摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
1 前言 | 第14-18页 |
2 实验材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 线虫材料 | 第18页 |
2.1.2 细菌菌株 | 第18页 |
2.1.3 各种酶、生化试剂及试剂盒 | 第18页 |
2.1.4 质粒、引物合成与DNA测序 | 第18-19页 |
2.1.5 培养基及试剂 | 第19-20页 |
2.1.6 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-30页 |
2.2.1 秀丽线虫的培养及保存方法 | 第21-22页 |
2.2.2 遗传学部分的相关操作 | 第22-24页 |
2.2.3 RNAi实验 | 第24-27页 |
2.2.4 线虫寿命的相关实验 | 第27页 |
2.2.5 线虫荧光标记蛋白表达量的统计方法 | 第27页 |
2.2.6 RNA的提取、反转、定量分析 | 第27-29页 |
2.2.7 统计学处理 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-50页 |
3.1 dve-1 及dve-1::gfp简介 | 第30-32页 |
3.1.1 dve-1 基因简介 | 第30-31页 |
3.1.2 dve-1::gfp线虫株系 | 第31-32页 |
3.2 dve-1 RNAi的相关表型 | 第32-37页 |
3.2.1 构建dve-1 RNAi的质粒 | 第32-34页 |
3.2.2 dve-1 RNAi 对寿命及产卵量的影响 | 第34-37页 |
3.3 dve-1(tm4803)的相关表型 | 第37-41页 |
3.3.1 dve-1(tm4803)的寿命及产卵量 | 第37-39页 |
3.3.2 检测叠加效应 | 第39-40页 |
3.3.3 dve-1(tm4803)的其他表型 | 第40-41页 |
3.4.dve-1 参与寿命的调控机制可能平行于IIS经典调控通路 | 第41-43页 |
3.5 dve-1 RNAi抑制线粒体UPR反应跟寿命没有直接关系 | 第43-47页 |
3.5.1 dve-1 RNAi可抑制线粒体的UPR反应 | 第43-45页 |
3.5.2 dve-1(tm4803)对线粒体的UPR反应没有明显的抑制作用 | 第45-47页 |
3.6 氧化应激反应中编码超氧化物歧化酶的sod-1、sod-2、sod-3 及编码过氧化氢酶的ctl-1、ctl-3 在dve-1(tm4803)突变体中的表达量降低 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
4.1 dve-1(tm4803)和dve-1 RNAi寿命明显变短 | 第50页 |
4.2 dve-1 参与寿命的调控机制与经典IIS通路平行 | 第50-51页 |
4.3 dve-1 调控寿命与其抑制线粒体的UPR反应并没有直接的相关性 | 第51-52页 |
4.4 氧化应激反应中编码超氧化物歧化酶的sod-1、sod-2、sod-3 及编码过氧化氢酶的ctl-1、ctl-3 在dve-1(tm4803)突变体中的表达量降低 | 第52-53页 |
4.5 未来可能的工作 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-56页 |
6 参考文献 | 第56-60页 |
综述 | 第60-72页 |
参考文献 | 第69-72页 |
致谢 | 第72-73页 |