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禾谷镰刀菌随机插入突变体的构建及其水杨酸代谢途径关键基因鉴定

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 综述第10-18页
    1.1 赤霉病概述第10-11页
    1.2 赤霉病发病机理第11-12页
    1.3 禾谷镰刀菌功能基因的研究第12-13页
    1.4 植物激素抗病过程中的作用第13-14页
    1.5 禾谷镰刀菌与水杨酸第14-15页
    1.6 相关基因功能研究技术第15-17页
        1.6.1 T-DNA插入技术第15-16页
        1.6.2 表达谱分析第16-17页
    1.7 研究目的第17-18页
第二章 禾谷镰刀菌随机突变体的构建及检测第18-46页
    2.1 材料和方法第18-27页
        2.1.1 实验材料第18页
        2.1.2 培养基配制第18-19页
        2.1.3 禾谷镰刀菌孢子的培养第19页
        2.1.4 农杆菌诱导培养第19页
        2.1.5 禾谷镰刀菌和农杆菌的共培养第19页
        2.1.6 禾谷镰刀菌转化子的筛选和分离纯化第19-20页
        2.1.7 菌种的保存第20页
        2.1.8 禾谷镰刀菌突变体的性状鉴定第20-21页
        2.1.9 禾谷镰刀菌突变体的分子鉴定第21-23页
        2.1.10 突变体T-DNA插入位点的侧翼序列的扩增和分析第23-25页
        2.1.11 TAIL-PCR产物的克隆第25-27页
        2.1.12 TAIL-PCR的测序和分析第27页
    2.2 结果分析第27-42页
        2.2.1 T-DNA插入禾谷镰刀菌的效率第27页
        2.2.2 T-DNA插入突变体在普通SNA培养基的鉴定结果第27-28页
        2.2.3 T-DNA插入突变体在含SA的SNA培养基上的生长情况第28-29页
        2.2.4 温室接种小麦第29-30页
        2.2.5 用于分子检测的菌株选取第30-31页
        2.2.6 T-DNA插入的PCR检测第31-32页
        2.2.7 T-DNA插入位点的侧翼序列的扩增第32-33页
        2.2.8 TAIL-PCR产物的克隆第33-34页
        2.2.9 T-DNA插入位点序列的分析第34-42页
    2.3 讨论第42-46页
        2.3.1 关于禾谷镰刀菌ATMT转化效率和突变体库的构建第42-43页
        2.3.2 突变体的表型鉴定第43-44页
        2.3.3 TAIL-PCR的扩增第44-45页
        2.3.4 有待解决的问题第45-46页
第三章 禾谷镰刀菌水杨酸代谢途径分析第46-55页
    3.1 材料方法第46-48页
        3.1.1 实验材料第46页
        3.1.2 培养基配制第46页
        3.1.3 水杨酸最适浓度的确定第46页
        3.1.4 葡萄糖最适含量的确定第46页
        3.1.5 禾谷镰刀菌菌丝的培养及收集第46-47页
        3.1.6 样品RNA的提取第47页
        3.1.7 RNA的检测第47-48页
        3.1.8 禾谷镰刀菌转录组测序和构建表达谱第48页
        3.1.9 禾谷镰刀菌表达谱的分析第48页
    3.2 结果分析第48-52页
        3.2.1 水杨酸最适浓度的确定第48页
        3.2.2 葡萄糖最适含量的确定第48页
        3.2.3 RNA的检测第48-49页
        3.2.4 转录组测序质量第49页
        3.2.5 基因表达丰度统计第49-51页
        3.2.6 差异表达基因的筛选第51页
        3.2.7 差异表达基因的分析第51-52页
    3.3 讨论第52-55页
参考文献第55-60页
附录第60-69页
致谢第69页

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