| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 蓝藻概述 | 第13页 |
| 1.2 蓝藻的遗传学背景 | 第13-14页 |
| 1.3 蓝藻对铁的需求 | 第14-15页 |
| 1.4 集胞藻PCC6803铁吸收机制及研究现状 | 第15-18页 |
| 1.4.1 集胞藻PCC6803 | 第15页 |
| 1.4.2 集胞藻PCC6803的生物学特征 | 第15页 |
| 1.4.3 集胞藻PCC6803对铁吸收利用的研究现状及进展 | 第15-18页 |
| 1.5 铁通透酶(FTR1)研究现状 | 第18-20页 |
| 1.5.1 铁通透酶特征 | 第18页 |
| 1.5.2 真核生物铁通透酶研究现状 | 第18-19页 |
| 1.5.3 非光合细菌铁通透酶研究现状 | 第19-20页 |
| 1.5.4 蓝细菌铁通透酶吸收转运机制研究 | 第20页 |
| 1.6 研究内容和设计方案及其意义 | 第20-22页 |
| 1.6.1 研究内容和设计方案 | 第20-21页 |
| 1.6.2 研究意义 | 第21-22页 |
| 第二章 集胞藻PCC6803铁吸收基因slr0964的敲除及功能研究 | 第22-50页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.2.1 实验材料和培养条件 | 第22页 |
| 2.2.2 蓝藻基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 大肠杆菌培养和质粒的提取 | 第23页 |
| 2.2.4 转基因质粒的构建 | 第23-30页 |
| 2.2.5 蓝藻的转化及实验藻株 | 第30-32页 |
| 2.2.6 蓝藻缺铁及高铁培养条件的处理 | 第32页 |
| 2.2.7 生长速率和叶绿素含量的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR及RT-PCR | 第33-34页 |
| 2.2.9 蛋白免疫印迹 | 第34-36页 |
| 2.2.10 水双相法及蔗糖密度梯度离心法分离集胞藻PCC6803的膜系统 | 第36-37页 |
| 2.2.11 铁吸收速率和铁含量的测定 | 第37-38页 |
| 2.3 实验结果 | 第38-48页 |
| 2.3.1 slr0964-Mut突变株、slr0964-COM、slr0964-OE检测结果 | 第38-39页 |
| 2.3.2 slr0964-Mut突变株生理表型的测定 | 第39-40页 |
| 2.3.3 RT-PCR及荧光定量PCR | 第40-42页 |
| 2.3.4 互补与超表达 | 第42-43页 |
| 2.3.5 铁胁迫 | 第43页 |
| 2.3.6 铁含量和铁吸收速率 | 第43-44页 |
| 2.3.7 酵母和大肠杆菌互补slr0964-Mut突变株 | 第44-47页 |
| 2.3.8 亚细胞定位 | 第47页 |
| 2.3.9 slr0964-Mut突变株对Zn~(2+)、Mn~(2+)的转运吸收 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 集胞藻PCC6803 FTR1与质膜铁转运系统之间的相互关系研究 | 第50-63页 |
| 3.1 前言 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.2.1 多敲除藻株的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.2 多敲除藻株生长速率和铁含量的测定 | 第52页 |
| 3.2.3 酵母双杂交及免疫共沉淀 | 第52-54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-61页 |
| 3.3.1 多敲除藻株的获得与鉴定 | 第54-56页 |
| 3.3.2 多敲除藻株铁含量 | 第56页 |
| 3.3.3 多敲除藻株生长速率 | 第56-59页 |
| 3.3.4 周质空间蛋白FutA2对高铁的耐受性 | 第59页 |
| 3.3.5 周质空间蛋白FutA2与铁通透酶FTR1之间相互作用 | 第59-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 总结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
