| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第1章 序言 | 第14-32页 |
| 1.1 中药活性成分分离及筛选的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2 中药活性成分分离及筛选中的方法和技术 | 第15-21页 |
| 1.2.1 功能基因组学及生物芯片技术 | 第15页 |
| 1.2.2 基于分子烙印的筛选方法 | 第15-16页 |
| 1.2.3 结合蛋白组学的前沿色谱筛选技术 | 第16-17页 |
| 1.2.4 基于肠细菌生物的药物代谢研究及筛选 | 第17-18页 |
| 1.2.5 细胞层次的ADME/TOX一体化药物筛选 | 第18-21页 |
| 1.2.6 其他技术 | 第21页 |
| 1.3 中药成分检测的主要方法 | 第21-27页 |
| 1.3.1 色谱联用方法 | 第22-24页 |
| 1.3.2 质谱技术 | 第24-27页 |
| 1.3.3 其他相关方法和技术 | 第27页 |
| 1.4 抗血管生成的肿瘤治疗方法及血管生成抑制剂的筛选研究 | 第27-30页 |
| 1.4.1 肿瘤治疗的一个重要药物靶标-新生血管系统 | 第27-28页 |
| 1.4.2 新生血管抑制剂(TAI)的筛选研究进展 | 第28-30页 |
| 1.5 论文研究的目的和意义 | 第30页 |
| 1.6 论文研究的内容 | 第30-32页 |
| 第2章 用于TAI药物筛选的HUVECM的生物活性研究 | 第32-46页 |
| 2.1 TAI筛选的策略和模型 | 第32-33页 |
| 2.2 细胞膜受体及其在药物筛选中的作用 | 第33-35页 |
| 2.3 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的制备 | 第35-38页 |
| 2.3.1 试剂和仪器 | 第36页 |
| 2.3.2 HUVEC的复苏、培养、传代和保存 | 第36-37页 |
| 2.3.3 HUVEC的的鉴定 | 第37-38页 |
| 2.4 HUVEC细胞膜受体活性变化规律的研究 | 第38-44页 |
| 2.4.1 仪器与试剂 | 第39页 |
| 2.4.2 实验原理及设计 | 第39-41页 |
| 2.4.3 实验步骤 | 第41页 |
| 2.4.4 结果与讨论 | 第41-42页 |
| 2.4.5 细胞膜酶活性测定方法的特性 | 第42-43页 |
| 2.4.6 HUVEC细胞膜ATP酶生物活性随时间变化的规律 | 第43-44页 |
| 2.5 结论 | 第44-46页 |
| 第3章 HUVECM结合GCMS对中药川芎挥发性成分的筛选研究 | 第46-60页 |
| 3.1 前言 | 第46-47页 |
| 3.2 筛选思路设计 | 第47-49页 |
| 3.3 实验 | 第49-51页 |
| 3.3.1 仪器、试剂与材料 | 第49-50页 |
| 3.3.2 川芎挥发油的提取 | 第50页 |
| 3.3.3 HUVECM和心肌细胞膜的制备 | 第50页 |
| 3.3.4 川芎挥发性组分与细胞膜的相互作用 | 第50页 |
| 3.3.5 气质联用条件 | 第50-51页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第51-54页 |
| 3.4.1 挥发性成分的提取 | 第51页 |
| 3.4.2 药物与细胞膜作用主要实验条件的选择 | 第51页 |
| 3.4.3 方法的验证 | 第51-54页 |
| 3.5 活性HUVECM结合GCMS筛选方法对川芎挥发油的应用 | 第54-58页 |
| 3.6 结论 | 第58-60页 |
| 第4章 基于HUVEC-CMCSP的LC-GCMS筛选模型对中药川芎醇提液的分析 | 第60-78页 |
| 4.1 引言 | 第60-61页 |
| 4.2 筛选方案 | 第61-63页 |
| 4.3 实验部分 | 第63-66页 |
| 4.3.1 仪器、试剂及材料 | 第63-64页 |
| 4.3.2 川芎醇提液的制备 | 第64页 |
| 4.3.3 HUVEC-CMCSP填料的制备及其相关特性研究 | 第64页 |
| 4.3.4 HUVEC-CMCSP色谱柱的制备 | 第64页 |
| 4.3.5 基于CMCSP的LC在线筛选流路设计 | 第64-65页 |
| 4.3.6 色谱条件 | 第65-66页 |
| 4.3.7 潜在活性组分的发现和鉴定 | 第66页 |
| 4.3.8 组分之间协同作用试验 | 第66页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第66-76页 |
| 4.4.1 中药川芎醇提液的制备 | 第67页 |
| 4.4.2 活性CMCSP色谱住的制备及其相关特性研究 | 第67-69页 |
| 4.4.3 基于HUVEC-CMCSP的LC筛选设计的相关条件的选择 | 第69-70页 |
| 4.4.4 潜在活性组分的发现和鉴定 | 第70-73页 |
| 4.4.5 鉴定的活性组分之间协同作用的探讨 | 第73-76页 |
| 4.4.6 鉴定的活性组分的相关药理研究报道 | 第76页 |
| 4.5 结论 | 第76-77页 |
| 4.6 启示 | 第77-78页 |
| 第5章 金牛七和铁牛七醇提物中高级游离脂肪酸分析 | 第78-88页 |
| 5.1 引言 | 第78页 |
| 5.2 实验方案 | 第78-79页 |
| 5.3 实验部分 | 第79-81页 |
| 5.3.1 仪器、试剂及材料 | 第79-80页 |
| 5.3.2 金牛七和铁牛七醇提物的制备 | 第80页 |
| 5.3.3 标准脂肪酸溶液的甲酯化 | 第80页 |
| 5.3.4 脂肪酸定量方法的建立 | 第80页 |
| 5.3.5 金牛七、铁牛七中脂肪酸的鉴定和定量测定 | 第80-81页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第81-87页 |
| 5.4.1 提取方法的选择 | 第81页 |
| 5.4.2 脂肪酸酯化方法的选择 | 第81页 |
| 5.4.3 金牛七、铁牛七醇提物中脂肪酸的鉴定 | 第81-83页 |
| 5.4.4 脂肪酸的定量方法的方法特性 | 第83-85页 |
| 5.4.5 金牛七、铁牛七醇提物中脂肪酸含量的测定 | 第85-87页 |
| 5.5 结论 | 第87-88页 |
| 第6章 HUVECM结合GCMS对铁牛七和金牛七醇提物的筛选 | 第88-100页 |
| 6.1 引言 | 第88页 |
| 6.2 筛选方案 | 第88页 |
| 6.3 实验部分 | 第88-89页 |
| 6.3.1 试剂与仪器 | 第88-89页 |
| 6.3.2 HUVEC的培养和细胞膜的制备 | 第89页 |
| 6.3.3 金牛七和铁牛七的醇提物与细胞膜的相互作用 | 第89页 |
| 6.3.4 气质联用条件 | 第89页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第89-96页 |
| 6.4.1 主要实验条件的选择 | 第89页 |
| 6.4.2 金牛七和铁牛七的醇提物与细胞膜特异性作用组分鉴定 | 第89-96页 |
| 6.5 结论 | 第96-100页 |
| 第7章 基于HUVEC-CMCSP的LC-MS~2筛选模型对中药金牛七和铁牛七醇提物的分析 | 第100-120页 |
| 7.1 引言 | 第100页 |
| 7.2 实验方案 | 第100-102页 |
| 7.3 实验部分 | 第102-105页 |
| 7.3.1 仪器、试剂及材料 | 第102-103页 |
| 7.3.2 金牛七和铁牛七醇提物水溶液的制备 | 第103页 |
| 7.3.3 HUVEC-CMCSP的制备及其相关特性研究 | 第103页 |
| 7.3.4 基于HUVEC-CMCSP的LC-MS的在线筛选设计 | 第103-104页 |
| 7.3.5 色谱及质谱条件 | 第104-105页 |
| 7.3.6 筛选方法的验证和CMCSP微型色谱柱重复性检验 | 第105页 |
| 7.3.7 潜在活性组分的发现和鉴定 | 第105页 |
| 7.4 结果与讨论 | 第105-118页 |
| 7.4.1 中药金牛七和铁牛七醇提液的制备 | 第105-106页 |
| 7.4.2 HUVEC-CMCSP活性色谱住的制备及其相关特性研究 | 第106页 |
| 7.4.3 基于HUVEC-CMCSP的LC-MS~2的在线筛选设计的条件选择 | 第106-107页 |
| 7.4.4 筛选方法的验证 | 第107-108页 |
| 7.4.5 潜在活性组分的发现和鉴定 | 第108-118页 |
| 7.4.5.1 金牛七醇提液水溶性成分分析 | 第108-116页 |
| 7.4.5.2 铁牛七醇提液水溶性成分分析 | 第116-118页 |
| 7.5 讨论 | 第118页 |
| 7.6 结论和启示 | 第118-120页 |
| 结论 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
| 攻读博士学位期间科研成果 | 第142-143页 |
