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弓形虫棒状体颈部蛋白5和10基因的免疫保护作用及其基因缺失株的构建

摘要第3-5页
Summary第5-6页
英文缩写对照表第7-10页
第一章 文献综述第10-14页
    1 弓形虫及弓形虫病概述第10-11页
    2 弓形虫病疫苗研究进展第11-12页
    3 本研究的目的和意义第12-14页
第二章 弓形虫RON10基因序列变异的研究第14-25页
    1 材料与方法第14-20页
        1.1 材料第14-16页
        1.2 方法第16-20页
    2 结果与分析第20-23页
        2.1 弓形虫RON10基因PCR扩增结果第20页
        2.2 弓形虫RON10基因重组菌液PCR扩增结果第20页
        2.3 不同虫株之间弓形虫RON10基因序列的变异分析第20-23页
    3 讨论第23-25页
第三章 弓形虫p VAX-RON5p、p VAX-RON10 DNA疫苗的制备及免疫效果评价第25-59页
    1 材料与方法第25-44页
        1.1 材料第25-29页
        1.2 方法第29-44页
    2 结果与分析第44-55页
        2.1 弓形虫RON5p和RON10基因PCR扩增结果第44-45页
        2.2 p GEM-RON5p和p GEM-RON10重组质粒的构建结果第45-47页
        2.3 p VAX-RON5p和p VAX-RON10真核表达重组质粒双酶切鉴定结果第47-48页
        2.4 表达质粒p VAX-RON5p和p VAX-RON10转染Marc-145 细胞的免疫荧光鉴定第48页
        2.5 血清中Ig G抗体和Ig G1、Ig G2a抗体亚类的检测第48-50页
        2.6 细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10 和IL-12(p70)的检测第50-52页
        2.7 免疫鼠脾淋巴细胞增殖实验(MTT法)第52页
        2.8 流式细胞分选仪分析CD3e~+CD4~+CD8a~-和CD3e~+CD8a~+CD4~-细胞第52-54页
        2.9 实验鼠腹腔注射感染弓形虫RH株的效果评价第54页
        2.10 实验鼠灌胃感染弓形虫PRU株的效果评价第54-55页
    3 讨论第55-59页
第四章 弓形虫RON5、RON10基因敲除质粒的构建及其缺失株筛选第59-76页
    1 材料与方法第59-68页
        1.1 材料第59-61页
        1.2 方法第61-68页
    2 结果与分析第68-73页
        2.1 Cas9-sg RON5和Cas9-sg RON10敲除质粒的构建结果第68-70页
        2.2 RON5和RON10缺失株的筛选及鉴定第70-72页
        2.3 噬斑实验第72页
        2.4 小鼠毒力实验第72-73页
    3 讨论第73-76页
第五章 全文结论第76-77页
参考文献第77-88页
致谢第88-89页
作者简介第89-90页
导师简介第90-92页

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