| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-36页 |
| 1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.2 阿托伐他汀的药理作用 | 第14-15页 |
| 1.3 腈转化酶在阿托伐他汀类药物侧链合成上的应用 | 第15-18页 |
| 1.4 DERA在阿托伐他汀侧链中间体中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 羰基还原酶、羟基脱氢酶制备阿托伐他汀侧链中间体的应用 | 第19-24页 |
| 1.5.1 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 | 第19-21页 |
| 1.5.2 (3R,5S/R)-二羟基己酸酯 | 第21-24页 |
| 1.5.2.1 以(S/R)-5-羟基-3-羰基己酸酯为原料制备(3R,5S/R)-二羟基己酸酯 | 第21-22页 |
| 1.5.2.2 以(3,5)-二羰基己酸酯为原料制备(3R,5S/R)-二羟基己酸酯 | 第22-24页 |
| 1.6 阿托伐他汀双手性侧链中间体的化学-酶法合成工艺 | 第24-29页 |
| 1.6.1 (4R,6S)-6-氯甲基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯 | 第24-25页 |
| 1.6.2 (4R,6S)-6-氢甲基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯 | 第25-27页 |
| 1.6.3 (4R,6R)-6-氨乙基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯 | 第27-29页 |
| 1.7 本文研究内容和思路 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-36页 |
| 第二章 具有R-羰基还原酶活性菌株ZJB-08109发酵研究 | 第36-50页 |
| 2.1 引言 | 第36页 |
| 2.2 实验材料 | 第36-37页 |
| 2.2.1 菌株 | 第36页 |
| 2.2.2 实验仪器设备 | 第36-37页 |
| 2.2.3 实验药品及试剂 | 第37页 |
| 2.2.4 培养基成分 | 第37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-39页 |
| 2.3.1 培养方法 | 第37页 |
| 2.3.2 生物量的测定 | 第37页 |
| 2.3.3 羰基还原酶酶活的测定 | 第37-38页 |
| 2.3.4 静息细胞的制备 | 第38页 |
| 2.3.5 静息细胞转化 | 第38页 |
| 2.3.6 反应产物光学纯度及得率的测定 | 第38页 |
| 2.3.7 分析方法 | 第38-39页 |
| 2.4 结果和讨论 | 第39-48页 |
| 2.4.1 产物鉴定 | 第39-40页 |
| 2.4.1.1 产物液相质谱(HPLC-MS)分析 | 第39页 |
| 2.4.1.2 产物构型分析 | 第39-40页 |
| 2.4.2 标准曲线的绘制 | 第40-41页 |
| 2.4.3 种子生长曲线、种龄和接种量的确定 | 第41-44页 |
| 2.4.3.1 种龄对羰基还原酶表达的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.3.2 接种量对羰基还原酶表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.4 培养基初始pH对羰基还原酶表达的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.5 培养温度对羰基还原酶表达的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.6 菌株ZJB-08109发酵动力学 | 第46-47页 |
| 2.4.7 菌株ZJB-08109静息细胞不对称还原制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯 | 第47-48页 |
| 2.5 本章小结 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 第三章 菌株ZJB-08109羰基还原酶的酶学性质表征 | 第50-62页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 实验材料 | 第50-52页 |
| 3.2.1 菌株 | 第50页 |
| 3.2.2 实验仪器设备 | 第50-51页 |
| 3.2.3 实验药品及试剂 | 第51页 |
| 3.2.4 培养基成分 | 第51-52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 3.3.1 培养方法 | 第52页 |
| 3.3.2 初始反应速率的测定 | 第52页 |
| 3.3.3 分析方法 | 第52页 |
| 3.3.4 菌株ZJB-08109羰基还原酶的酶学研究 | 第52-54页 |
| 3.3.4.1 菌株ZJB-08109羰基还原酶最适pH值的测定 | 第52页 |
| 3.3.4.2 菌株ZJB-08109羰基还原酶的pH稳定性 | 第52-53页 |
| 3.3.4.3 菌株ZJB-08109羰基还原酶最适温度的测定 | 第53页 |
| 3.3.4.4 酶的温度稳定性 | 第53页 |
| 3.3.4.5 金属离子对酶活力的影响 | 第53页 |
| 3.3.4.6 表面活性剂对酶活力的影响 | 第53-54页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第54-61页 |
| 3.4.1 菌株ZJB-08109羰基还原酶最适pH值的测定 | 第54-55页 |
| 3.4.2 pH稳定性 | 第55-56页 |
| 3.4.3 菌株ZJB-08109羰基还原酶最适温度的测定 | 第56-57页 |
| 3.4.4 菌株ZJB-08109羰基还原酶的热稳定性 | 第57-58页 |
| 3.4.5 金属离子对菌株ZJB-08109羰基还原酶的影响 | 第58-59页 |
| 3.4.6 表面活性剂对菌株ZJB-08109羰基还原酶的影响 | 第59-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61页 |
| 参考文献 | 第61-62页 |
| 第四章 菌株ZJB-08109不对称还原合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的研究 | 第62-78页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 实验材料 | 第62-64页 |
| 4.2.1 菌株 | 第62页 |
| 4.2.2 实验仪器设备 | 第62-63页 |
| 4.2.3 实验药品及试剂 | 第63页 |
| 4.2.4 培养基成分 | 第63-64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 4.3.1 培养方法 | 第64页 |
| 4.3.2 分析方法 | 第64页 |
| 4.3.3 菌株ZJB-08109不对称还原生产6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的研究 | 第64-66页 |
| 4.3.3.1 反应体系pH的选择 | 第64页 |
| 4.3.3.2 反应体系温度的选择 | 第64页 |
| 4.3.3.3 不同辅助底物对不对称还原反应的影响 | 第64-65页 |
| 4.3.3.4 辅助底物的浓度对不对称还原反应的影响 | 第65页 |
| 4.3.3.5 不同底物浓度对不对称还原反应的影响 | 第65页 |
| 4.3.3.6 相同S/C下不同底物浓度对不对称还原反应的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.3.7 分批补料对不对称还原反应的影响 | 第66页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第66-76页 |
| 4.4.1 辅酶再生体系对不对称还原反应的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.2 反应体系pH对不对称还原反应的影响 | 第67-68页 |
| 4.4.3 反应体系温度对不对称还原反应的影响 | 第68-69页 |
| 4.4.4 不同辅助底物对不对称还原反应的影响 | 第69-70页 |
| 4.4.5 辅助底物的浓度对不对称还原反应的影响 | 第70-71页 |
| 4.4.6 不同底物浓度对不对称还原反应的影响 | 第71-72页 |
| 4.4.7 相同S/C下不同底物浓度对不对称还原反应的影响 | 第72-73页 |
| 4.4.8 分批补料对不对称还原反应的影响 | 第73-74页 |
| 4.4.9 两相体系催化制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的研究 | 第74-76页 |
| 4.4.9.1 不同有机溶剂与菌株ZJB-08109细胞相容性的研究 | 第75页 |
| 4.4.9.2 乙酸丁酯/水双相体系制备6-氰基-(3R, 5R)-二羟基己酸叔丁酯的研究 | 第75-76页 |
| 4.5 本章小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| 第五章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 5.1 结论 | 第78-79页 |
| 5.2 展望 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第83页 |
