| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-29页 |
| 1.1 油菜细胞核雄性不育与杂种优势的利用 | 第12-13页 |
| 1.2 植物的花药结构及发育进程 | 第13-21页 |
| 1.2.1 植物花药外表皮的发育及其功能 | 第14-15页 |
| 1.2.2 花药绒毡层的发育及其功能 | 第15-17页 |
| 1.2.3 花粉壁的发育及其功能 | 第17-21页 |
| 1.3 油菜隐性细胞核雄性不育机理初探 | 第21-24页 |
| 1.3.1 隐性细胞核不育材料S45AB的败育机理研究 | 第21页 |
| 1.3.2 隐性细胞核不育材料 7365AB的败育机理研究 | 第21-24页 |
| 1.4 蛋白质组学技术在植物中的应用 | 第24-25页 |
| 1.5 代谢区室在植物中的功能研究 | 第25-28页 |
| 1.6 目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.2 质粒载体和菌株 | 第29页 |
| 2.3 甘蓝型油菜花蕾蛋白质双向电泳 | 第29-35页 |
| 2.3.1 甘蓝型油菜花蕾总蛋白提取方法 | 第29-30页 |
| 2.3.2 甘蓝型油菜花蕾蛋白定量方法 | 第30-31页 |
| 2.3.3 第一向等电点聚焦电泳 | 第31-32页 |
| 2.3.4 胶条平衡 | 第32-33页 |
| 2.3.5 第二向SDS-PAGE电泳 | 第33-34页 |
| 2.3.6 凝胶染色及脱色 | 第34页 |
| 2.3.7 凝胶图像分析与差异蛋白点确定 | 第34页 |
| 2.3.8 凝胶染色质谱分析 | 第34-35页 |
| 2.3.8.1 蛋白质点的切取与胶内酶解 | 第34-35页 |
| 2.3.8.2 质谱分析 | 第35页 |
| 2.4 载体构建及拟南芥的遗传转化 | 第35-39页 |
| 2.4.1 原核表达载体构建 | 第36-37页 |
| 2.4.1.1 抗体合成载体的构建 | 第36页 |
| 2.4.1.2 Pull-down载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.4.2 启动子分析载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.4.3 酵母载体的构建 | 第38页 |
| 2.4.4 双分子荧光互补（BIFC）载体的构建 | 第38-39页 |
| 2.4.5 互补载体的构建 | 第39页 |
| 2.4.6 拟南芥的遗传转化 | 第39页 |
| 2.5 花药表面扫描电镜 | 第39-40页 |
| 2.6 花药表面脂类测定分析 | 第40页 |
| 2.7 原核表达和Western Bolt分析 | 第40-45页 |
| 2.7.1 原核表达 | 第40-41页 |
| 2.7.2 Western Blot | 第41-45页 |
| 2.8 GUS分析 | 第45-46页 |
| 2.9 RNA分离及定量PCR | 第46-47页 |
| 2.10 酵母双杂交实验 | 第47页 |
| 2.11 Pull-down实验 | 第47-49页 |
| 2.12 双分子荧光互补（BiFC）实验 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-76页 |
| 3.1 7365AB花药外表皮的表型观察 | 第50-51页 |
| 3.2 7365AB花药外表皮的蜡质成分测定 | 第51-53页 |
| 3.3 7365A和 7365B双向电泳分析 | 第53-71页 |
| 3.3.1 7365A和 7365B的凝胶电泳图像 | 第53-54页 |
| 3.3.2 差异蛋白点鉴定和功能聚类 | 第54-61页 |
| 3.3.3 孢粉素合成酶的功能研究 | 第61-71页 |
| 3.3.3.1 孢粉素合成酶在不育材料 7365A中显著下调 | 第61-62页 |
| 3.3.3.2 油菜孢粉素基因的克隆 | 第62-67页 |
| 3.3.3.3 孢粉素合成酶BnPKSA、BnPKSB和BnTKPR1原核表达 | 第67-68页 |
| 3.3.3.4 孢粉素合成酶western-blot验证 | 第68-69页 |
| 3.3.3.5 油菜孢粉素基因在拟南芥突变体中的互补验证 | 第69-71页 |
| 3.4 BnPKSA、BnPKSB、BnTKPR1和BnACOS5表达模式分析 | 第71-73页 |
| 3.5 BnPKSA、BnPKSB、BnTKPR1和BnACOS5四个孢粉素蛋白间的相互作用 | 第73-76页 |
| 4 讨论 | 第76-87页 |
| 4.1 双向电泳技术的策略 | 第76页 |
| 4.2 BnMs3基因影响花药角质层的形成 | 第76-78页 |
| 4.3 花粉外壁和花药角质层的形成可能共用一条脂类合成途径 | 第78-80页 |
| 4.4 BnMs3基因可能涉及绒毡层脂类蛋白转运 | 第80-84页 |
| 4.4.1 叶绿体内膜转运系统 | 第80-81页 |
| 4.4.2 BnMs3蛋白可能涉及绒毡层脂类蛋白转运 | 第81-82页 |
| 4.4.3 BnMs3蛋白可能在三维结构上与Bnms3存在差异 | 第82-84页 |
| 4.5 油菜的绒毡层孢粉素代谢区室 | 第84-85页 |
| 4.6 花药绒毡层孢粉素代谢区室的作用模式 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-103页 |
| 附录 作者简介与在读期间所发表的学术论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
