| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 研究背景 | 第12-42页 |
| 1.1 蓝藻的相关背景 | 第12-13页 |
| 1.1.1 蓝藻 | 第12-13页 |
| 1.2 微囊藻毒素 | 第13-17页 |
| 1.2.1 微囊藻毒素概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 微囊藻毒素危害的分子机制 | 第14-15页 |
| 1.2.3 水体中的微囊藻毒素 | 第15-16页 |
| 1.2.4 微囊藻毒素的处理方法 | 第16页 |
| 1.2.5 微囊藻毒素在蓝藻体内的功能 | 第16-17页 |
| 1.3 微囊藻毒素合成途径的相关研究 | 第17-23页 |
| 1.3.1 微囊藻毒素合成的初步研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 微囊藻毒素合成酶基因簇 | 第18-19页 |
| 1.3.3 微囊藻毒素合成的调控 | 第19页 |
| 1.3.4 微囊藻毒素合成的可能的催化机制 | 第19-22页 |
| 1.3.5 微囊藻毒素合成的催化机制的不足 | 第22-23页 |
| 1.4 Ⅰ型多聚乙酰合成酶/非核糖体肽合成酶的相关研究 | 第23-42页 |
| 1.4.1 Ⅰ型多聚乙酰合成酶/非核糖体肽合成酶的相关背景 | 第23-24页 |
| 1.4.2 Ⅰ型多聚乙酰合成酶/非核糖体肽合成酶的基本构成与催化机制 | 第24-25页 |
| 1.4.3 Ⅰ型多聚乙酰合成酶/非核糖体肽合成酶的研究目标 | 第25-28页 |
| 1.4.4 Ⅰ型多聚乙酰合成酶/非核糖体肽合成酶结构研究现状 | 第28页 |
| 1.4.5 腺苷化功能结构域的相关研究 | 第28-31页 |
| 1.4.6 肽酰基载体蛋白结构域的功能与结构研究 | 第31-32页 |
| 1.4.7 双功能结构域KS-AT的结构研究 | 第32-34页 |
| 1.4.8 PCP与单个功能结构域的结构 | 第34-37页 |
| 1.4.9 完整的非核糖体肽合成酶SrfA-C结构 | 第37-38页 |
| 1.4.10 多聚乙酰合成酶PikAⅢ的电镜结构 | 第38-42页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第42-50页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第42页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第42页 |
| 2.1.2 试剂、酶 | 第42页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第42-44页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| 2.3 蛋白表达和纯化 | 第45-47页 |
| 2.3.1 蛋白小量表达检测 | 第45页 |
| 2.3.2 蛋白大量表达及纯化 | 第45-46页 |
| 2.3.3 硒代蛋白的准备 | 第46-47页 |
| 2.4 蛋白质晶体的初筛、优化及数据收集与处理 | 第47-50页 |
| 2.4.1 蛋白质晶体的初筛与优化 | 第47-48页 |
| 2.4.2 X-射线衍射数据的收集与处理以及结构的解析和精修 | 第48-50页 |
| 第三章 McyGA-PCP的结果与讨论 | 第50-68页 |
| 3.1 微囊藻毒素合成蛋白起始双功能结构域McyGA-PCP的研究 | 第50-67页 |
| 3.1.1 双功能结构域McyGA-PCP的分子克隆、表达与纯化 | 第50-52页 |
| 3.1.2 双功能结构域McyGA-PCP的晶体生长与优化 | 第52-53页 |
| 3.1.3 双功能结构域McyGA-PCP的衍射数据的收集与处理 | 第53-55页 |
| 3.1.4 双功能结构域McyGA-PCP的整体结构 | 第55-57页 |
| 3.1.5 L-Phe-AMP的结合位点 | 第57-59页 |
| 3.1.6 McyGA-PCP中A与PCP的相互作用界面 | 第59-63页 |
| 3.1.7 双功能结构域A-PCP反应循环的机制 | 第63-67页 |
| 3.2 McyGA-PCP的小结 | 第67-68页 |
| 第四章 微囊藻毒素合成蛋白McyG的相关工作 | 第68-74页 |
| 4.1 McyG的相关工作 | 第68-74页 |
| 4.1.1 McyG的研究背景 | 第68-69页 |
| 4.1.2 关于McyG的实验结果与讨论 | 第69-74页 |
| 4.1.2.1 McyG相关靶标的分子克隆 | 第69-72页 |
| 4.1.2.2 表达检测与纯化 | 第72-74页 |
| 第五章 微囊藻毒素合成蛋白McyC相关工作 | 第74-86页 |
| 5.1 背景介绍 | 第74-85页 |
| 5.1.1 微囊藻毒素合成蛋白的背景和进展 | 第74页 |
| 5.1.2 分子克隆、表达及纯化 | 第74-79页 |
| 5.1.3 McyC A的酶活初步探索 | 第79-81页 |
| 5.1.4 McyC晶体初筛条件的摸索 | 第81-83页 |
| 5.1.5 McyC功能结构域的表达纯化及结晶 | 第83-85页 |
| 5.2 小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 附录 | 第92-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 在读期间发表的论文及参与的会议 | 第104页 |
