| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩写说明 | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-26页 |
| 1 猪传染性胃肠炎诊断技术研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1 血清学诊断技术 | 第13-15页 |
| 1.2 分子生物学检测技术 | 第15-16页 |
| 2 流行性腹泻诊断技术的研究进展 | 第16-19页 |
| 2.1 免疫血清学诊断方法 | 第17-18页 |
| 2.2 分子生物学检测技术 | 第18-19页 |
| 3 轮状病毒诊断技术研究进展 | 第19-22页 |
| 3.1 经典病原检测技术 | 第19-20页 |
| 3.2 免疫学检测技术 | 第20-21页 |
| 3.3 分子生物学检测技术 | 第21-22页 |
| 4 基因芯片及在疾病检测中的应用 | 第22-25页 |
| 4.1. 基因芯片概述 | 第22-23页 |
| 4.2 基因芯片制备的基本流程 | 第23页 |
| 4.3 基因芯片在疾病检测中的应用 | 第23-25页 |
| 5 研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 第一章 TGEV、PEDV和PoRV探针的克隆与分析 | 第26-41页 |
| 1 材料 | 第26页 |
| 1.1 菌种与病毒 | 第26页 |
| 1.2 载体与菌株 | 第26页 |
| 1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-32页 |
| 2.1 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.2 PEDV探针基因的制备 | 第27-29页 |
| 2.3 TGEV、PoRV重组质粒菌的鉴定及探针的制备 | 第29-31页 |
| 2.4 重组质粒的PCR鉴定 | 第31页 |
| 2.5 核苷酸序列测定和同源性分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.1 PEDV的PM和PS探针基因扩增结果 | 第32页 |
| 3.2 TGEV和PoRV探针基因的PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| 3.3 重组质粒PCR鉴定结果及基因序列分析 | 第33-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 4.1 探针基因的选择 | 第37-38页 |
| 4.2 引物的设计 | 第38-39页 |
| 4.3 探针基因的PCR扩增、克隆与鉴定 | 第39页 |
| 4.4 探针基因的DNA序列分析 | 第39页 |
| 5 小结 | 第39-41页 |
| 第二章 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的构建 | 第41-53页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 探针基因重组质粒 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-47页 |
| 2.1 探针及定位基因的制备 | 第42-43页 |
| 2.2 基因芯片的制备 | 第43-44页 |
| 2.3 靶基因的制备 | 第44-46页 |
| 2.4 基因芯片检测的操作程序 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-49页 |
| 3.1 探针及定位基因的不同纯化方法的选择比较结果 | 第47-48页 |
| 3.2 探针基因纯化及浓度测定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 基因芯片载体的选择 | 第49页 |
| 4.2 基因芯片检测技术的特点 | 第49页 |
| 4.3 探针的制备 | 第49-50页 |
| 4.4 靶基因的标记 | 第50-51页 |
| 4.5 基因芯片杂交结果判定 | 第51-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 PEDV-TGEV-PoRV检测基因芯片的应用研究 | 第53-62页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 探针基因重组质粒 | 第53页 |
| 1.2 毒株 | 第53页 |
| 1.3 主要试剂 | 第53页 |
| 1.4 主要仪器 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-55页 |
| 2.1 靶基因的多重标记体系的建立 | 第54页 |
| 2.2 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的特异性试验 | 第54页 |
| 2.3 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的灵敏性试验 | 第54-55页 |
| 2.4 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的重复使用试验 | 第55页 |
| 2.5 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片保存期试验 | 第55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-60页 |
| 3.1 探针基因多重PCR标记条件优化结果 | 第55-56页 |
| 3.2 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的特异性试验 | 第56-57页 |
| 3.3 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的敏感性试验 | 第57-58页 |
| 3.4 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片重复性试验结果 | 第58-59页 |
| 3.5 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的保存期试验结果 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 4.1 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的特异性 | 第60页 |
| 4.2 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的敏感性 | 第60页 |
| 4.3 PEDV-TGEV-PoRV诊断基因芯片的重复利用 | 第60-61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录一：探针基因的测序结果 | 第70-72页 |
| 附录二：试剂的配置方法 | 第72-73页 |
