中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8页 |
第一章 植物油体表达体系文献综述 | 第10-27页 |
1.1 基因表达系统 | 第10-12页 |
1.2 油体 | 第12-17页 |
1.3 油体蛋白oleosin | 第17-19页 |
1.4 oleosin作为融合蛋白表达载体 | 第19-21页 |
1.5 受体作物和目标蛋白的选择 | 第21页 |
1.6 降钙素 | 第21-25页 |
1.7 油菜、棉花作为转基因植物表达oleosin-calcitonin融合蛋白的可行性 | 第25-27页 |
第二章 植物油体表达体系的建立 | 第27-59页 |
2.1 材料和方法 | 第27-40页 |
2.1.1 材料 | 第27-28页 |
2.1.2 方法 | 第28-40页 |
2.2 结果 | 第40-56页 |
2.2.1 油菜oleosin启动子的PCR扩增和克隆 | 第40-43页 |
2.2.2 芝麻oleosin基因的扩增和克隆 | 第43-45页 |
2.2.3 降钙素基因的人工合成 | 第45-47页 |
2.2.4 NOP/SO/msCT植物表达载体pNOC121的构建 | 第47-49页 |
2.2.5 农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第49-51页 |
2.2.6 转基因油菜的PCR检测 | 第51页 |
2.2.7 海岛棉海7124的花粉管通道法转化 | 第51-52页 |
2.2.8 海7124转基因棉花T2代植株的Kan抗性检测 | 第52-54页 |
2.2.9 转基因棉花的PCR-Southern检测 | 第54-55页 |
2.2.10 棉籽油体蛋白中oleosin-calcitonin目的蛋白的Western检测 | 第55-56页 |
2.3 讨论 | 第56-59页 |
第三章 维管束特异表达及启动子文献综述 | 第59-78页 |
3.1 维管束病害 | 第60-62页 |
3.2 植物抗真菌和细菌基因工程的主要进展 | 第62-64页 |
3.3 profilin | 第64-68页 |
3.4 启动子及基因的维管束特异表达 | 第68-72页 |
3.5 启动子的特异表达及转录调控 | 第72-77页 |
3.6 profilin2启动子的维管束特异表达 | 第77-78页 |
第四章 profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析 | 第78-111页 |
4.1 材料 | 第78-80页 |
4.1.1 植物材料 | 第78页 |
4.1.2 菌株 | 第78页 |
4.1.3 载体 | 第78页 |
4.1.4 PCR引物 | 第78-79页 |
4.1.5 P4、P5及P35Sm最小启动子的合成 | 第79页 |
4.1.6 本工作所构建的质粒 | 第79-80页 |
4.2 方法 | 第80-82页 |
4.2.1 拟南芥的培养 | 第80页 |
4.2.2 拟南芥总DNA的小量提取 | 第80-81页 |
4.2.3 PCR反应程序 | 第81页 |
4.2.4 伽蓝菜的遗传转化 | 第81页 |
4.2.5 烟草的遗传转化 | 第81-82页 |
4.2.6 转基因植物的CUS活性检测 | 第82页 |
4.3 结果 | 第82-107页 |
4.3.1 Profilin2全长启动子的PCR扩增、克隆及酶切鉴定 | 第82-83页 |
4.3.2 Pfn2启动子的亚克隆 | 第83-85页 |
4.3.3 Pfn2启动子的测序 | 第85-90页 |
4.3.4 植物表达载体的构建 | 第90-94页 |
4.3.5 克隆载体的pP1、pP2、pP3的构建 | 第94-99页 |
4.3.6 P4、P5及P35Sm启动子的人工合成 | 第99-102页 |
4.3.7 pP1-P35Sm、pP2-P35Sm、pP3-P35Sm、pP4-P35Sm、pP5-P35Sm的构建 | 第102-104页 |
4.3.8 伽蓝菜的转化及gus基因的短暂和稳定表达本工作的创新点 | 第104-107页 |
4.4 讨论 | 第107-111页 |
本工作的创新点 | 第111-122页 |