水杨酸诱导番茄WRKY转录因子的克隆及功能分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·番茄受到的环境胁迫现状及治理措施 | 第11页 |
| ·植物抗逆转录因子的研究进展 | 第11-15页 |
| ·植物WRKY转录因子的结构与功能 | 第15-20页 |
| ·WRKY转录因子结构与分类 | 第15-17页 |
| ·WRKY转录因子起源与进化 | 第17-18页 |
| ·WRKY转录因子的生物学功能 | 第18-20页 |
| ·WRKY转录因子参与抗逆反应的信号通路 | 第20-22页 |
| ·水杨酸介导的信号途径 | 第20-21页 |
| ·茉莉酸/乙烯介导的信号途径 | 第21页 |
| ·激素类信号传导途径的交叉 | 第21-22页 |
| ·研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 2 水杨酸对番茄抗逆生理生化的影响 | 第24-30页 |
| ·实验材料及仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·番茄的根和叶片处理 | 第24页 |
| ·番茄抗逆生理生化指标的测定 | 第24-26页 |
| ·结果分析与讨论 | 第26-29页 |
| ·POD的活性 | 第26页 |
| ·PPO的活性 | 第26-27页 |
| ·PAL的活性 | 第27-28页 |
| ·蛋白质的含量 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 3 番茄WRKY基因的克隆及分析 | 第30-44页 |
| ·实验材料和仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·RNA的提取 | 第30页 |
| ·SlWRKY基因保守区的获得 | 第30-34页 |
| ·SlWRKY全长cDNA的获得 | 第34-35页 |
| ·SlWRKY转录因子生物信息学分析 | 第35页 |
| ·WRKY表达模式研究 | 第35-36页 |
| ·结果分析与讨论 | 第36-43页 |
| ·RNA的完整性 | 第36页 |
| ·WRKY的保守域及其氨基酸序列 | 第36-37页 |
| ·WRKY全长及推测的氨基酸序列 | 第37-38页 |
| ·WRKY蛋白的理化性质 | 第38-39页 |
| ·番茄与其他物种WRKY的同源性 | 第39-40页 |
| ·番茄WRKY的表达模式 | 第40-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 4 SlWRKY2的表达载体构建及其功能分析 | 第44-57页 |
| ·实验材料与仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·SlWRKY2转录因子植物表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·工程菌的获得 | 第46页 |
| ·SlWRKY2保守域转化烟草 | 第46-47页 |
| ·再生植株的分子检测 | 第47-48页 |
| ·再生植株的耐盐性、耐旱性分析 | 第48页 |
| ·PR1和PR2表达量的检测 | 第48页 |
| ·结果分析与讨论 | 第48-56页 |
| ·构建的植物表达载体 | 第48-50页 |
| ·转SlWRKY2基因烟草的检测 | 第50-52页 |
| ·转基因烟草的耐盐性研究 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草的耐旱性研究 | 第53-54页 |
| ·PR1和PR2的表达量 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 5 转基因烟草生理研究 | 第57-66页 |
| ·实验材料和仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·实验材料处理 | 第57页 |
| ·叶片光合参数(Pn、Gs、Ci、E)的测量 | 第57-58页 |
| ·相对电导率的测量 | 第58页 |
| ·叶绿素含量的测量 | 第58页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测量 | 第58-59页 |
| ·POD活性的测量 | 第59页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测量 | 第59-60页 |
| ·结果分析与讨论 | 第60-64页 |
| ·盐和干旱胁迫对烟草相对电导率的影响 | 第60页 |
| ·盐和干旱胁迫对烟草MDA含量的影响 | 第60-61页 |
| ·盐和干旱胁迫对烟草SOD活性的影响 | 第61-62页 |
| ·盐和干旱胁迫对烟草POD活性的影响 | 第62-63页 |
| ·盐和干旱胁迫对烟草叶绿素含量的影响 | 第63-64页 |
| ·盐和干旱胁迫对烟草光合作用参数的影响 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录A 培养基配方 | 第75-76页 |
| 附录B 电泳用DNA Marker | 第76页 |
| 附录C 论文中所用的质粒图谱 | 第76-77页 |
| 附录D SlWRKY1序列及其对应的氨基酸 | 第77-78页 |
| 附录E SlWRKY2序列及其对应的氨基酸 | 第78-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |