A型肉毒毒素轻链表达及其生物活性检测
| 目录 | 第1-7页 |
| 英文缩略词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一章 BoNT/A 轻链高效表达、纯化及鉴定 | 第17-27页 |
| 1 材料 | 第17-19页 |
| ·基因、质粒、菌株 | 第17页 |
| ·主要溶液 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-21页 |
| ·表达质粒构建 | 第19-20页 |
| ·BoNT/A 轻链蛋白表达及表达产物分析 | 第20-21页 |
| ·BoNT/A 轻链蛋白纯化 | 第21页 |
| ·BoNT/A 轻链蛋白鉴定 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-24页 |
| ·表达质粒构建 | 第21-22页 |
| ·BoNT/A 轻链表达 | 第22-23页 |
| ·BoNT/A 轻链亲和层析纯化 | 第23页 |
| ·BoNT/A 轻链生物活性 | 第23-24页 |
| 4 讨论 | 第24-25页 |
| 5 小结 | 第25-27页 |
| 第二章 SNAP25 蛋白表达、纯化及鉴定 | 第27-35页 |
| 1 材料 | 第27页 |
| ·基因、质粒、菌株 | 第27页 |
| ·主要溶液 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-30页 |
| ·表达质粒构建 | 第27-29页 |
| ·SNAP25 蛋白表达及表达产物分析 | 第29页 |
| ·SNAP25 蛋白纯化 | 第29-30页 |
| ·SNAP25 蛋白鉴定 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-33页 |
| ·表达质粒构建 | 第30-31页 |
| ·SNAP25 蛋白表达 | 第31页 |
| ·SNAP25 蛋白纯化 | 第31-32页 |
| ·SNAP25 蛋白鉴定 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33页 |
| 5 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 SNS 蛋白表达、纯化及鉴定 | 第35-43页 |
| 1 材料 | 第35页 |
| ·基因、质粒、菌株 | 第35页 |
| ·主要溶液 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-38页 |
| ·表达质粒构建 | 第35-37页 |
| ·SNS 蛋白表达及表达产物分析 | 第37页 |
| ·SNS 蛋白纯化 | 第37页 |
| ·SNS 蛋白反应原性鉴定 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-41页 |
| ·表达质粒构建 | 第38-39页 |
| ·SNS 蛋白表达 | 第39页 |
| ·SNS 蛋白纯化 | 第39-40页 |
| ·SNS 蛋白的反应原性 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41页 |
| 5 小结 | 第41-43页 |
| 第四章 检测抗体制备 | 第43-51页 |
| 1 材料 | 第43-44页 |
| ·制备抗原的相关材料 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·说明 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-48页 |
| ·抗血清效价检测方法 | 第44-45页 |
| ·多肽偶联KLH 载体蛋白 | 第45页 |
| ·抗血清制备 | 第45-46页 |
| ·IgG 的纯化 | 第46-48页 |
| 3 结果 | 第48-49页 |
| ·抗血清的ELISA 检测 | 第48-49页 |
| ·抗血清的纯化 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 5 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 A 型肉毒毒素生物活性检测方法的建立 | 第51-75页 |
| 1 材料 | 第51-52页 |
| ·主要溶液 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·实验动物 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-55页 |
| ·底物最适包被浓度的确定 | 第52页 |
| ·样品反应时间的确定 | 第52-53页 |
| ·BoNT/A LC 检测限考察 | 第53-54页 |
| ·检测方法的精密度考察 | 第54页 |
| ·杂质对检测结果的影响 | 第54页 |
| ·BoNT/A 样品的检测 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-73页 |
| ·底物最适包被浓度 | 第55-56页 |
| ·样品反应时间 | 第56-57页 |
| ·BoNT/A LC 检测限 | 第57页 |
| ·检测方法的精密度 | 第57-62页 |
| ·杂质对检测结果的影响 | 第62-63页 |
| ·BoNT/A 样品的检测 | 第63-73页 |
| 4 讨论 | 第73页 |
| 5 小结 | 第73-75页 |
| 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 个人简历 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
