中文摘要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5页 |
1 引言 | 第8-12页 |
1.1 神经元迁移与细胞粘附 | 第8-9页 |
1.2 N-cadherin介导细胞之间的粘附 | 第9-10页 |
1.3 DCC可以促进细胞之间的粘附 | 第10-11页 |
1.4 立题依据 | 第11-12页 |
2 材料和方法 | 第12-24页 |
2.1 实验动物及细胞株 | 第12页 |
2.2 质粒 | 第12-13页 |
2.3 抗体 | 第13页 |
2.4 实验器材及试剂 | 第13-15页 |
2.5 细胞培养和PEI转染 | 第15-16页 |
2.6 蛋白样品提取 | 第16页 |
2.7 Western blot(免疫沉淀实验) | 第16-18页 |
2.8 Realtime PCR | 第18-19页 |
2.9 细胞免疫荧光染色 | 第19-20页 |
2.10 组织免疫荧光染色 | 第20页 |
2.11 神经元培养 | 第20-21页 |
2.12 Netrin-1 培养基收集 | 第21-22页 |
2.13 琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
2.14 载体构建 | 第22页 |
2.15 慢病毒包装 | 第22-23页 |
2.16 图片拍摄与统计分析 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-31页 |
3.1 DCC在鼠脑组织中高表达 | 第24页 |
3.2 DCC和N-cadherin存在共定位 | 第24-25页 |
3.3 DCC胞内段和DCC胞外段的构建及表达检测 | 第25-26页 |
3.4 过表达DCC胞内段以及沉默DCC,N-Cadherin表达下调 | 第26页 |
3.5 过表达DCC-ICD以及沉默DCC,β-catenin表达下调 | 第26-27页 |
3.6 Netrin-1 刺激不能补救过表达DCC胞内段造成的N-cadherin表达下调 | 第27-28页 |
3.7 过表达DCC胞内段N-cadherin RNA水平无明显变化,沉默DCC N-cadherin RNA水平下调 | 第28-29页 |
3.8 慢病毒包装及沉默效率检测 | 第29-30页 |
3.9 神经元中沉默DCC,N-cadherin表达下调 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
5 结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
致谢 | 第36页 |