| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 部分缩略词及英中文对照 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 香蕉的经济价值及分布 | 第11页 |
| 1.2 香蕉枯萎病的病原及发病症状 | 第11-12页 |
| 1.3 香蕉枯萎病菌致病机理以及防治 | 第12-15页 |
| 1.3.1 香蕉枯萎病菌的致病机理 | 第12-14页 |
| 1.3.2 香蕉枯萎病的防治 | 第14-15页 |
| 1.4 组织病理学研究进展 | 第15-17页 |
| 1.5 转录辅助复合体SAGA的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.5.1 真菌转录辅助复合体 | 第17页 |
| 1.5.2 SAGA转录辅助因子的蛋白组成 | 第17页 |
| 1.5.3 SAGA组成蛋白的功能 | 第17-19页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-25页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和供试植株 | 第20页 |
| 2.1.2 主要供试培养基及主要试剂配方 | 第20页 |
| 2.1.3 常用试剂和仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.4 试验所用引物 | 第22-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 Fo HFI1基因的系统进化分析 | 第25页 |
| 2.2.2 香蕉枯萎病菌Fo HFI1基因的敲除和敲除突变体的筛选 | 第25-32页 |
| 2.2.2.1 野生型原生质体的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.2.2. 野生型基因组DNA的提取 | 第26-28页 |
| 2.2.2.3 野生型菌株的PEG转化 | 第28页 |
| 2.2.2.4 香蕉枯萎病菌Fo HFI1敲除突变体的验证 | 第28-32页 |
| 2.3 香蕉枯萎病菌Fo HFI1敲除突变体表型测定 | 第32-35页 |
| 2.3.1 显微形态观察 | 第32-33页 |
| 2.3.2 菌落形态观察 | 第33页 |
| 2.3.3 生长速率测定 | 第33页 |
| 2.3.4 关于产孢及菌丝生长相关基因的q RT-PCR分析 | 第33页 |
| 2.3.5 酶活平板检测 | 第33-34页 |
| 2.3.6 Fo HIF1和Fo SNF1敲除突变体CWDEs合成相关基因的q RT-PCR分析 | 第34-35页 |
| 2.4 敲除突变体致病力检测 | 第35-38页 |
| 2.4.1 玻璃纸穿透能力检测 | 第35页 |
| 2.4.2 对番茄果实侵染能力测定 | 第35页 |
| 2.4.3 接种香蕉苗致病力测定 | 第35-38页 |
| 2.4.3.1 接种方法 | 第36页 |
| 2.4.3.2 根组织固定、透明和染色 | 第36-37页 |
| 2.4.3.3 不同侵染时间病原菌的侵染情况q PCR定量测定 | 第37-38页 |
| 2.5 Fo HFI1及相关基因表达分析 | 第38-39页 |
| 2.5.1 Fo HFI1基因在侵染过程的表达分析 | 第38页 |
| 2.5.2 Fo HFI1相关基因的实时定量分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3.1 Fo HFI1基因系统进化分析 | 第39-40页 |
| 3.2 香蕉枯萎病菌Fo HFI1基因的敲除及Fo HFI1敲除突变体的筛选 | 第40-45页 |
| 3.2.1 香蕉枯萎病菌Fo HFI1基因的敲除 | 第40-42页 |
| 3.2.1.1 野生型菌株原生质体的制备 | 第40页 |
| 3.2.1.2 基因左右同源臂序列分别与部分HPH序列融合PCR结果 | 第40-42页 |
| 3.2.1.3 野生型菌株的PEG转化 | 第42页 |
| 3.2.2 香蕉枯萎病菌Fo HFI1敲除突变体的验证 | 第42-45页 |
| 3.2.2.1 香蕉枯萎病菌Fo HFI1敲除突变体PCR验证 | 第42-43页 |
| 3.2.2.2 香蕉枯萎病菌Fo HFI1突变体杂交验证 | 第43-44页 |
| 3.2.2.3 香蕉枯萎病菌Fo HFI1敲除突变体q RT-PCR验证 | 第44-45页 |
| 3.3 香蕉枯萎病菌Fo HFI1敲除突变体表型分析 | 第45-50页 |
| 3.3.1 显微形态观察 | 第45-46页 |
| 3.3.2 菌落形态观察 | 第46-47页 |
| 3.3.3 生长速率测定 | 第47-48页 |
| 3.3.4 关于产孢及菌丝生长相关基因的q RT-PCR分析 | 第48页 |
| 3.3.5 酶活平板检测 | 第48-49页 |
| 3.3.6 Fo HIF1和Fo SNF1敲除突变体CWDEs合成相关基因的测定 | 第49-50页 |
| 3.4 敲除突变体致病力检测 | 第50-55页 |
| 3.4.1 玻璃纸穿透力检测 | 第50-51页 |
| 3.4.2 对番茄果实侵染能力测定 | 第51页 |
| 3.4.3 接种香蕉苗致病力测定 | 第51-52页 |
| 3.4.4 不同侵染时间病原菌对寄主香蕉苗的侵染情况分析 | 第52-55页 |
| 3.4.4.1 病理组织切片观察菌株对香蕉苗侵染情况 | 第52-55页 |
| 3.4.4.2 不同侵染时间病原菌的侵染情况q PCR定量测定 | 第55页 |
| 3.5 Fo HFI1及相关基因表达分析 | 第55-58页 |
| 3.5.1 Fo HFI1基因在侵染过程的表达分析 | 第55-56页 |
| 3.5.2 Fo HFI1相关基因的q RT-PCR分析 | 第56页 |
| 3.5.3 XJZ2和Fo HFI1敲除突变体白僵菌素合成相关基因的q RT-PCR分析 | 第56-57页 |
| 3.5.4 XJZ2和Fo HFI1敲除突变体镰孢菌酸合成相关基因的q RT-PCR分析 | 第57-58页 |
| 4 结论与讨论 | 第58-62页 |
| 4.1 组织切片在观察病原菌侵染能力的测定 | 第58-59页 |
| 4.2 关于调控细胞壁降解酶CWDEs | 第59页 |
| 4.3 Fo HFI1影响致病过程中的作用 | 第59-60页 |
| 4.4 Fo HFI1对其他基因的调控作用 | 第60-61页 |
| 4.5 本研究的不足之处 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
