| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-36页 |
| 1.1 园艺植物种质资源的重要性及现状 | 第17页 |
| 1.2 传统园艺植物种质资源的保存方法及优缺点 | 第17-18页 |
| 1.3 超低温保存种质资源 | 第18-23页 |
| 1.3.1 概念 | 第18页 |
| 1.3.2 特点 | 第18页 |
| 1.3.3 主要方法 | 第18-20页 |
| 1.3.3.1 程序降温法（controlled rate cooling） | 第18页 |
| 1.3.3.2 玻璃化法（Vitrification） | 第18-19页 |
| 1.3.3.3 包埋干燥法（Encapsulation-dehydration） | 第19页 |
| 1.3.3.4 包埋玻璃化法（Encapsulation-vitrification） | 第19页 |
| 1.3.3.5 小滴玻璃化法（droplet-vitrification） | 第19-20页 |
| 1.3.4 影响基于玻璃化超低温保存方法的主要因素 | 第20-22页 |
| 1.3.4.1 母株材料（Stock cultures） | 第20页 |
| 1.3.4.2 预培养（Preculture） | 第20-21页 |
| 1.3.4.3 加载（Loading） | 第21页 |
| 1.3.4.4 玻璃化处理（Vitrification） | 第21页 |
| 1.3.4.5 卸载（Unloading） | 第21-22页 |
| 1.3.4.6 后培养（Post-culture） | 第22页 |
| 1.3.5 超低温保存再生植株的遗传稳定性鉴定 | 第22-23页 |
| 1.4 超低温疗法 | 第23-26页 |
| 1.4.1 概念 | 第23页 |
| 1.4.2 研究现状 | 第23-24页 |
| 1.4.2.1 发展历史 | 第23-24页 |
| 1.4.2.2 脱毒机理 | 第24页 |
| 1.4.3 优点 | 第24-26页 |
| 1.4.3.1 脱毒率高 | 第24-25页 |
| 1.4.3.2 脱毒率不受茎尖大小的影响 | 第25-26页 |
| 1.4.3.3 脱毒率不受超低温方法的影响 | 第26页 |
| 1.4.3.4 不需要特殊的仪器、设备，且周期短 | 第26页 |
| 1.4.3.5 可同时用于种质资源的保存与脱毒 | 第26页 |
| 1.5 菊花超低温保存及脱毒研究进展 | 第26-30页 |
| 1.5.1 重要价值 | 第26页 |
| 1.5.2 超低温保存研究现状 | 第26-28页 |
| 1.5.3 脱毒研究 | 第28-30页 |
| 1.5.3.1 感染菊花的主要病毒 | 第28-29页 |
| 1.5.3.2 CVB 的特点及危害 | 第29页 |
| 1.5.3.3 CVB 的脱毒研究 | 第29-30页 |
| 1.6 枣种质资源保存及脱毒研究进展 | 第30-33页 |
| 1.6.1 重要价值 | 第30页 |
| 1.6.2 种质资源保存现状 | 第30页 |
| 1.6.3 枣疯病的研究进展 | 第30-33页 |
| 1.6.3.1 特点及危害 | 第30-31页 |
| 1.6.3.2 脱除研究现状 | 第31-33页 |
| 1.7 马铃薯种质资源保存 | 第33-34页 |
| 1.7.1 重要价值 | 第33页 |
| 1.7.2 超低温保存现状 | 第33-34页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第34-35页 |
| 1.9 技术路线 | 第35-36页 |
| 第二章 菊花茎尖超低温保存体系的建立及脱除 CVB 的研究 | 第36-63页 |
| 2.1 材料、试剂和仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第36页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 方法 | 第37-43页 |
| 2.2.1 试管苗的建立与培养 | 第37页 |
| 2.2.2 影响小滴玻璃化超低温保存体系的关键因素 | 第37-39页 |
| 2.2.2.1 蔗糖预培养 | 第37-38页 |
| 2.2.2.2 加载液 | 第38页 |
| 2.2.2.3 PVS2 脱水时间 | 第38页 |
| 2.2.2.4 再生培养基 | 第38页 |
| 2.2.2.5 茎尖大小 | 第38页 |
| 2.2.2.6 超低温保存再生率的提高 | 第38-39页 |
| 2.2.2.7 建立的小滴玻璃化超低温保存体系的广谱性验证 | 第39页 |
| 2.2.2.8 生根及移栽 | 第39页 |
| 2.2.3 超低温保存茎尖中成活细胞的分布 | 第39页 |
| 2.2.4 超低温保存再生植株的遗传稳定性鉴定 | 第39-41页 |
| 2.2.4.1 SSR（简单序列重复） | 第39-40页 |
| 2.2.4.2 FCM（流式细胞术） | 第40-41页 |
| 2.2.5 超低温疗法对 CVB 脱除效率的研究 | 第41-43页 |
| 2.2.5.1 茎尖大小 | 第41页 |
| 2.2.5.2 病毒检测 | 第41-42页 |
| 2.2.5.3 CVB 在茎尖中的分布 | 第42-43页 |
| 2.2.5.4 成活细胞定位 | 第43页 |
| 2.2.6 试验设计与数据分析 | 第43页 |
| 2.3 结果与分析 | 第43-59页 |
| 2.3.1 影响茎尖小滴玻璃化超低温保存的关键因素 | 第43-51页 |
| 2.3.1.1 蔗糖预培养 | 第43-45页 |
| 2.3.1.2 加载液成份 | 第45页 |
| 2.3.1.3 PVS2 处理 | 第45-46页 |
| 2.3.1.4 茎尖大小 | 第46-47页 |
| 2.3.1.5 再生培养基 | 第47页 |
| 2.3.1.6 试管苗苗龄与芽着生的位置 | 第47-48页 |
| 2.3.1.7 菊花茎尖小滴玻璃化超低温体系的建立 | 第48-50页 |
| 2.3.1.8 小滴玻璃化超低温保存体系的广谱性验证 | 第50页 |
| 2.3.1.9 茎尖超低温保存再生植株的移栽情况 | 第50-51页 |
| 2.3.2 超低温保存茎尖中成活细胞的分布 | 第51-52页 |
| 2.3.3 超低温保存再生植株的遗传稳定性鉴定 | 第52-55页 |
| 2.3.3.1 SSR（内部序列重复） | 第52-54页 |
| 2.3.3.2 倍性检测 | 第54-55页 |
| 2.3.4 超低温疗法对 CVB 的脱毒效率 | 第55-58页 |
| 2.3.4.1 母株的带毒情况 | 第55-56页 |
| 2.3.4.2 茎尖大小对超低温疗法脱除 CVB 的效率的影响 | 第56-58页 |
| 2.3.5 CVB 在茎尖的分布 | 第58-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-62页 |
| 2.5 小结 | 第62-63页 |
| 第三章 枣茎尖超低温保存及超低温脱除枣疯病植原体 | 第63-77页 |
| 3.1 材料、试剂和仪器 | 第63页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第63页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第63页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第63页 |
| 3.2 方法 | 第63-67页 |
| 3.2.1 试管苗建立与保存 | 第64-65页 |
| 3.2.2 影响小滴玻璃化超低温保存体系的关键因素 | 第65页 |
| 3.2.2.1 蔗糖预培养 | 第65页 |
| 3.2.2.2 PVS2 脱水时间 | 第65页 |
| 3.2.2.3 茎尖大小 | 第65页 |
| 3.2.3 微型嫁接 | 第65页 |
| 3.2.4 植原体的检测 | 第65-66页 |
| 3.2.5 超低温保存茎尖中成活细胞的分布 | 第66页 |
| 3.2.6 茎尖细胞超微结构的观察 | 第66页 |
| 3.2.7 超低温再生植株遗传稳定性的鉴定 | 第66页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第66-67页 |
| 3.3 结果与分析 | 第67-74页 |
| 3.3.1 茎尖小滴玻璃化超低温保存体系的关键因素 | 第68-70页 |
| 3.3.1.1 蔗糖预培养 | 第68页 |
| 3.3.1.2 PVS2 处理时间 | 第68-69页 |
| 3.3.1.3 茎尖大小 | 第69-70页 |
| 3.3.2 微型嫁接的再生率 | 第70页 |
| 3.3.3 超低温疗法对植原体的脱除效率 | 第70-72页 |
| 3.3.3.1 母株的带毒情况 | 第70-71页 |
| 3.3.3.2 茎尖大小对超低温疗法脱除植原体效率的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.4 超低温保存茎尖中成活细胞的分布 | 第72-73页 |
| 3.3.5 茎尖细胞超微结构的观察 | 第73页 |
| 3.3.6 植原体在茎尖中的分布情况 | 第73页 |
| 3.3.7 超低温再生植株的遗传稳定性鉴定 | 第73-74页 |
| 3.4 讨论 | 第74-76页 |
| 3.5 小结 | 第76-77页 |
| 第四章 马铃薯茎尖包埋玻璃化超低温保存体系的建立 | 第77-94页 |
| 4.1 材料、试剂和仪器 | 第77-78页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第77页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第77页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第77-78页 |
| 4.2 方法 | 第78-81页 |
| 4.2.1 影响包埋玻璃化超低温保存体系的关键因素 | 第78-80页 |
| 4.2.1.1 蔗糖预培养 | 第79页 |
| 4.2.1.2 加载液成份及加载时间 | 第79-80页 |
| 4.2.1.3 PVS2 脱水时间 | 第80页 |
| 4.2.1.4 再生培养基 | 第80页 |
| 4.2.1.5 包埋玻璃化超低温保存体系广谱性的验证 | 第80页 |
| 4.2.2 超低温保存茎尖中成活细胞的分布 | 第80-81页 |
| 4.2.3 茎尖超微结构的观察 | 第81页 |
| 4.2.4 超低温再生植株的遗传稳定性鉴定 | 第81页 |
| 4.2.4.1 ISSR（内部简单序列重复） | 第81页 |
| 4.2.4.2 FCM （流式细胞术） | 第81页 |
| 4.2.5 数据分析 | 第81页 |
| 4.3 结果与分析 | 第81-91页 |
| 4.3.1 超低温保存体系的关键因素 | 第81-87页 |
| 4.3.1.1 蔗糖预培养 | 第81-83页 |
| 4.3.1.2 加载液成份 | 第83-84页 |
| 4.3.1.3 加载时间 | 第84页 |
| 4.3.1.4 PVS2 处理时间 | 第84-85页 |
| 4.3.1.5 再生培养基 | 第85-86页 |
| 4.3.1.6 包埋玻璃化超低温保存体系广谱性的验证 | 第86页 |
| 4.3.1.7 茎尖包埋玻璃化超低温保存体系 | 第86-87页 |
| 4.3.2 超低温保存茎尖中成活细胞的分布 | 第87-89页 |
| 4.3.3 茎尖超微结构的观察 | 第89页 |
| 4.3.4 超低温再生植株遗传稳定性的鉴定 | 第89-91页 |
| 4.3.4.1 ISSR（内部简单序列重复） | 第89-90页 |
| 4.3.4.2 FCM （流式细胞术） | 第90-91页 |
| 4.4 讨论 | 第91-94页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第94-95页 |
| 5.1 结论 | 第94页 |
| 5.2 创新点 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-110页 |
| 附录 | 第110-114页 |
| 缩略词 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 作者简介 | 第116-117页 |
