| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 前言 | 第9-15页 |
| 1. 白色念珠菌简介 | 第9-10页 |
| 1.1 白色念珠菌的危害 | 第9页 |
| 1.2 白色念珠菌感染的治疗现状 | 第9-10页 |
| 1.3 白色念珠菌感染检测的研究现状 | 第10页 |
| 2. 白色念珠菌Fba1 蛋白 | 第10-11页 |
| 2.1 白色念珠菌Fbal | 第11页 |
| 2.2 同源性比对 | 第11页 |
| 2.3 重组Fbal | 第11页 |
| 3. 噬菌体展示技术简介 | 第11-13页 |
| 3.1 噬菌体展示技术的原理 | 第11-12页 |
| 3.2 丝状噬菌体展示系统 | 第12-13页 |
| 3.3 噬菌体展示技术的优点 | 第13页 |
| 4. 本论文的研究内容和意义 | 第13-15页 |
| 4.1 研究内容 | 第13-14页 |
| 4.2 研究意义 | 第14-15页 |
| 实验材料与仪器 | 第15-20页 |
| 1. 菌种和载体 | 第15页 |
| 2. 主要试剂和器材 | 第15-16页 |
| 3. 主要仪器 | 第16页 |
| 4. 相关溶液配方 | 第16-19页 |
| 4.1 培养基 | 第16-17页 |
| 4.2 核酸电泳相关溶液配方 | 第17页 |
| 4.3 蛋白、噬菌体电泳相关溶液配方 | 第17-18页 |
| 4.4 银染相关溶液 | 第18页 |
| 4.5 Western Blot相关溶液 | 第18页 |
| 4.6 蛋白制备及纯化相关溶液配方 | 第18页 |
| 4.7 抗体纯化相关溶液 | 第18页 |
| 4.8 ELISA相关溶液 | 第18-19页 |
| 5. 人血清样品 | 第19页 |
| 6. 实验动物 | 第19页 |
| 7. 引物合成与测序 | 第19-20页 |
| 实验方法与步骤 | 第20-28页 |
| 1. 果糖二磷酸醛缩酶原核表达载体的构建及重组蛋白的制备 | 第20-24页 |
| 1.1 白色念珠菌总RNA的提取 | 第20页 |
| 1.2 白色念珠菌cDNA的获得 | 第20-21页 |
| 1.3 白色念珠菌Fba1 基因的获得 | 第21-22页 |
| 1.4 Fba1 基因克隆载体的构建 | 第22-23页 |
| 1.5 Fba1 原核表达载体的构建 | 第23页 |
| 1.6 pET28-Fba1 重组蛋白的制备 | 第23-24页 |
| 2. Fba1 重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
| 2.1 实验动物的免疫及采血 | 第24页 |
| 2.2 心脏取血 | 第24页 |
| 2.3 血清的分离及纯化 | 第24-25页 |
| 2.4 SDS-PAGE凝胶电泳验证 | 第25页 |
| 2.5 Fba1 重组蛋白多克隆抗体的特异性验证 | 第25页 |
| 3. 展示Fba1 蛋白表位的pIII单展示噬菌体的构建及制备 | 第25-26页 |
| 3.1 展示Fba1 蛋白表位的pIII单展示噬菌体的构建 | 第25-26页 |
| 3.2 展示Fba1 蛋白表位的pIII单展示噬菌体的制备 | 第26页 |
| 3.3 展示Fba1 蛋白表位的pIII单展示噬菌体的免疫原性验证 | 第26页 |
| 4. 间接ELISA法检测癌症患者血清中白色念珠菌Fba1 蛋白抗体 | 第26-28页 |
| 实验结果与讨论 | 第28-39页 |
| 1. 果糖二磷酸醛缩酶原核表达载体的构建及重组蛋白的制备 | 第28-33页 |
| 1.1 白色念珠菌总RNA的提取 | 第28页 |
| 1.2 白色念珠菌Fba1 基因的获得 | 第28-29页 |
| 1.3 基因克隆载体的构建 | 第29-30页 |
| 1.4 Fba1 原核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 1.5 pET28-Fba1 原核表达蛋白的制备 | 第31-33页 |
| 2. Fba1 重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
| 2.1 抗血清效价的测定 | 第33页 |
| 2.2 Fba1 多克隆抗体的纯化 | 第33-34页 |
| 2.3 Fba1 重组蛋白多克隆抗体的特异性验证 | 第34页 |
| 3. 展示Fba1 蛋白表位的pIII单展示噬菌体的构建及制备 | 第34-37页 |
| 3.1 pIII单展示噬菌体的构建 | 第34-35页 |
| 3.2 单展示噬菌体的制备 | 第35-37页 |
| 4. 间接ELISA法检测癌症患者血清中白色念珠菌Fba1 蛋白抗体 | 第37页 |
| 4.1 ELISA检测cut-off值的确定 | 第37页 |
| 4.2 癌症患者ELISA检测结果 | 第37页 |
| 5. 讨论 | 第37-39页 |
| 主要结论和创新点 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 在研期间公开发表论文 | 第46页 |
| 在研期间参与的科研项目 | 第46页 |
