| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·前言 | 第12页 |
| ·卵壳前体蛋白 Zona pellucida | 第12-14页 |
| ·卵壳前体蛋白 Zona pellucida 概述 | 第12-13页 |
| ·ZP 基因在硬骨鱼类中的分布 | 第13页 |
| ·ZP 基因的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·稀有鮈鲫的特性 | 第14-15页 |
| ·内分泌干扰物的危害及其与卵壳前体蛋白的关系 | 第15-18页 |
| ·内分泌干扰物的概述 | 第15页 |
| ·内分泌干扰物的危害 | 第15-16页 |
| ·EDCs 的生物标志物 | 第16页 |
| ·EDCs 与卵壳前体蛋白的关系 | 第16-17页 |
| ·本试验用到的内分泌干扰物 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量 PCR 方法 | 第18-21页 |
| ·实时荧光定量的原理和特点 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量 PCR 数据处理方法 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量 PCR 方法的应用 | 第20-21页 |
| ·选题的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 稀有鮈鲫 ZPB 卵壳前体蛋白基因 cDNA 全长的克隆 | 第22-40页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要实验试剂 | 第22页 |
| ·主要实验仪器 | 第22页 |
| ·主要实验溶液及配制 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·grZPBs 基因全长 cDNA 的克隆 | 第22-29页 |
| ·验证测序结果 | 第29-30页 |
| ·用生物信息学知识分析测序结果 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-37页 |
| ·总 RNA 的提取及检测 | 第31-32页 |
| ·稀有鮈鲫 ZPB 基因全长 cDNA 的克隆 | 第32-33页 |
| ·稀有鮈鲫 ZPBs 基因全长 cDNA 的序列结构分析 | 第33-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·ZPB 基因的结构与功能 | 第37-39页 |
| ·ZPB 基因的分布及表达 | 第39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 实时荧光定量 PCR 检测 grZPBs 基因 mRNA 表达 | 第40-50页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·主要实验仪器 | 第40页 |
| ·主要实验试剂 | 第40页 |
| ·主要试剂的配制 | 第40页 |
| ·实验鱼及组织样品 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·EDCs 暴露稀有鮈鲫幼鱼 | 第41页 |
| ·内参基因的筛选 | 第41页 |
| ·实时定量引物的设计与合成 | 第41-42页 |
| ·实时定量引物特异性检测 | 第42-43页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第43页 |
| ·反转录（cDNA 第一链合成） | 第43页 |
| ·RT-qPCR | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·定量引物对的扩增效率 | 第44页 |
| ·RT-qPCR 检测稀有鮈鲫 grZPBs 基因组织表达特异性 | 第44页 |
| ·EDCs 暴露对稀有鮈鲫幼鱼 grZPBs 基因表达的影响 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·RT-qPCR 方法中内参基因的筛选 | 第47页 |
| ·grZPBs 基因的组织表达特异性 | 第47-48页 |
| ·EE2 对稀有鮈鲫 ZP 基因表达的影响 | 第48页 |
| ·4-NP 对稀有鮈鲫 ZP 基因表达的影响 | 第48-49页 |
| ·BPA 对稀有鮈鲫 ZP 基因表达的影响 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-51页 |
| ·实验结论 | 第50页 |
| ·本研究的创新点 | 第50页 |
| ·进一步研究内容 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 缩略词 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
