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芥菜紫叶基因Bj.Pur定位及候选基因分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1.前言第11-20页
    1.1 花青苷概述第12-16页
        1.1.1 花青苷的组成和分布第12-13页
        1.1.2 花青苷的生物合成及调控第13-16页
    1.2 图位克隆技术在基因定位中的应用第16-18页
        1.2.1 群体分离分析法(Bulked segregant analysis, BSA)第17页
        1.2.2 分子标记技术第17-18页
        1.2.3 RNA-seq高通量测序技术在基因定位中的应用第18页
    1.3 紫色基因在芸薹属作物中的研究进展第18-19页
    1.4 选题背景与目的意义第19-20页
2.材料与方法第20-29页
    2.1 材料第20页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌种及载体第20页
        2.1.3 主要生化试剂第20页
    2.2 方法第20-29页
        2.2.1 植物学性状观察与花青苷的组织定位第20-21页
        2.2.2 群体再构建与性状调查第21页
        2.2.3 分子标记方法第21-23页
        2.2.4 BSA-RNA-seq测序分析第23-26页
        2.2.5 候选基因鉴定第26页
        2.2.6 候选基因gDNA及CDS全长克隆及测序第26-28页
        2.2.7 qRT-PCR表达量分析第28-29页
3.结果与分析第29-46页
    3.1 性状观察和花青素组织定位第29-30页
        3.1.1 亲本材料植物学性状表现第29-30页
        3.1.2 紫叶芥花青苷的组织定位第30页
    3.2 分离群体叶色性状调查与遗传模式分析第30-32页
    3.3 与叶色基因连锁的标记筛选第32-34页
        3.3.1 SSR及InDel标记筛选第32页
        3.3.2 CAPS标记筛选及白菜花青素合成转录因子验证第32-34页
    3.4 极端池RNA-seq测序结果分析第34-40页
        3.4.1 参考白菜基因组分析结果第34-35页
        3.4.2 转录组数据质量评估第35-36页
        3.4.3 基因表达量分析第36页
        3.4.4 差异表达基因筛选与功能注释第36-38页
        3.4.5 关联分析第38-40页
        3.4.6 芥菜中与拟南芥花青素合成相关基因的同源基因筛选第40页
    3.5 鉴定候选基因第40-42页
        3.5.1 Bj.Pur基因初定位第40页
        3.5.2 候选区域内基因的筛选第40-42页
    3.6 Gglean060401基因gDNA及CDS全长克隆及比较测序第42-44页
        3.6.1 RNA质量检测第42-43页
        3.6.2 cDNA的合成第43页
        3.6.3 候选基因的克隆与测序分析第43-44页
    3.7 Gglean060401基因表达量分析第44-45页
    3.8 Bj-MYB90标记F_2群体验证第45-46页
4.讨论与结论第46-49页
    4.1 拟南芥及白菜基因组信息在芥菜基因定位中的作用第46-47页
    4.2 芥菜紫叶基因定位及候选基因筛选与鉴定第47-48页
        4.2.1 芥菜紫叶基因定位第47页
        4.2.2 确定Gglean060401基因为候选基因第47-48页
    4.3 后续工作计划第48-49页
参考文献第49-58页
附录 1:CTAB小量法提取总DNA第58页
附录 2:与Pj.Pur基因紧密连锁的4个标记序列信息第58-59页
附录 3:目的片段克隆第59-60页
附录 4: Gglean060401基因及插入片段A的碱基序列信息第60-61页
致谢第61页

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