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小GTP酶Rac1对气道上皮细胞凋亡和吞噬作用的影响

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
英文缩写索引第12-13页
第一章 绪论第13-26页
    1.1 呼吸道上皮细胞第14-17页
        1.1.1 呼吸道上皮细胞的功能与特征第14页
        1.1.2 哮喘对呼吸道上皮细胞的影响第14-17页
    1.2 小GTP酶Rac1第17-19页
        1.2.1 Rac1的特性第17-18页
        1.2.2 Rac1和支气管哮喘第18-19页
        1.2.3 Rac1在凋亡中的作用第19页
    1.3 吞噬作用第19-21页
        1.3.1 吞噬作用的分类第19-20页
        1.3.2 Rac1与非专职吞噬作用第20-21页
    1.4 本实验研究目的、方法、实验设计方案及意义第21-26页
        1.4.1 实验研究目的第21-22页
        1.4.2 方法第22页
        1.4.3 实验设计第22-24页
            1.4.3.1 实验研究思路第22页
            1.4.3.2 技术路线第22-24页
        1.4.4 实验研究意义第24-26页
第二章 姜黄素诱导A549细胞的凋亡及Rac1抑制剂对其凋亡的影响第26-36页
    2.1 材料和仪器第26-27页
        2.1.1 细胞第26页
        2.1.2 实验仪器第26-27页
        2.1.3 实验材料与试剂第27页
    2.2 实验方法第27-30页
        2.2.1 A549细胞的培养第27-28页
        2.2.2 DMEM 培养基配置方法第28页
        2.2.3 细胞的复苏,消化和冻存第28-29页
        2.2.4 姜黄素诱导凋亡实验第29页
        2.2.5 Hoechst核染色与流式细胞术检测凋亡第29-30页
        2.2.6 流式法检测Rac1抑制剂对姜黄素诱导凋亡影响第30页
        2.2.7 统计学相关分析第30页
    2.3 结果第30-34页
        2.3.1 姜黄素可以诱导A549细胞发生凋亡第30-31页
        2.3.2 选定适宜诱导时间和姜黄素浓度诱导凋亡第31-32页
        2.3.3 Rac1抑制剂NSC23766可促进姜黄素诱导的A549细胞凋亡第32-34页
    2.4 讨论第34-36页
第三章 气道上皮细胞A549对同系凋亡细胞的吞噬作用第36-45页
    3.1 实验仪器和材料第36-38页
        3.1.1 实验仪器第36-37页
        3.1.2 试验相关材料和试剂第37页
        3.1.3 实验溶液配制第37-38页
    3.2 实验方法第38-41页
        3.2.1 A549 细胞的培养,冻存与复苏与 2.2.3 中所述操作标准一致第38页
        3.2.2 CFSE染色方法第38页
        3.2.3 碘化丙碇(PI)染色步骤第38-39页
        3.2.4 A549细胞共培养体系的建立第39页
        3.2.5 IL-33 与Rac1总RNA的提取第39页
        3.2.6 将提取的IL-33,Rac1的RNA逆转录成cDNA第39-40页
        3.2.7 引物的设计与合成第40页
        3.2.8 荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测IL-33,Rac1m RNA水平第40-41页
        3.2.9 统计学分析第41页
    3.3 实验结果第41-43页
        3.3.1 A549细胞对于凋亡细胞的吞噬能力第41-43页
        3.3.2 A549 细胞吞噬凋亡细胞时 IL-33,Rac1 的表达水平第43页
    3.4 讨论第43-45页
第四章 小GTP酶Rac1参与调控A549细胞的吞噬作用第45-54页
    4.1 实验所材料与试剂第45-47页
        4.1.1 实验仪器第45-46页
        4.1.2 实验材料与试剂第46页
        4.1.3 实验所需溶液的配制第46-47页
    4.2 实验方法第47-48页
        4.2.1 A549 细胞的培养,冻存与复苏与 2.2.3 中所述操作标准一致第47页
        4.2.2 CFSE染色方法第47页
        4.2.3 A549细胞共培养体系的建立第47页
        4.2.4 IL-33/与Rac1总RNA的提取、逆转录及实时荧光定量PCR检 测IL-33、Rac1表达水平第47-48页
        4.2.5 Rac1 siRNA的转录程序第48页
        4.2.6 统计学分析第48页
    4.3 实验结果第48-53页
        4.3.1 Rac1 siRNA使A549细胞表达下调第48-49页
        4.3.2 转入Rac1 siRNA后A549的吞噬能力降低第49-50页
        4.3.3 加入Rac1抑制剂后A549的吞噬能力降低第50-51页
        4.3.4 加入Rac1抑制剂后A549细胞吞噬凋亡细胞时IL-33,Rac1的基因表达水平变化第51-53页
    4.4 讨论第53-54页
第五章 主要结论与展望第54-56页
    5.1 主要结论第54页
    5.2 展望第54-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-63页
攻读硕士学位期间发表和待发表的论文第63页

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