| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 第一部分：铜绿假单胞菌AprA蛋白及其抑制剂AprI蛋白和底物蛋白Flagellin的表达及功能的初步探究 | 第18-30页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 1.1.1 菌株与质粒表达 | 第18页 |
| 1.1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第20-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 1.2.1 pET-28a-AprA，pET-28a-Apr I和pET-28a-Flagellin重组质粒的构建 | 第21-23页 |
| 1.2.2 AprA裂解鞭毛蛋白Flagellin | 第23页 |
| 1.3 实验结果 | 第23-28页 |
| 1.3.1 AprA重组蛋白的表达 | 第23-24页 |
| 1.3.2 AprI和Flagellin重组蛋白的表达 | 第24-26页 |
| 1.3.3 AprA裂解Flagellin | 第26-27页 |
| 1.3.4 AprI抑制AprA裂解Flagellin | 第27-28页 |
| 1.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第二部分：AprA特异性抗体的制备和功能初步研究 | 第30-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.1.1 试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第30页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-35页 |
| 2.2.1 anti-AprA血清效价的评价和AprA与anti-AprA的结合 | 第30-31页 |
| 2.2.2 噬菌体抗体库筛选YG4抗体 | 第31-32页 |
| 2.2.3 Phage-ELISA筛选阳性克隆 | 第32-33页 |
| 2.2.4 PIg H和PIg L重组质粒的构建 | 第33页 |
| 2.2.5 特异性抗体YG4的表达及纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.6 梯度稀释法检测全人源抗体YG4亲和力 | 第34-35页 |
| 2.2.7 AprA蛋白补体经典通路影响（CH50实验） | 第35页 |
| 2.2.8 anti-AprA与YG4功能的检测（CH50实验） | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-40页 |
| 2.3.1 利用ELISA检测anti-AprA的效价 | 第35-36页 |
| 2.3.2 噬菌体抗体库的亲和淘选 | 第36页 |
| 2.3.3 利用ELISA筛选与AprA特异结合的阳性噬菌体克隆 | 第36-37页 |
| 2.3.4 PIg H-YG4VH和PIg L-YG4VL重组质粒的构建 | 第37页 |
| 2.3.5 特异性抗体YG4的表达及纯化 | 第37-38页 |
| 2.3.6 利用ELISA检测特异性抗体YG4的亲和力 | 第38-39页 |
| 2.3.7 AprA蛋白补体经典通路影响（CH50实验） | 第39页 |
| 2.3.8 anti-AprA与YG4功能的初步研究 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第三部分：AprA通过降解瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)抑制NETS的形成 | 第42-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.1 试剂抗体 | 第42页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第42-43页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 诱导并检测NETs的形成 | 第43-44页 |
| 3.2.2 激光扫描共聚焦显微镜检测AprA裂解NETs释放的Cit-H3 | 第44页 |
| 3.2.3 激光扫描共聚焦显微镜检测AprA裂解NETs释放的其他蛋白的情况 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-48页 |
| 3.3.1 激光扫描共聚焦显微镜检测NETs的形成 | 第45-46页 |
| 3.3.2 激光扫描共聚焦显微镜检测AprA裂解Cit-H3 | 第46-47页 |
| 3.3.3 激光扫描共聚焦显微镜检测AprA与NETs的其他组成蛋白的相互作用 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 综述 铜绿假单胞菌分泌的致病毒力因子概况 | 第55-64页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间发表的学位论文 | 第66-67页 |
