摘要 | 第4-5页 |
Summary | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1 虹鳟的生物学特性 | 第10-11页 |
1.1 形态特征 | 第10-11页 |
1.2 生态习性 | 第11页 |
1.3 繁殖习性 | 第11页 |
2 应激 | 第11-13页 |
2.1 应激的概念 | 第11-12页 |
2.2 鱼类养殖生产中常见的应激源 | 第12页 |
2.3 鱼类的应激反应 | 第12-13页 |
2.4 热应激 | 第13页 |
3 HSPs的简述 | 第13-18页 |
3.1 HSPs及其发现过程 | 第13-14页 |
3.2 HSPs分类 | 第14页 |
3.3 HSPs生物学特性 | 第14-15页 |
3.4 HSPs主要生物学功能 | 第15-16页 |
3.5 HSPs的基因表达调节 | 第16页 |
3.6 鱼类HSPs国内外研究现状 | 第16-17页 |
3.7 HSP40及HSP90 | 第17-18页 |
4 Real-time FQ-PCR分析技术 | 第18-24页 |
4.1 Real-time FQ-PCR原理 | 第19-20页 |
4.2 Real-time FQ-PCR中荧光标记方法的分类 | 第20-21页 |
4.2.1 非特异性的DNA结合染料法 | 第20页 |
4.2.2 特异性荧光定量PCR | 第20-21页 |
4.3 Real-time FQ-PCR定量分析方法 | 第21-22页 |
4.3.1 相对定量分析 | 第21-22页 |
4.3.2 绝对定量分析 | 第22页 |
4.4 Real-time FQ-PCR技术的应用 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-36页 |
1 试验材料 | 第24-26页 |
1.1 试验动物 | 第24页 |
1.2 主要仪器设备及试剂 | 第24-25页 |
1.2.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
1.2.2 普通试剂 | 第25页 |
1.2.3 分子生物学试剂 | 第25页 |
1.3 溶液配制 | 第25-26页 |
1.3.1 RNA提取试剂配制 | 第26页 |
1.3.2 琼脂糖凝胶电泳相关溶剂配制 | 第26页 |
2 试验方法 | 第26-33页 |
2.1 热应激处理及其采样 | 第26-27页 |
2.2 总RNA的提取方法 | 第27-28页 |
2.3 RNA浓度及纯度检测 | 第28-30页 |
2.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28-29页 |
2.3.2 采用超微量分光光度计检测 | 第29-30页 |
2.4 cDNA第一条链合成 | 第30-31页 |
2.4.1 基因组DNA的除去反应 | 第30页 |
2.4.2 反转录反应 | 第30-31页 |
2.5 引物设计与合成 | 第31-32页 |
2.6 普通PCR反应筛选扩增条件 | 第32页 |
2.7 Real-time FQ-PCR | 第32-33页 |
3 数据统计处理 | 第33-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-45页 |
1 总RNA提取质量 | 第36页 |
2 普通PCR扩增产物 | 第36-38页 |
3 Real-time FQ-PCR动力学曲线 | 第38-39页 |
4 Real-time FQ-PCR熔解曲线 | 第39-40页 |
5 HSP40 mRNA表达差异 | 第40-42页 |
5.1 HSP40 mRNA组织表达差异 | 第40-41页 |
5.2 同一组织HSP40 mRNA随应激时间表达变化 | 第41-42页 |
6 HSP90β mRNA表达差异 | 第42-45页 |
6.1 HSP90β mRNA组织表达差异 | 第42-43页 |
6.2 同一组织HSP90β mRNA随应激时间表达变化 | 第43-45页 |
第四章 讨论 | 第45-50页 |
1 热应激对虹鳟各组织HSP40和HSP90β mRNA表达水平的影响 | 第45-50页 |
1.1 热应激下虹鳟鳃组织HSP40和HSP90β mRNA的表达 | 第45-46页 |
1.2 热应激下虹鳟脑组织HSP40和HSP90β mRNA的表达 | 第46-47页 |
1.3 热应激下虹鳟肝脏组织HSP40和HSP90β mRNA的表达 | 第47-48页 |
1.4 热应激下虹鳟心脏组织HSP40和HSP90β mRNA的表达 | 第48-49页 |
1.5 热应激下虹鳟脾脏和头肾组织HSP40和HSP90β mRNA的表达 | 第49-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
导师简介 | 第60-61页 |