| 提要 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第1章 绪论 | 第17-30页 |
| 1.1 真菌免疫调节蛋白家族 | 第17-24页 |
| 1.1.1 家族成员基因克隆表达 | 第17-18页 |
| 1.1.2 真菌免疫调节蛋白活性研究 | 第18-22页 |
| 1.1.3 灵芝免疫调节蛋白(Lz-8)的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.2 白细胞减少症及其治疗现状 | 第24页 |
| 1.3 几种治疗白细胞减少症药物国内外研究现状 | 第24-28页 |
| 1.3.1 中药类药物 | 第24-26页 |
| 1.3.2 多糖类药物 | 第26-27页 |
| 1.3.3 CSF(Colony-stimulating factor集落刺激因子) | 第27-28页 |
| 1.4 小结 | 第28-30页 |
| 第2章 灵芝免疫调节蛋白(Lz-8)的重组表达和纯化方法及鉴定 | 第30-45页 |
| 2.1 仪器和试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.1 仪器 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂 | 第30-31页 |
| 2.2 构建表达工程菌 | 第31-37页 |
| 2.2.1 全合成Lz-8蛋白的基因序列 | 第31页 |
| 2.2.2 通过PCR的方法得到rLz-8基因 | 第31-32页 |
| 2.2.3 对目的基因进行测序 | 第32页 |
| 2.2.4 pPinka-HC重组质粒的构建与转化 | 第32-33页 |
| 2.2.5 分泌表达rLz-8的重组毕赤酵母菌的构建与筛选 | 第33-34页 |
| 2.2.6 目的片段与质粒的连接 | 第34-36页 |
| 2.2.7 制备酵母感受态 | 第36页 |
| 2.2.8 线性化重组质粒的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.9 筛选转化克隆子 | 第37页 |
| 2.3 重组rLz-8毕赤酵母工程菌的表达 | 第37-40页 |
| 2.3.1 主要试剂和溶液 | 第37-39页 |
| 2.3.2 菌体的生长曲线 | 第39页 |
| 2.3.3 摇瓶小量表达目的蛋白阶段 | 第39-40页 |
| 2.4 rLz-8纯化工艺 | 第40-43页 |
| 2.4.1 试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 2.4.2 样品的粗分离 | 第41页 |
| 2.4.3 精细纯化工艺 | 第41-43页 |
| 2.5 讨论 | 第43-44页 |
| 2.6 小结 | 第44-45页 |
| 第3章 rlz-8治疗白细胞减少症的药效学研究 | 第45-60页 |
| 3.1 仪器与试剂 | 第45页 |
| 3.1.1 仪器 | 第45页 |
| 3.1.2 试剂 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 rLz-8治疗小鼠白细胞减少症的药效学实验 | 第45-46页 |
| 3.2.2 rLz-8对γ辐射所致小鼠白细胞减少症的预防性实验 | 第46页 |
| 3.2.3 rLz-8对γ辐射所致白细胞减少症的治疗实验 | 第46-47页 |
| 3.2.4 中和抗体对rLz-8治疗小鼠白细胞减少症药效学的影响 | 第47页 |
| 3.2.5 rlz-8对持续给予化疗药物小鼠白细胞数及死亡率的影响 | 第47页 |
| 3.2.6 rLz-8治疗大鼠白细胞减少症药效学实验 | 第47-48页 |
| 3.2.7 rLz-8预防犬白细胞减少症的药效学试验 | 第48页 |
| 3.2.8 rLz-8治疗犬白细胞减少症的药效学试验 | 第48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-56页 |
| 3.3.1 rLz-8治疗小鼠白细胞减少症的药效学实验结果 | 第48-49页 |
| 3.3.2 rLz-8对γ辐射所致小鼠白细胞减少症的预防性实验结果 | 第49-50页 |
| 3.3.3 rLz-8对γ辐射所致白细胞减少症的治疗实验结果 | 第50-51页 |
| 3.3.4 中和抗体对rLz-8治疗小鼠白细胞减少症药效学的影响结果 | 第51-52页 |
| 3.3.5 rlz-8对持续给予化疗药物小鼠白细胞数及死亡率的影响结果 | 第52-53页 |
| 3.3.6 rLz-8治疗大鼠白细胞减少症药效学实验结果 | 第53页 |
| 3.3.7 rLz-8预防犬白细胞减少症的药效学试验结果 | 第53-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-59页 |
| 3.4.1 rlz-8治疗小鼠白细胞减少症的药效学实验 | 第56-57页 |
| 3.4.2 rLz-8对γ辐射所致小鼠白细胞减少症的预防和治疗性实验 | 第57-58页 |
| 3.4.3 中和抗体对rLz-8治疗小鼠白细胞减少症药效学的影响 | 第58页 |
| 3.4.4 rlz-8对持续给予化疗药物小鼠白细胞数及死亡率的影响结果 | 第58-59页 |
| 3.4.5 rLz-8治疗大鼠白细胞减少症、预防和治疗犬白细胞减少症药效 | 第59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 第4章 rLz-8治疗白细胞减少症的药效学初步机制研究 | 第60-90页 |
| 4.1 实验仪器与材料 | 第60-63页 |
| 4.1.1 仪器 | 第60页 |
| 4.1.2 试剂 | 第60-61页 |
| 4.1.3 试剂的配制 | 第61-63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-68页 |
| 4.2.1 骨髓细胞增殖实验(MTT法) | 第63-64页 |
| 4.2.2 细胞周期检测 | 第64页 |
| 4.2.3 造血祖细胞集落培养 | 第64-65页 |
| 4.2.4 小鼠CD45~+、CD34~+细胞检测 | 第65页 |
| 4.2.5 小鼠血清中GM-CSF、IL-2、IL-4、γ-IFN等含量测定 | 第65页 |
| 4.2.6 Western blot法检测小鼠脾细胞GM-CSF蛋白表达 | 第65-67页 |
| 4.2.7 基因芯片检测重组灵芝免疫调节蛋白对小鼠脾细胞中免疫相关基因表达的影响 | 第67-68页 |
| 4.3 实验结果 | 第68-84页 |
| 4.3.1 骨髓细胞增殖实验结果(MTT法) | 第68-69页 |
| 4.3.2 细胞周期检测结果 | 第69-70页 |
| 4.3.3 造血祖细胞集落培养结果 | 第70-71页 |
| 4.3.4 小鼠CD45~+、CD34~+细胞检测结果 | 第71-72页 |
| 4.3.5 小鼠骨髓细胞上清中GM-CSF、IL-2、IL4、γ-IFN等含量测定 | 第72-74页 |
| 4.3.6 Western blot法检测小鼠脾细胞GM-CSF蛋白表达结果 | 第74-75页 |
| 4.3.7 基因芯片检测重组灵芝免疫调节蛋白对小鼠脾细胞中免疫相关基因表达的影响结果 | 第75-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-89页 |
| 4.4.1 骨髓细胞增殖实验结果(MTT法) | 第84页 |
| 4.4.2 细胞周期检测 | 第84页 |
| 4.4.3 造血祖细胞集落培养结果 | 第84-85页 |
| 4.4.4 小鼠CD45~+、CD34~+细胞检测结果 | 第85页 |
| 4.4.5 小鼠骨髓细胞上清中GM-CSF、IL-2、IL-4、γ-IFN等含量测定结果 | 第85-87页 |
| 4.4.6 Western blot法检测小鼠脾细胞GM-CSF蛋白表达结果 | 第87页 |
| 4.4.7 基因芯片检测重组灵芝免疫调节蛋白对小鼠脾细胞中免疫相关基因表达的影响结果 | 第87-89页 |
| 4.5 小结 | 第89-90页 |
| 第5章 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
