| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略表 | 第7-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 口蹄疫 | 第12-16页 |
| 1.1.1 概述 | 第12-15页 |
| 1.1.2 疫苗 | 第15-16页 |
| 1.2 干扰素 | 第16-19页 |
| 1.2.1 概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 干扰素的信号通路 | 第17页 |
| 1.2.3 干扰素的抗病毒作用 | 第17-18页 |
| 1.2.4 小RNA病毒调节干扰素通路的信号转导作用 | 第18-19页 |
| 1.3 脊髓灰质炎病毒受体（PVR） | 第19-20页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2.2 真核重组质粒的构建 | 第25-30页 |
| 2.2.2.1 设计引物 | 第25页 |
| 2.2.2.2 细胞RNA的提取及反转录 | 第25-26页 |
| 2.2.2.3 目的基因VP0的扩增 | 第26页 |
| 2.2.2.4 VP0片段的回收和纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.2.5 目的片段与载体pCAGGs的酶切和连接 | 第27-28页 |
| 2.2.2.6 Trans5α 感受态转化 | 第28页 |
| 2.2.2.7 重组质粒的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2.8 重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| 2.2.2.9 重组质粒的大量提取 | 第29-30页 |
| 2.2.3 质粒的转染 | 第30-31页 |
| 2.2.4 间接免疫荧光鉴定VP0蛋白在细胞中的表达与定位 | 第31页 |
| 2.2.5 Western blot检测FMDV VP0蛋白在细胞中的表达情况 | 第31-32页 |
| 2.2.6 RT- PCR检测VP0蛋白对Ⅰ型干扰素信号通路效应分子转录水平的影响 | 第32-34页 |
| 2.2.6.1 质粒的转染 | 第32-33页 |
| 2.2.6.2 细胞RNA提取 | 第33页 |
| 2.2.6.3 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 2.2.7 双荧光素酶报告基因检测VP0蛋白对IFN-β 产生信号通路的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.7.1 重组质粒pCAGGs-VP0转染质粒的剂量依赖性实验 | 第34-35页 |
| 2.2.7.2 重组质粒pCAGGs-VP0对Ⅰ型干扰素信号通路分子的影响 | 第35页 |
| 2.2.8 免疫共沉淀实验验证VP0蛋白与IRF3蛋白的相互作用 | 第35页 |
| 2.2.9 间接免疫荧光鉴定VP0蛋白与IRF3蛋白在细胞中的共定位 | 第35-36页 |
| 2.2.10 实时荧光定量检测PVR对FMDV复制以及干扰素效应因子转录的影响 | 第36页 |
| 2.2.11 双荧光素酶报告基因检测PVR对Ⅰ型干扰素产生的信号通路的影响 | 第36页 |
| 2.2.12 免疫共沉淀鉴定PVR蛋白与IRF3蛋白的相互作用 | 第36页 |
| 2.2.13 免疫共沉淀验证VP0、PVR与IRF3三者间的相互作用 | 第36页 |
| 2.2.14 激光共聚焦实验验证PVR与IRF3在细胞中的共定位 | 第36页 |
| 2.3 数据分析 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-53页 |
| 3.1 pCAGGs-VP0重组表达载体的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2 间接免疫荧光法对VP0蛋白的表达定位验证 | 第38页 |
| 3.3 VP0蛋白在HEK-293T细胞中的表达 | 第38-39页 |
| 3.4 VP0蛋白对FMDV复制的影响 | 第39-40页 |
| 3.5 VP0蛋白抑制Ⅰ型干扰素通路基因及其下游刺激基因（IFN-stimulated genes，ISGs）的转录 | 第40-41页 |
| 3.6 VP0蛋白抑制Ⅰ型干扰素信号通路的活化 | 第41-43页 |
| 3.7 VP0蛋白结合RLRs通路中的IRF3蛋白 | 第43-44页 |
| 3.8 间接免疫荧光检测VP0蛋白与内外源IRF3蛋白在细胞中的共定位 | 第44-46页 |
| 3.9 PVR蛋白对FMDV复制的抑制作用 | 第46-47页 |
| 3.10 PVR蛋白对SeV介导的Ⅰ型干扰素通路基因及其下游刺激基因（IFN-stimulatedgenes，ISGs）转录水平的促进作用 | 第47-48页 |
| 3.11 PVR蛋白对Ⅰ型干扰素信号通路活化的促进作用 | 第48-51页 |
| 3.12 PVR蛋白与IRF3蛋白的相互作用 | 第51页 |
| 3.13 Co-IP验证VP0、PVR与IRF3三者间的相互作用 | 第51-52页 |
| 3.14 间接免疫荧光试验鉴定PVR蛋白与IRF3蛋白在细胞中的共定位 | 第52-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 在读期间科研成果和参与课题 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
