摘要 | 第3-5页 |
Summary | 第5-6页 |
英文缩写对照表 | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-14页 |
1 弓形虫及弓形虫病概述 | 第10-11页 |
2 弓形虫病疫苗研究进展 | 第11-12页 |
3 本研究的目的和意义 | 第12-14页 |
第二章 弓形虫RON10基因序列变异的研究 | 第14-25页 |
1 材料与方法 | 第14-20页 |
1.1 材料 | 第14-16页 |
1.2 方法 | 第16-20页 |
2 结果与分析 | 第20-23页 |
2.1 弓形虫RON10基因PCR扩增结果 | 第20页 |
2.2 弓形虫RON10基因重组菌液PCR扩增结果 | 第20页 |
2.3 不同虫株之间弓形虫RON10基因序列的变异分析 | 第20-23页 |
3 讨论 | 第23-25页 |
第三章 弓形虫p VAX-RON5p、p VAX-RON10 DNA疫苗的制备及免疫效果评价 | 第25-59页 |
1 材料与方法 | 第25-44页 |
1.1 材料 | 第25-29页 |
1.2 方法 | 第29-44页 |
2 结果与分析 | 第44-55页 |
2.1 弓形虫RON5p和RON10基因PCR扩增结果 | 第44-45页 |
2.2 p GEM-RON5p和p GEM-RON10重组质粒的构建结果 | 第45-47页 |
2.3 p VAX-RON5p和p VAX-RON10真核表达重组质粒双酶切鉴定结果 | 第47-48页 |
2.4 表达质粒p VAX-RON5p和p VAX-RON10转染Marc-145 细胞的免疫荧光鉴定 | 第48页 |
2.5 血清中Ig G抗体和Ig G1、Ig G2a抗体亚类的检测 | 第48-50页 |
2.6 细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10 和IL-12(p70)的检测 | 第50-52页 |
2.7 免疫鼠脾淋巴细胞增殖实验(MTT法) | 第52页 |
2.8 流式细胞分选仪分析CD3e~+CD4~+CD8a~-和CD3e~+CD8a~+CD4~-细胞 | 第52-54页 |
2.9 实验鼠腹腔注射感染弓形虫RH株的效果评价 | 第54页 |
2.10 实验鼠灌胃感染弓形虫PRU株的效果评价 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-59页 |
第四章 弓形虫RON5、RON10基因敲除质粒的构建及其缺失株筛选 | 第59-76页 |
1 材料与方法 | 第59-68页 |
1.1 材料 | 第59-61页 |
1.2 方法 | 第61-68页 |
2 结果与分析 | 第68-73页 |
2.1 Cas9-sg RON5和Cas9-sg RON10敲除质粒的构建结果 | 第68-70页 |
2.2 RON5和RON10缺失株的筛选及鉴定 | 第70-72页 |
2.3 噬斑实验 | 第72页 |
2.4 小鼠毒力实验 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
第五章 全文结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89-90页 |
导师简介 | 第90-92页 |