摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
1 绪论 | 第15-27页 |
1.1 问题的提出与研究意义 | 第15-18页 |
1.1.1 问题的提出 | 第15-18页 |
1.1.2 研究意义 | 第18页 |
1.2 国内外研究现状 | 第18-24页 |
1.2.1 NGF/NGFRs的结构和功能概述 | 第18-20页 |
1.2.2 NGF对肿瘤细胞存活、生长、凋亡的影响 | 第20-22页 |
1.2.3 NGF对肿瘤细胞增殖、分化的影响 | 第22页 |
1.2.4 NGF对肿瘤转移的影响 | 第22-24页 |
1.3 研究目的、研究内容及创新性 | 第24-27页 |
1.3.1 课题研究目的 | 第24-25页 |
1.3.2 课题研究内容 | 第25页 |
1.3.3 课题研究的技术路线 | 第25页 |
1.3.4 课题的特色及创新点 | 第25-27页 |
2 内源性的NGF及NGFRs在上皮性卵巢癌细胞中的表达 | 第27-49页 |
2.1 引言 | 第27-28页 |
2.2 实验材料 | 第28-32页 |
2.2.1 人卵巢癌细胞系 | 第28页 |
2.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第28-29页 |
2.2.3 主要实验试剂 | 第29-30页 |
2.2.4 主要试剂的准备和配制 | 第30-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-42页 |
2.3.1 Quantitative Real-Time PCR法检测常规培养条件下4种上皮性卵巢癌细胞系中NGF/NGFRs mRNA的表达情况 | 第32-37页 |
2.3.2 Western blot法检测卵巢癌细胞中NGF,TrkA和P75蛋白的表达 | 第37-42页 |
2.3.3 统计分析 | 第42页 |
2.4 实验结果 | 第42-46页 |
2.4.1 卵巢癌细胞系中NGF、TrkA受体和P75受体mRNA的表达 | 第42-44页 |
2.4.2 卵巢癌细胞系中NGF、TrkA和P75蛋白的表达 | 第44-46页 |
2.5 分析与讨论 | 第46-47页 |
2.6 本章小结 | 第47-49页 |
3 NGF对卵巢癌细胞存活、生长、生长节律、增殖、凋亡的影响及分子机制 | 第49-95页 |
3.1 引言 | 第49页 |
3.2 实验材料 | 第49-50页 |
3.2.1 人卵巢癌细胞系 | 第49页 |
3.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第49页 |
3.2.3 主要实验试剂 | 第49-50页 |
3.2.4 试剂配制和准备 | 第50页 |
3.3 实验方法 | 第50-53页 |
3.3.1 NGF对卵巢癌细胞生长、存活、凋亡的影响 | 第50-51页 |
3.3.2 NGF对卵巢癌细胞增殖的影响 | 第51页 |
3.3.3 Quantitative Real-Time PCR检测NGF对卵巢癌细胞生长、存活、增殖、生长节律、凋亡相关基因表达的影响 | 第51-52页 |
3.3.4 Western blot检测NGF对卵巢癌细胞存活、增殖、生长节律、凋亡相关蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
3.4 实验结果 | 第53-85页 |
3.4.1 NGF对卵巢癌细胞生长、存活、凋亡的影响 | 第53-54页 |
3.4.2 NGF及NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞增殖能力的影响 | 第54-55页 |
3.4.3 NGF对卵巢癌细胞中存活相关基因表达的影响 | 第55-60页 |
3.4.4 NGF对卵巢癌细胞中增殖相关基因表达的影响 | 第60-66页 |
3.4.5 NGF对卵巢癌细胞周期、生长节律相关基因mRNA和蛋白表达的影响 | 第66-75页 |
3.4.6 NGF对卵巢癌细胞凋亡相关基因mRNA和蛋白表达的影响 | 第75-85页 |
3.5 讨论与分析 | 第85-94页 |
3.5.1 NGF对卵巢癌细胞存活、生长的影响 | 第85-88页 |
3.5.2 NGF对卵巢癌细胞周期、生长节律的影响 | 第88-89页 |
3.5.3 NGF对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响 | 第89-94页 |
3.6 本章小结 | 第94-95页 |
4 NGF对卵巢癌细胞粘附能力的影响及分子机制 | 第95-107页 |
4.1 引言 | 第95页 |
4.2 实验材料 | 第95-96页 |
4.2.1 人卵巢癌细胞系 | 第95-96页 |
4.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第96页 |
4.2.3 主要实验试剂 | 第96页 |
4.2.4 试剂配制和准备 | 第96页 |
4.3 实验方法 | 第96-97页 |
4.3.1 NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞粘附能力的影响 | 第96页 |
4.3.2 Real-Time PCR法检测NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞紧密连接蛋白mRNA的表达的影响 | 第96-97页 |
4.3.3 Western blot法检测NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞紧密连接相关蛋白表达的影响 | 第97页 |
4.4 实验结果 | 第97-104页 |
4.4.1 NGF、NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞粘附能力的影响 | 第97-98页 |
4.4.2 NGF、NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞紧密连接蛋白表达的影响 | 第98-104页 |
4.5 讨论与分析 | 第104-105页 |
4.6 本章小结 | 第105-107页 |
5 NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响及作用机制 | 第107-137页 |
5.1 引言 | 第107页 |
5.2 实验材料 | 第107-108页 |
5.2.1 人卵巢癌细胞系 | 第107页 |
5.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第107-108页 |
5.2.3 主要实验试剂 | 第108页 |
5.2.4 试剂配制和准备 | 第108页 |
5.3 实验方法 | 第108-115页 |
5.3.1 Real-Time PCR法检测NGF对卵巢癌细胞WNT/β-catenin信号通路靶基因mRNA的表达的影响 | 第108-110页 |
5.3.2 Western blot法检测NGF对卵巢癌细胞WNT/β-catenin信号通路靶基因蛋白表达的影响 | 第110页 |
5.3.3 Transwell法检测NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞迁移能力的影响 | 第110-111页 |
5.3.4 用微流控芯片模型对细胞进行三维培养,考察NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响 | 第111-114页 |
5.3.5 数据统计分析 | 第114-115页 |
5.4 实验结果 | 第115-133页 |
5.4.1 NGF通过WNT/β-catenin信号通路调节卵巢癌细胞的迁移 | 第115-127页 |
5.4.2 二维(two dimensional condition, 2D)条件下NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响 | 第127-129页 |
5.4.3 三维(three dimensional condition, 3D)条件下NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响 | 第129-133页 |
5.5 分析与讨论 | 第133-136页 |
5.6 本章小结 | 第136-137页 |
6 结论与展望 | 第137-139页 |
6.1 主要结论 | 第137-138页 |
6.2 后续工作展望 | 第138-139页 |
致谢 | 第139-141页 |
参考文献 | 第141-177页 |
附录 | 第177页 |
A 作者在攻读博士期间发表的论文 | 第177页 |
B 作者在攻读博士期间参加科研项目情况 | 第177页 |
C 作者在攻读博士期间取得的科研成果 | 第177页 |