调节机制 | 第24-26页 |
| ·干细胞定向分化可能机制 | 第26-27页 |
| 3 MSTN对肌肉和脂肪生成的调控作用 | 第27-29页 |
| ·MSTN对肌生成的影响 | 第27-28页 |
| ·MSTN对脂肪生成的影响 | 第28-29页 |
| 4 (早期)营养与干细胞分化的关系 | 第29-32页 |
| 5 主要存在的问题 | 第32-33页 |
| 三、本研究的目的意义和内容 | 第33-35页 |
| 四、试验部分 | 第35-100页 |
| 试验一 不同来源间充质干细胞的鉴定及生物学特性比较 | 第35-59页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1 前言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-43页 |
| ·试验动物 | 第36页 |
| ·主要仪器及设备 | 第36页 |
| ·药品及试剂配制 | 第36页 |
| ·不同来源间充质干细胞的分离培养 | 第36-38页 |
| ·成体骨髓、肌肉和脂肪来源干细胞的分离培养 | 第36-37页 |
| ·胎儿肌肉来源间充质干细胞的分离培养 | 第37页 |
| ·传代培养 | 第37-38页 |
| ·检测指标及方法 | 第38-43页 |
| ·细胞形态学观察 | 第38页 |
| ·细胞表面标志的检测 | 第38-39页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第39页 |
| ·多向分化诱导 | 第39-40页 |
| ·M-Cadherin和Desmin检测 | 第40页 |
| ·油红O染色 | 第40页 |
| ·碱性磷酸酶钙钴法染色 | 第40-41页 |
| ·von Kossa染色 | 第41页 |
| ·RNA提取及反转录 | 第41页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第41-43页 |
| 3 数据统计分析 | 第43页 |
| 4 结果与分析 | 第43-56页 |
| ·细胞形态学比较 | 第43-50页 |
| ·细胞增殖分析 | 第50页 |
| ·多向诱导分化 | 第50-56页 |
| ·成肌分化 | 第50-55页 |
| ·成脂分化 | 第55-56页 |
| ·成骨分化 | 第56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| 6 小结 | 第58-59页 |
| 试验二 MSTN对猪不同来源间充质干细胞成脂分化的影响 | 第59-78页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 1 前言 | 第59-60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-65页 |
| ·试验动物 | 第60页 |
| ·主要仪器及设备 | 第60页 |
| ·药品及试剂配制 | 第60页 |
| ·细胞分离及传代培养 | 第60-61页 |
| ·细胞鉴定 | 第61-62页 |
| ·细胞形态学观察 | 第61页 |
| ·细胞表面标志的检测 | 第61页 |
| ·多向分化诱导 | 第61-62页 |
| ·MSTN和DEX在猪间充质干细胞成脂分化中的作用 | 第62页 |
| ·细胞甘油三酯的检测 | 第62-64页 |
| ·总RNA提取及反转录 | 第64页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第64-65页 |
| 3 数据统计分析 | 第65页 |
| 4 结果与分析 | 第65-76页 |
| ·猪不同来源间充质干细胞的分离培养 | 第65-66页 |
| ·猪不同来源间充质干细胞表型分析 | 第66页 |
| ·猪不同来源间充质干细胞的多向分化潜能 | 第66页 |
| ·MSTN和DEX对不同来源猪间充质干细胞成脂分化的影响 | 第66-76页 |
| ·MSTN和DEX对不同来源猪间充质干细胞甘油三酯含量的影响 | 第66-67页 |
| ·MSTN和DEX对不同来源猪间充质干细胞分化基因表达的影响 | 第67-76页 |
| 5 讨论 | 第76-77页 |
| 6 小结 | 第77-78页 |
| 试验三 猪间充质干细胞定向分化的营养调控 | 第78-87页 |
| 摘要 | 第78页 |
| 1 前言 | 第78页 |
| 2 材料与方法 | 第78-80页 |
| ·细胞 | 第78-79页 |
| ·药品及试剂 | 第79页 |
| ·试验设计 | 第79页 |
| ·方法及步骤 | 第79-80页 |
| ·试验处理 | 第79页 |
| ·细胞甘油三酯含量的测定 | 第79页 |
| ·基因表达检测 | 第79-80页 |
| 3 数据统计分析 | 第80页 |
| 4 结果与分析 | 第80-84页 |
| ·Arg对猪间充质干细胞定向分化的影响 | 第80-82页 |
| ·营养调控对猪间充质干细胞MSTN表达的影响 | 第82-84页 |
| 5 讨论 | 第84-85页 |
| 6 小结 | 第85-87页 |
| 试验四 MSTN在Arg调控猪间充质干细胞成脂分化中的作用 | 第87-100页 |
| 摘要 | 第87页 |
| 1 前言 | 第87-88页 |
| 2 材料与方法 | 第88-91页 |
| ·细胞 | 第88页 |
| ·药品及试剂 | 第88页 |
| ·方法及步骤 | 第88-91页 |
| ·MSTN添加水平对猪间充质干细胞成脂分化的影响 | 第88-89页 |
| ·MSTN抗体添加水平对猪间充质干细胞成脂分化的影响 | 第89页 |
| ·Arg对猪间充质干细胞生脂基因表达的影响 | 第89-90页 |
| ·MSTN在营养调控猪间充质干细胞成脂分化中的作用 | 第90-91页 |
| 3 数据统计分析 | 第91页 |
| 4 结果与分析 | 第91-98页 |
| ·MSTN水平对猪间充质干细胞成脂分化的影响 | 第91-92页 |
| ·MSTN抗体水平对猪间充质干细胞成脂分化的影响 | 第92-93页 |
| ·Arg对猪间充质干细胞生脂基因表达的影响 | 第93页 |
| ·MSTN在营养调控猪间充质干细胞成脂分化中的作用 | 第93-98页 |
| 5 讨论 | 第98-99页 |
| 6 小结 | 第99-100页 |
| 五、总体讨论 | 第100-103页 |
| 六、论文总体结论 | 第103页 |
| 七、论文主要创新点 | 第103页 |
| 八、有待进一步研究的问题 | 第103-104页 |
| 主要参考文献 | 第104-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 附录1:小鼠荧光定量RT-PCR标准曲线及溶解曲线 | 第113-117页 |
| 附录2:猪荧光定量PCR标准曲线及溶解曲线 | 第117-122页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第122页 |
