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茶树育性相关基因的克隆与表达研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第11-12页
1. 前言第12-23页
    1.1 问题的提出第12页
    1.2 植物的自交不亲和性第12-18页
        1.2.1 SSI植物自交不亲和机制第13-14页
        1.2.2 GSI植物自交不亲和机制第14-18页
        1.2.3 LSI植物自交不亲和机制第18页
    1.3 花粉管的极性生长第18-20页
    1.4 转录组测序在植物SI机制中的应用第20-21页
    1.5 茶树SI机制研究进展第21-23页
    1.6 本研究的目的第23页
2. 材料与方法第23-38页
    2.1 材料与试剂第23-25页
        2.1.1 植物材料第23-24页
        2.1.2 主要试剂第24-25页
    2.2 试验方法第25-38页
        2.2.1 自交和异交授粉花粉管生长观测第25页
        2.2.2 RNA和DNA的提取与检测第25-26页
        2.2.3 花柱转录组测序及分析第26-28页
        2.2.4 子房转录组测序及分析第28-29页
        2.2.5 CsS-RNase基因的克隆及分析第29-36页
        2.2.6 CsCDPK基因的克隆及分析第36-38页
3. 结果与分析第38-74页
    3.1 自交和异交授粉花粉管生长观测第38-39页
    3.2 花柱转录组测序及分析第39-49页
        3.2.1 RNA-Seq和序列拼接第39页
        3.2.2 功能注释第39-41页
        3.2.3 差异表达基因筛选第41-43页
        3.2.4 差异表达基因的qRT-PCR验证第43-44页
        3.2.5 CP和SP花柱的基因时序表达模式第44-48页
        3.2.6 putative S-RNase基因的分析第48-49页
    3.3 子房转录组测序及分析第49-58页
        3.3.1 转录组测序和拼接第49-50页
        3.3.2 功能注释第50-51页
        3.3.3 子房特异表达基因筛选第51-52页
        3.3.4 子房特异表达基因的验证第52-54页
        3.3.5 植物激素信号相关基因在SP和CP子房中的表达模式第54-56页
        3.3.6 putative Aux/IAA的分析第56-58页
    3.4 CsS-RNase的克隆和分析第58-66页
        3.4.1 CsS-RNase全长cDNA的克隆第58-60页
        3.4.2 CsS-RNase的表达模式分析第60-61页
        3.4.3 不同茶树品种CsS-RNase基因型的鉴定第61页
        3.4.4 CsS-RNase的图谱定位第61-63页
        3.4.5 CsS-RNase的原核表达和蛋白纯化第63-64页
        3.4.6 CsS-RNase蛋白处理花粉第64-66页
    3.5 CsCDPKs的克隆与分析第66-74页
        3.5.1 CsCDPKs基因的挖掘第66页
        3.5.2 qRT-PCR检测CsCDPKs的组织表达特异性第66-68页
        3.5.3 花粉特异表达CsCDPKs基因的克隆和分析第68-69页
        3.5.4 CsCDPKs基因在不同培养时间的花粉中的表达模式第69-72页
        3.5.5 CsCDPKs基因在不同Ca2+浓度培养的花粉中的表达模式第72-73页
        3.5.6 硫代修饰的反义寡核苷酸链沉默花粉CsCDPKs基因第73-74页
4. 讨论第74-86页
    4.1 自交和异交授粉花粉管的生长第74-75页
    4.2 花柱转录组测序及分析第75-76页
    4.3 子房转录组测序及分析第76-79页
    4.4 CsS-RNase基因的克隆及分析第79-81页
    4.5 CsCDPK基因的克隆及分析第81-84页
    4.6 总结与展望第84-86页
参考文献第86-100页
附录A:本文所使用的引物第100-102页
附录B:53 个植物激素信号转导相关基因qRT-PCR引物信息第102-104页
附录C:花柱转录组Unigene的物种分布第104-105页
附录D:花柱转录组Unigene的GO分类第105-106页
附录E:子房转录组Unigene的注释第106-107页
附录F:84个植物激素信号转导相关Unigene信息第107-108页
附录G:茶树子房中特异表达的的99个Unigene第108-109页
附录H:攻读博士期间发表的论文第109-110页
致谢第110-112页

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