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神经生长因子对上皮性卵巢癌细胞生物学行为的影响及相关机制研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-8页
1 绪论第15-27页
    1.1 问题的提出与研究意义第15-18页
        1.1.1 问题的提出第15-18页
        1.1.2 研究意义第18页
    1.2 国内外研究现状第18-24页
        1.2.1 NGF/NGFRs的结构和功能概述第18-20页
        1.2.2 NGF对肿瘤细胞存活、生长、凋亡的影响第20-22页
        1.2.3 NGF对肿瘤细胞增殖、分化的影响第22页
        1.2.4 NGF对肿瘤转移的影响第22-24页
    1.3 研究目的、研究内容及创新性第24-27页
        1.3.1 课题研究目的第24-25页
        1.3.2 课题研究内容第25页
        1.3.3 课题研究的技术路线第25页
        1.3.4 课题的特色及创新点第25-27页
2 内源性的NGF及NGFRs在上皮性卵巢癌细胞中的表达第27-49页
    2.1 引言第27-28页
    2.2 实验材料第28-32页
        2.2.1 人卵巢癌细胞系第28页
        2.2.2 主要实验仪器及耗材第28-29页
        2.2.3 主要实验试剂第29-30页
        2.2.4 主要试剂的准备和配制第30-32页
    2.3 实验方法第32-42页
        2.3.1 Quantitative Real-Time PCR法检测常规培养条件下4种上皮性卵巢癌细胞系中NGF/NGFRs mRNA的表达情况第32-37页
        2.3.2 Western blot法检测卵巢癌细胞中NGF,TrkA和P75蛋白的表达第37-42页
        2.3.3 统计分析第42页
    2.4 实验结果第42-46页
        2.4.1 卵巢癌细胞系中NGF、TrkA受体和P75受体mRNA的表达第42-44页
        2.4.2 卵巢癌细胞系中NGF、TrkA和P75蛋白的表达第44-46页
    2.5 分析与讨论第46-47页
    2.6 本章小结第47-49页
3 NGF对卵巢癌细胞存活、生长、生长节律、增殖、凋亡的影响及分子机制第49-95页
    3.1 引言第49页
    3.2 实验材料第49-50页
        3.2.1 人卵巢癌细胞系第49页
        3.2.2 主要实验仪器及耗材第49页
        3.2.3 主要实验试剂第49-50页
        3.2.4 试剂配制和准备第50页
    3.3 实验方法第50-53页
        3.3.1 NGF对卵巢癌细胞生长、存活、凋亡的影响第50-51页
        3.3.2 NGF对卵巢癌细胞增殖的影响第51页
        3.3.3 Quantitative Real-Time PCR检测NGF对卵巢癌细胞生长、存活、增殖、生长节律、凋亡相关基因表达的影响第51-52页
        3.3.4 Western blot检测NGF对卵巢癌细胞存活、增殖、生长节律、凋亡相关蛋白表达的影响第52-53页
    3.4 实验结果第53-85页
        3.4.1 NGF对卵巢癌细胞生长、存活、凋亡的影响第53-54页
        3.4.2 NGF及NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞增殖能力的影响第54-55页
        3.4.3 NGF对卵巢癌细胞中存活相关基因表达的影响第55-60页
        3.4.4 NGF对卵巢癌细胞中增殖相关基因表达的影响第60-66页
        3.4.5 NGF对卵巢癌细胞周期、生长节律相关基因mRNA和蛋白表达的影响第66-75页
        3.4.6 NGF对卵巢癌细胞凋亡相关基因mRNA和蛋白表达的影响第75-85页
    3.5 讨论与分析第85-94页
        3.5.1 NGF对卵巢癌细胞存活、生长的影响第85-88页
        3.5.2 NGF对卵巢癌细胞周期、生长节律的影响第88-89页
        3.5.3 NGF对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响第89-94页
    3.6 本章小结第94-95页
4 NGF对卵巢癌细胞粘附能力的影响及分子机制第95-107页
    4.1 引言第95页
    4.2 实验材料第95-96页
        4.2.1 人卵巢癌细胞系第95-96页
        4.2.2 主要实验仪器及耗材第96页
        4.2.3 主要实验试剂第96页
        4.2.4 试剂配制和准备第96页
    4.3 实验方法第96-97页
        4.3.1 NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞粘附能力的影响第96页
        4.3.2 Real-Time PCR法检测NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞紧密连接蛋白mRNA的表达的影响第96-97页
        4.3.3 Western blot法检测NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞紧密连接相关蛋白表达的影响第97页
    4.4 实验结果第97-104页
        4.4.1 NGF、NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞粘附能力的影响第97-98页
        4.4.2 NGF、NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞紧密连接蛋白表达的影响第98-104页
    4.5 讨论与分析第104-105页
    4.6 本章小结第105-107页
5 NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响及作用机制第107-137页
    5.1 引言第107页
    5.2 实验材料第107-108页
        5.2.1 人卵巢癌细胞系第107页
        5.2.2 主要实验仪器及耗材第107-108页
        5.2.3 主要实验试剂第108页
        5.2.4 试剂配制和准备第108页
    5.3 实验方法第108-115页
        5.3.1 Real-Time PCR法检测NGF对卵巢癌细胞WNT/β-catenin信号通路靶基因mRNA的表达的影响第108-110页
        5.3.2 Western blot法检测NGF对卵巢癌细胞WNT/β-catenin信号通路靶基因蛋白表达的影响第110页
        5.3.3 Transwell法检测NGF及NGF/NGFRs相关抑制剂对卵巢癌细胞迁移能力的影响第110-111页
        5.3.4 用微流控芯片模型对细胞进行三维培养,考察NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响第111-114页
        5.3.5 数据统计分析第114-115页
    5.4 实验结果第115-133页
        5.4.1 NGF通过WNT/β-catenin信号通路调节卵巢癌细胞的迁移第115-127页
        5.4.2 二维(two dimensional condition, 2D)条件下NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响第127-129页
        5.4.3 三维(three dimensional condition, 3D)条件下NGF对卵巢癌细胞迁移能力的影响第129-133页
    5.5 分析与讨论第133-136页
    5.6 本章小结第136-137页
6 结论与展望第137-139页
    6.1 主要结论第137-138页
    6.2 后续工作展望第138-139页
致谢第139-141页
参考文献第141-177页
附录第177页
    A 作者在攻读博士期间发表的论文第177页
    B 作者在攻读博士期间参加科研项目情况第177页
    C 作者在攻读博士期间取得的科研成果第177页

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