摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1. 前言 | 第12-23页 |
1.1 问题的提出 | 第12页 |
1.2 植物的自交不亲和性 | 第12-18页 |
1.2.1 SSI植物自交不亲和机制 | 第13-14页 |
1.2.2 GSI植物自交不亲和机制 | 第14-18页 |
1.2.3 LSI植物自交不亲和机制 | 第18页 |
1.3 花粉管的极性生长 | 第18-20页 |
1.4 转录组测序在植物SI机制中的应用 | 第20-21页 |
1.5 茶树SI机制研究进展 | 第21-23页 |
1.6 本研究的目的 | 第23页 |
2. 材料与方法 | 第23-38页 |
2.1 材料与试剂 | 第23-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-38页 |
2.2.1 自交和异交授粉花粉管生长观测 | 第25页 |
2.2.2 RNA和DNA的提取与检测 | 第25-26页 |
2.2.3 花柱转录组测序及分析 | 第26-28页 |
2.2.4 子房转录组测序及分析 | 第28-29页 |
2.2.5 CsS-RNase基因的克隆及分析 | 第29-36页 |
2.2.6 CsCDPK基因的克隆及分析 | 第36-38页 |
3. 结果与分析 | 第38-74页 |
3.1 自交和异交授粉花粉管生长观测 | 第38-39页 |
3.2 花柱转录组测序及分析 | 第39-49页 |
3.2.1 RNA-Seq和序列拼接 | 第39页 |
3.2.2 功能注释 | 第39-41页 |
3.2.3 差异表达基因筛选 | 第41-43页 |
3.2.4 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第43-44页 |
3.2.5 CP和SP花柱的基因时序表达模式 | 第44-48页 |
3.2.6 putative S-RNase基因的分析 | 第48-49页 |
3.3 子房转录组测序及分析 | 第49-58页 |
3.3.1 转录组测序和拼接 | 第49-50页 |
3.3.2 功能注释 | 第50-51页 |
3.3.3 子房特异表达基因筛选 | 第51-52页 |
3.3.4 子房特异表达基因的验证 | 第52-54页 |
3.3.5 植物激素信号相关基因在SP和CP子房中的表达模式 | 第54-56页 |
3.3.6 putative Aux/IAA的分析 | 第56-58页 |
3.4 CsS-RNase的克隆和分析 | 第58-66页 |
3.4.1 CsS-RNase全长cDNA的克隆 | 第58-60页 |
3.4.2 CsS-RNase的表达模式分析 | 第60-61页 |
3.4.3 不同茶树品种CsS-RNase基因型的鉴定 | 第61页 |
3.4.4 CsS-RNase的图谱定位 | 第61-63页 |
3.4.5 CsS-RNase的原核表达和蛋白纯化 | 第63-64页 |
3.4.6 CsS-RNase蛋白处理花粉 | 第64-66页 |
3.5 CsCDPKs的克隆与分析 | 第66-74页 |
3.5.1 CsCDPKs基因的挖掘 | 第66页 |
3.5.2 qRT-PCR检测CsCDPKs的组织表达特异性 | 第66-68页 |
3.5.3 花粉特异表达CsCDPKs基因的克隆和分析 | 第68-69页 |
3.5.4 CsCDPKs基因在不同培养时间的花粉中的表达模式 | 第69-72页 |
3.5.5 CsCDPKs基因在不同Ca2+浓度培养的花粉中的表达模式 | 第72-73页 |
3.5.6 硫代修饰的反义寡核苷酸链沉默花粉CsCDPKs基因 | 第73-74页 |
4. 讨论 | 第74-86页 |
4.1 自交和异交授粉花粉管的生长 | 第74-75页 |
4.2 花柱转录组测序及分析 | 第75-76页 |
4.3 子房转录组测序及分析 | 第76-79页 |
4.4 CsS-RNase基因的克隆及分析 | 第79-81页 |
4.5 CsCDPK基因的克隆及分析 | 第81-84页 |
4.6 总结与展望 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-100页 |
附录A:本文所使用的引物 | 第100-102页 |
附录B:53 个植物激素信号转导相关基因qRT-PCR引物信息 | 第102-104页 |
附录C:花柱转录组Unigene的物种分布 | 第104-105页 |
附录D:花柱转录组Unigene的GO分类 | 第105-106页 |
附录E:子房转录组Unigene的注释 | 第106-107页 |
附录F:84个植物激素信号转导相关Unigene信息 | 第107-108页 |
附录G:茶树子房中特异表达的的99个Unigene | 第108-109页 |
附录H:攻读博士期间发表的论文 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-112页 |