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植物油体表达体系的建立及Profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析

中文摘要第6-8页
英文摘要第8页
第一章 植物油体表达体系文献综述第10-27页
    1.1 基因表达系统第10-12页
    1.2 油体第12-17页
    1.3 油体蛋白oleosin第17-19页
    1.4 oleosin作为融合蛋白表达载体第19-21页
    1.5 受体作物和目标蛋白的选择第21页
    1.6 降钙素第21-25页
    1.7 油菜、棉花作为转基因植物表达oleosin-calcitonin融合蛋白的可行性第25-27页
第二章 植物油体表达体系的建立第27-59页
    2.1 材料和方法第27-40页
        2.1.1 材料第27-28页
        2.1.2 方法第28-40页
    2.2 结果第40-56页
        2.2.1 油菜oleosin启动子的PCR扩增和克隆第40-43页
        2.2.2 芝麻oleosin基因的扩增和克隆第43-45页
        2.2.3 降钙素基因的人工合成第45-47页
        2.2.4 NOP/SO/msCT植物表达载体pNOC121的构建第47-49页
        2.2.5 农杆菌介导的油菜遗传转化第49-51页
        2.2.6 转基因油菜的PCR检测第51页
        2.2.7 海岛棉海7124的花粉管通道法转化第51-52页
        2.2.8 海7124转基因棉花T2代植株的Kan抗性检测第52-54页
        2.2.9 转基因棉花的PCR-Southern检测第54-55页
        2.2.10 棉籽油体蛋白中oleosin-calcitonin目的蛋白的Western检测第55-56页
    2.3 讨论第56-59页
第三章 维管束特异表达及启动子文献综述第59-78页
    3.1 维管束病害第60-62页
    3.2 植物抗真菌和细菌基因工程的主要进展第62-64页
    3.3 profilin第64-68页
    3.4 启动子及基因的维管束特异表达第68-72页
    3.5 启动子的特异表达及转录调控第72-77页
    3.6 profilin2启动子的维管束特异表达第77-78页
第四章 profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析第78-111页
    4.1 材料第78-80页
        4.1.1 植物材料第78页
        4.1.2 菌株第78页
        4.1.3 载体第78页
        4.1.4 PCR引物第78-79页
        4.1.5 P4、P5及P35Sm最小启动子的合成第79页
        4.1.6 本工作所构建的质粒第79-80页
    4.2 方法第80-82页
        4.2.1 拟南芥的培养第80页
        4.2.2 拟南芥总DNA的小量提取第80-81页
        4.2.3 PCR反应程序第81页
        4.2.4 伽蓝菜的遗传转化第81页
        4.2.5 烟草的遗传转化第81-82页
        4.2.6 转基因植物的CUS活性检测第82页
    4.3 结果第82-107页
        4.3.1 Profilin2全长启动子的PCR扩增、克隆及酶切鉴定第82-83页
        4.3.2 Pfn2启动子的亚克隆第83-85页
        4.3.3 Pfn2启动子的测序第85-90页
        4.3.4 植物表达载体的构建第90-94页
        4.3.5 克隆载体的pP1、pP2、pP3的构建第94-99页
        4.3.6 P4、P5及P35Sm启动子的人工合成第99-102页
        4.3.7 pP1-P35Sm、pP2-P35Sm、pP3-P35Sm、pP4-P35Sm、pP5-P35Sm的构建第102-104页
        4.3.8 伽蓝菜的转化及gus基因的短暂和稳定表达本工作的创新点第104-107页
    4.4 讨论第107-111页
本工作的创新点第111-122页

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